自身抗體聯(lián)合生化檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)在自身免疫性肝炎診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值

趙紅紀(jì)

（洛陽市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 洛陽 471002）

自身免疫性肝炎（AIH）是內(nèi)科常見疾病，部分患者會(huì)出現(xiàn)嘔血、黑便等癥狀［1］，嚴(yán)重時(shí)可快速進(jìn)展為肝硬化甚至肝衰竭。目前，臨床AIH的確切發(fā)病率還未完全明確，但據(jù)國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道顯示其發(fā)病率逐年上升［2］。因此，對(duì)AIH進(jìn)行早期準(zhǔn)確診斷的意義重大。既往肝穿病理檢查為臨床診斷AIH的常用方法，但存在一定盲區(qū)，且需輔以酶學(xué)、血清學(xué)檢測(cè)，近年來臨床應(yīng)用率明顯下降。研究［3］表明，AIH患者的自身抗體陽性率較高，有助于AIH的臨床診斷?；诖?，本研究選取63例AIH患者、60名健康體檢者進(jìn)行自身抗體、生化檢測(cè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，旨在探討其對(duì)于AIH的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年7月至2020年6月我院收治的63例AIH患者作為研究組，其中男25例，女38例；年齡25~72歲，平均（47.83±12.10）歲。選取同期60名健康體檢者作為參照組，其中男27例，女33例；年齡27~69歲，平均（47.74±11.35）歲。兩組一般資料比較無明顯差異（P＞0.05）。

1.2 方法兩組受檢者進(jìn)行自身抗體、生化檢測(cè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)：①標(biāo)本采集：抽取受檢者清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r／min離心處理，分離血清后再進(jìn)行酶學(xué)、免疫學(xué)檢測(cè)。②檢測(cè)方法：自身抗體：采用間接免疫熒光法檢測(cè)抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、抗平滑肌抗體（ASMA），采用免疫印跡法檢測(cè)抗線粒體抗體M2亞型（AMA－M2）、抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體（LC－1），所用試劑盒均購自德國(guó)歐蒙公司，嚴(yán)格按照試劑盒操作要求進(jìn)行操作。生化檢測(cè)指標(biāo)：采用貝克曼5811型全自動(dòng)生化分析儀（購自上海合富）檢測(cè)谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP），所用試劑盒均為原裝配套產(chǎn)品，嚴(yán)格按照試劑盒操作要求進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo)①自身抗體：包括ANA、AMA、ASMA、AMAM2、LC－1，檢測(cè)其陽性率。ANA、AMA、ASMA陽性判定方法與標(biāo)準(zhǔn)如下：用緩沖液以1∶100比例稀釋血清標(biāo)本，于已含抗原的滴定板每個(gè)孔內(nèi)滴加25μL血液稀釋液，進(jìn)行陰、陽性對(duì)比，然后封板、溫育30 min，滴加20μL FITC標(biāo)記抗人IgG，再溫育30 min后洗片，最后于熒光顯微鏡下觀察封片，將滴度≥1∶100的血清標(biāo)本判定為陽性。AMA－M2、LC－1的陽性判定方法與標(biāo)準(zhǔn)如下：用緩沖液以1∶100比例稀釋血清標(biāo)本，于已含抗原的滴定板每個(gè)孔內(nèi)滴加50μL血液稀釋液，進(jìn)行陰、陽性對(duì)比，然后封板，于室溫下?lián)u擺孵育30 min后洗片，再滴加酶標(biāo)記抗人IgG，于室溫下孵育30 min后洗片，在其反映區(qū)域增加底物顯色10 min，水洗停止反應(yīng)，最后采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)色條帶對(duì)比觀察特定區(qū)域的條帶，將較為清晰的強(qiáng)著色帶判定為陽性。②生化檢測(cè)指標(biāo)：包括GGT、AST、ALT、ALP，其中GGT參考值為男性11~50 U／L，女性7~32 U／L；AST、ALT參考值為0~40 U／L；ALP參考值為男性45~125 U／L，女性50~135 U／L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 自身抗體檢測(cè)結(jié)果與參照組相比，研究組ANA、AMA、ASMA、AMA－M2、LC－1陽性檢出率更高（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組的自身抗體陽性檢出率比較［n（%）］

2.2 生化檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果與參照組相比，研究組的GGT、AST、ALT、ALP水平更高（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組的生化檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較（±s，U／L）

表2 兩組的生化檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較（±s，U／L）

組別 n GGT AST ALT ALP研究組63 155.62±17.15 217.90±13.25 252.25±19.20 139.32±18.03參照組60 23.90±7.88 23.16±5.44 25.38±6.52 84.36±15.22 t 54.278 105.663 86.867 18.224 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 ANA陽性者核型分布情況研究組ANA陽性者主要核型為均質(zhì)型、核仁型，而參照組則為顆粒型。見表3。

表3 兩組ANA陽性者核型分布情況比較［n（%）］

3 討論

AIH是自身免疫反應(yīng)介導(dǎo)的一種慢性肝臟炎性疾病，其發(fā)生與患者自身免疫功能存在一定關(guān)系［4］?，F(xiàn)階段臨床對(duì)AIH發(fā)病原因尚未完全明確，只確定其多發(fā)于慢性肝炎群體，其中病毒性肝炎占比最大，約有20%的患者血液病毒檢測(cè)結(jié)果雖顯示陰性，但其生化檢測(cè)指標(biāo)已改變，再加上AIH早期癥狀與病毒性感染相似，故檢測(cè)自身抗體、生化檢測(cè)指標(biāo)對(duì)AIH的臨床診治具有重要意義［5］。自身抗體主要為機(jī)體器官、組織及細(xì)胞的抗體，健康人群血清中自身抗體的滴度較低，若自身抗體滴度明顯高于正常參考值，將會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生負(fù)面影響。

本研究結(jié)果顯示，與參照組相比，研究組的ANA、AMA、ASMA、AMA－M2、LC－1陽性檢出率更高，其中ANA陽性檢出率高達(dá)84.13%，可見ANA與AIH的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，與谷雷等［6］的研究結(jié)果基本一致。自身抗體廣泛存在于機(jī)體內(nèi)，在多種結(jié)締組織疾病和自身免疫疾病中均異常升高。近年來，隨著臨床對(duì)AIH診斷研究的深入，AIH患者除自身抗體的陽性率偏高外，其還存在不同程度的肝臟損害［7］。本研究結(jié)果還顯示，與參照組相比，研究組的GGT、AST、ALT、ALP水平更高，提示AIH患者的生化檢測(cè)指標(biāo)發(fā)生了顯著變化。上述結(jié)果表明，自身抗體、生化檢測(cè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AIH診斷具有重要價(jià)值，與郭輝等［8］的研究結(jié)果基本一致。ANA核型包括均質(zhì)型、核仁型、顆粒型、核膜型及著絲點(diǎn)型等。本研究中，研究組53例ANA陽性者主要核型為均質(zhì)型、核仁型，而參照組7名ANA陽性者主要核型為顆粒型。因此，通過核型特征鑒別診斷AIH具有重要意義。

綜上所述，自身抗體、生化檢測(cè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可提升AIH的臨床確診率，有助于指導(dǎo)臨床治療，值得臨床推廣。