玉樹地區(qū)寄宿生結(jié)核分支桿菌的培養(yǎng)分離及耐藥性分析

蘇紅梅

(玉樹州疾病預(yù)防控制中心，青海 玉樹 815099)

0 引言

肺結(jié)核作為呼吸內(nèi)科臨床常見病和多發(fā)病，屬于傳染性疾病范疇，近年來的發(fā)病率較高，病人主要是因?yàn)楦腥玖私Y(jié)核分枝桿菌，進(jìn)而侵害其肺部[1]。隨著肺結(jié)核的發(fā)病率逐年增加，各類藥物廣泛運(yùn)用后導(dǎo)致耐藥性問題也日漸凸顯，鑒于此，培養(yǎng)及分離結(jié)核分枝桿菌并對(duì)其耐藥情況進(jìn)行分析，對(duì)于提高臨床藥物治療效果而言有重要意義[2]。本次研究納入了我科2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺結(jié)核病人為對(duì)象，采集其痰液標(biāo)本并展開結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，并將其耐藥情況進(jìn)行總結(jié)，并報(bào)告如下：

1 資料和方法

1.1 基礎(chǔ)資料

回顧性分析2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺結(jié)核病人資料，均為寄宿生，性別：男性72例、女性88例；年齡：14歲-20歲，平均(18.00±0.50)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：均屬于痰液標(biāo)本；病人資料獲得我倫理委員會(huì)審核與批準(zhǔn)；病人(或)及家屬對(duì)于此研究一律知情統(tǒng)一。排除標(biāo)準(zhǔn)：將尿液標(biāo)準(zhǔn)、腦脊液標(biāo)準(zhǔn)及胸腹水標(biāo)本排除；將中途撤離本次研究的病人排除；將臨床資料不完整的病人排除。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集

本次研究采集痰液標(biāo)本主要借助通用的螺旋蓋痰瓶，及直徑為4cm干2cm的蠟紙盒，按照采集的時(shí)間不同將標(biāo)本分為了晨痰、即時(shí)痰與夜間痰這三種，在采集痰液標(biāo)本的時(shí)候先由深吸氣子肺深處咳出的血痰、分干酪痰以及黏液痰才符合痰液標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.2 涂片鏡檢方法

分別取病人患者按醫(yī)囑分別取深部痰液或肺部咳出痰液三份，即晨痰、即時(shí)痰與夜間痰標(biāo)本各一份，經(jīng)涂片行萋尼氏抗酸染色，借助顯微鏡下鏡檢，嚴(yán)格按照《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》[3]中相關(guān)操作方法及流程對(duì)所有病人的痰液標(biāo)本進(jìn)行處理。

1.2.3 培養(yǎng)方法

檢驗(yàn)人員參照我國(guó)防癆協(xié)會(huì)頒布的《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》當(dāng)中的相關(guān)要求與標(biāo)注，現(xiàn)將濃度為4%的氫氧化鈉對(duì)采集到的痰液標(biāo)本進(jìn)行處理，然后移植到酸性的羅氏培養(yǎng)基當(dāng)進(jìn)行培養(yǎng)。其中，針對(duì)陽性的痰液標(biāo)本則可以選擇比例法來測(cè)定其藥物的敏感性。本院使用的結(jié)核分枝桿菌藥敏試劑包括了鏈霉素、利福平、異煙肼、利福噴丁、乙胺丁醇、卷曲霉素、左氧氟沙星、對(duì)氨基水楊酸鈉、阿米卡星這九種，而其中由于利福噴丁與利福平存在相同的藥理作用，所以在統(tǒng)計(jì)耐藥性的時(shí)候全部按照利福平處理，本次培養(yǎng)與分離處理中涉及的試劑、培養(yǎng)基等一律購(gòu)于珠海貝索生物技術(shù)有限公司。

1.3 耐藥性判斷標(biāo)準(zhǔn)

本次研究中對(duì)于結(jié)核分枝桿菌的耐藥情況，主要參照《耐藥結(jié)核病化學(xué)治療指南》中的相關(guān)標(biāo)在進(jìn)行判斷，一共分做了五種等級(jí)，分別是利福平耐藥、單耐藥、多耐藥以及耐多藥、廣泛耐藥，其中，結(jié)核分枝桿菌僅僅對(duì)一種一線的抗結(jié)核藥物產(chǎn)生耐藥，視為單耐藥情況；若結(jié)核分枝桿菌僅對(duì)利福平產(chǎn)生耐藥，則視為利福平耐藥；若結(jié)核分枝桿菌對(duì)大于一種的一線抗結(jié)核藥物產(chǎn)生耐藥，且不同時(shí)間段對(duì)利福平、異煙肼產(chǎn)生耐藥，則可以視為多耐藥；若結(jié)核分枝桿菌同一時(shí)間段對(duì)利福平與異煙肼產(chǎn)生耐藥，則視為耐多藥；最后，若結(jié)核分枝桿菌在耐多藥的同時(shí)至少同時(shí)對(duì)1種二類抗結(jié)核藥物與1種氟喹諾酮類藥物產(chǎn)生耐藥，則視為廣泛耐藥[4]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理

數(shù)據(jù)用軟件SPSS 23.0處理，計(jì)數(shù)資料以%表示，χ2檢驗(yàn)、計(jì)量資料以(±s)表示，t檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 分析160例病人涂片檢查結(jié)果

本次研究的160例結(jié)核分枝桿菌陽性病人，有146例屬于結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病例，所占比例是91.25%；其余14例屬于非結(jié)核桿菌復(fù)合群，所占比例是8.75%，兩者對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2=217.8000，P<0.05。

在146例結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病例痰涂片陽性檢出率78.77%(115/146)，高于非結(jié)核桿菌復(fù)合群痰涂片檢查的陽性檢出率50.00%(7/14)，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2=5.8378，P<0.05。

2.2 耐藥情況分析

14例非結(jié)核桿菌復(fù)合群病人對(duì)本次研究的所有抗結(jié)核藥物均存在耐藥情況。而146例結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病人對(duì)本次研究涉及的九種抗結(jié)核藥物存在95例不耐藥，所占比例是65.07%，耐藥51例，所占比例是34.93%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2=26.5205，P<0.05，其中，以異煙肼的耐藥率最高，其次是鏈霉素，最后是利福平、左氧氟沙星，耐藥的詳細(xì)情況如表2所示。

2.3 初治與復(fù)治的耐藥及類型分析

146結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病人中，初治病人共116例，所占比例是79.45%；復(fù)治病人是30例，所占比例20.55%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2=101.3151，P<0.05。其中，116例初治病人對(duì)的耐藥率是22.41%(26/116),30例復(fù)治病人中耐藥率是83.33% (25/30)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2=38.9181，P<0.05。

表1 51例結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病人的耐藥情況(n/%)

從耐藥類型來看：復(fù)治病人在廣泛耐藥方面所占比例較初治病人高，χ2=4,5140，P<0.05，詳細(xì)情況如表2所示。

表2 復(fù)治病人與初治病人的耐藥類型分布情況(%,n)

3 討論

肺結(jié)核是一種常見的傳染性疾病，隨著該病的臨床患病率逐年增加，各類抗結(jié)核藥物在臨床上的廣泛使用，是的耐藥問題越來越明顯，已經(jīng)收到臨床醫(yī)務(wù)人員的廣泛關(guān)注。對(duì)病人展開痰液標(biāo)本采集，并進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行培養(yǎng)研究，對(duì)于明確病人的藥敏情況，便于及時(shí)調(diào)整治療方案，提高效果[5]。

本次研究中，通過采集的160例肺結(jié)核病人的痰液標(biāo)本，160例病人結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群陽性占91.25%，高于非結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群的8.75%，P<0.05。結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病例痰涂片陽性檢出率是78.77%，高于非結(jié)核桿菌復(fù)合群的50.00%，P<0.05。由此說明通過痰液標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌的陽性情況，有較高的價(jià)值。從病人的耐藥情況來看，非結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群病人對(duì)本次研究的所有抗結(jié)核藥物均存在耐藥情況，提示這類肺結(jié)核病人的臨床治療難度更大。而在結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病人中不耐藥(65.07%)與耐藥(34.93%)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，耐藥率較高的四種藥物依次是異煙肼、鏈霉素、利福平、左氧氟沙星，說明在治療結(jié)核桿菌復(fù)合群陽性病人過程中，主要對(duì)上述幾種藥物產(chǎn)生耐藥作用，建議在臨床治療中酌情使用，盡可能選擇其他抗結(jié)核藥物來治療，減少病人耐藥的風(fēng)險(xiǎn)。

一般情況下，肺結(jié)核很難徹底根治，病情容易反復(fù)發(fā)作，臨床上將首次接受治療的人成為初治病人，而非首次治療的病人則為復(fù)治病人。初治病人的病情較輕，治療難度低于復(fù)治病人，所以在耐藥方面復(fù)治病人更容易對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥作用[6]。本次研究組，初治病人的耐藥率(22.55%)低于復(fù)治病人(83.33%)，P<0.05，且在廣泛耐藥方面的差異最為顯著，P<0.05，且復(fù)治病人存在廣泛耐藥情況，臨床用藥難度更大。

綜上，經(jīng)過展開一系列的藥敏實(shí)驗(yàn)分析，能夠明確各類型肺結(jié)核病人的耐藥情況，為臨床治療提供客觀參考。