急重癥胰腺炎合并肝損傷患者IL-10、TGFβ及其mRNA水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性

焦芳芳 張偉 武云珍

急重癥胰腺炎(SAP)是一種發(fā)生于腹部的常見外科急癥，患者早期發(fā)病隱匿，但可較為迅速發(fā)展導(dǎo)致器官功能損害，使得患者院內(nèi)死亡率增加[1]。肝損傷是SAP患者較常見表現(xiàn)，影響機(jī)體代謝進(jìn)而增加其病死風(fēng)險(xiǎn)[2]。目前研究表明，SAP多由胰腺組織自身消化出現(xiàn)局部炎癥反應(yīng)而引起，因而促炎細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)在其中發(fā)揮舉足輕重的作用[3-4]。本研究分析SAP合并肝損傷患者外周血中白細(xì)胞介素10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)及其轉(zhuǎn)錄物(mRNA)與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果如下。

資料與方法

一、基礎(chǔ)資料

收集東營(yíng)市人民醫(yī)院2018年10月至2020年10月60例SAP患者，根據(jù)其有無合并肝損傷分為合并組(合并肝損傷)及SAP(未合并肝損傷)組，每組30例，另納入同期體格者30名(對(duì)照組)；其中合并組：男、女分別為17、13例；年紀(jì)48～72(54.34±8.67)歲；體質(zhì)量指數(shù)17～26(22.45±2.23)kg/m2；SAP組：男、女分別為19、11例；年紀(jì)47～71(52.86±7.74)歲；BMI 17～25(22.67±2.18)kg/m2；對(duì)照組：男、女分別為18、12名；年紀(jì)44～70(55.10±7.96)歲；BMI 17～26(23.05±2.64)kg/m2；對(duì)比兩組人口學(xué)及病理信息特征，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，本研究在倫理審核后方通知患者進(jìn)行相關(guān)操作。

二、納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

(一)納入標(biāo)準(zhǔn) (1)參照指南[5]確診，對(duì)照組經(jīng)檢查無明顯異常；(2)44～72歲；(3)SAP患者病程<72 h；(4)患者(或志愿者)和家屬知曉試驗(yàn)方法和目的且簽字同意。

(二)排除標(biāo)準(zhǔn) (1)既往存在慢性肝炎、肝硬化或其他類型慢性肝??；(2)腦、心、腎器質(zhì)性受損；(3)外部能量損傷或因手術(shù)操作不當(dāng)引起的SAP；(4)患有惡性腫瘤，生存時(shí)間少于3個(gè)月；(5)院外已使用生長(zhǎng)抑素或免疫抑制劑類藥物。

三、方法

(一)血液采集 在所有患者(或志愿者)入院時(shí)即刻采集空腹靜脈血，收取5 mL血液后以2 000 r/min速度離心，ELISA檢測(cè)血清IL-10、TGFβ 水平，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)肝功能，儀器為Beckman LX-20全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑盒；IL-10 mRNA、TGFβmRNA水平在提取靜脈血轉(zhuǎn)錄物后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，采用PCR進(jìn)行基因擴(kuò)增，通過軟件分析其擴(kuò)增情況并取平均值作為測(cè)量結(jié)果。

(二)肝損傷測(cè)定 肝損傷測(cè)定主要通過SAP患者ALT、AST水平測(cè)量結(jié)果進(jìn)行區(qū)分，當(dāng)ALT或(和)AST>40 U/L時(shí)可判定為合并肝損傷，ALT和AST均≤40 U/L時(shí)則未合并肝損傷[6]。

(三)觀察指標(biāo) (1)比較三組IL-10、TGFβ、IL-10mRNA、TGFβmRNA檢測(cè)結(jié)果；(2)比較三組AST、ALT、TBil、GGT、ALP水平；(3)通過Spearman系數(shù)分析SAP合并肝損傷患者肝功能指標(biāo)AST、ALT、TBil、GGT、ALP與IL-10、IL-10 mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平的相關(guān)性。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較

三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較呈遞減趨勢(shì)，合并組最高(P<0.05)。見表1。

表1 三組IL-10、TGFβ及其mRNA水平比較(±s)

二、三組肝功能指標(biāo)比較

三組肝功能相關(guān)指標(biāo)呈遞減趨勢(shì)，合并組肝功能指標(biāo)水平高于SAP組、對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 三組肝功能比較(±s)

三、肝功能與IL-10、TGFβ及其mRNA的關(guān)系

SAP合并肝損傷患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平與AST、ALT、GGT、ALP、TBil水平呈明顯正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 肝功能與IL-10、TGFβ及其mRNA的關(guān)系

討 論

炎癥介質(zhì)會(huì)在全身發(fā)生炎性反應(yīng)時(shí)被大量釋放于外周血，抗炎因子在對(duì)抗炎性反應(yīng)時(shí)會(huì)在一定程度上阻撓機(jī)體對(duì)病原體所造成的免疫作用，因而發(fā)生代償性抗炎癥反應(yīng)綜合征[7-8]。SAP患者肝臟會(huì)在IL-10、TGFβ的引導(dǎo)下合成纖連蛋白及成纖維細(xì)胞調(diào)節(jié)膠原，促進(jìn)組織纖維化的發(fā)生、發(fā)展[9]。

本研究結(jié)果顯示，三組IL-10、IL-10mRNA水平比較合并組>SAP組>對(duì)照組，同時(shí)合并組TGFβ、TGFβmRNA更高，提示SAP合并肝損傷患者以上指標(biāo)異常表達(dá)。IL-10有抗炎和誘導(dǎo)免疫的作用。既往研究顯示，患者在肝臟發(fā)生損傷時(shí)IL-10mRNA表達(dá)增加從而使得單核巨噬細(xì)胞失去活動(dòng)，抑制T細(xì)胞的分化及增生，免疫監(jiān)視功能被削弱，同時(shí)IL-10過量分泌反而增強(qiáng)其負(fù)向調(diào)節(jié)功能，使機(jī)體免疫平衡受到破壞[10]。TGFβ能在促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)生成的同時(shí)阻撓其降解，使得肝細(xì)胞的再生和損傷受到抑制[11]。患者因SAP而引起肝臟損傷時(shí)，壞死的細(xì)胞在細(xì)胞膜破裂和激活的炎癥細(xì)胞分泌細(xì)胞因子作用下引起肝臟炎性反應(yīng)，重大損傷發(fā)生后肝細(xì)胞重新進(jìn)入增殖模式，而TGFβmRNA參與其中并精密調(diào)控肝再生，這與于寧[12]等的研究相一致。

合并組肝功能指標(biāo)水平顯著高于另2組，提示SAP合并肝損傷患者外周血中肝細(xì)胞指標(biāo)均會(huì)出現(xiàn)明顯異常。當(dāng)患者發(fā)生急性胰腺炎時(shí)，胰腺水腫繼而堵塞膽道，使得肝細(xì)胞受到損害，長(zhǎng)時(shí)間的梗阻使得轉(zhuǎn)氨酶活性變化規(guī)律發(fā)生異常，釋放各種酶類、氧自由基等[13-14]。GGT分泌于肝細(xì)胞的胞漿毛細(xì)血管一側(cè)和整個(gè)膽管系統(tǒng)，肝細(xì)胞因?yàn)檠装Y因子腫脹或膽汁壓迫刺激影響下而增加分泌[15]。

SAP合并肝損傷患者IL-10、IL-10mRNA、TGFβ、TGFβ mRNA水平與肝功能水平呈明顯正相關(guān)，提示SAP合并肝損傷患者者IL-10、TGFβ及其mRNA水平與肝功能指標(biāo)相關(guān)?？紤]因SAP引起肝損傷，而人體免疫調(diào)控機(jī)制通過分泌IL-10、TGFβ來進(jìn)行肝臟免疫調(diào)控，但仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。