血清金屬蛋白酶組織抑制因子、白細(xì)胞介素2與白細(xì)胞介素10和D-二聚體對下肢靜脈曲張的診斷價值

朱雪峰，俞士剛，吳一峰

江蘇省無錫市第九人民醫(yī)院(無錫市骨科醫(yī)院)普外科，無錫 214000

靜脈曲張是血管外科常見病，與年齡呈正相關(guān)。近些年來，我國靜脈曲張人群患病率呈上升趨勢，為患者及家庭帶來負(fù)擔(dān)[1]。靜脈曲張作為一種慢性進展性炎癥疾病，機體血液成分、血細(xì)胞、血流特征是導(dǎo)致靜脈功能不全的重要機制[2]。金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMP)與血管基質(zhì)纖維化有關(guān)。研究表明[3]TIMP參與調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的代謝，影響靜脈管壁的機械功能，在曲張靜脈中具有較高的陽性表達率，而在正常大隱靜脈中的陽性表達率較低。D-二聚體(D-dimer)是交聯(lián)纖維蛋白特異性降解產(chǎn)物，其血清含量升高提示繼發(fā)性纖溶活性增強以及高凝狀態(tài)[4]。白細(xì)胞介素2(IL-2)是加重炎癥反應(yīng)細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素10(IL-10) 是控制炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子，可調(diào)控炎癥反應(yīng)[5]。本研究通過與健康人群比較，分析下肢靜脈曲張患者血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer含量變化，分析其在下肢靜脈曲張診斷中的應(yīng)用價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2019年1月至2020年6月無錫市第九人民醫(yī)院收治的120例下肢靜脈曲張患者為下肢靜脈曲張組，其中男性63例，女性57例；年齡范圍47～78歲，年齡(59.9±5.8)歲。另選取40例于本院進行健康體檢者作為對照組，其中男性22例，女性18例；年齡48～79歲，平均(59.8±5.8)歲。兩組患者性別、年齡資料比較(P>0.05)。

1.2 下肢靜脈曲張患者的納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合大隱靜脈曲張診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，CEAP分級C2～C6；(2)深靜脈通暢，僅表現(xiàn)為大隱靜脈或交通支靜脈瓣膜功能不全；(3)經(jīng)無錫市第九人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并嚴(yán)重心、肝、腎等器官功能障礙；(2)合并血液、免疫或內(nèi)分泌性疾病；(3)深靜脈血栓性疾病患者。

1.3 方法 所有受試著取清晨空腹靜脈血6 mL，3 000 r/min速度離心15 min，分離，取上清液，于-70 ℃低溫下保存待測。TIMP-1含量、血清IL-2、IL-10含量檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測；D-dimer檢測應(yīng)用日本Sysmex公司CA-1500全自動血凝分析儀，采用膠乳增強免疫比濁法定量檢測。

1.4 靜脈曲張嚴(yán)重程度評估 通過洪堡靜脈曲張嚴(yán)重程度評分量表(HVVSS)評價患者臨床癥狀，從癥狀、臨床嚴(yán)重程度、功能型損害進行評價，本研究僅采取其癥狀評價部分，從腿部沉重壓迫感、腫脹感、瘙癢、疼痛4個問題，每個問題計0～5分，分?jǐn)?shù)越高代表癥狀越嚴(yán)重[7]。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer含量比較 下肢靜脈曲張組患者血清TIMP-1、D-dimer、IL-2含量高于對照組，IL-10含量低于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer含量比較

2.2 血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer診斷下肢靜脈曲張價值分析 為探討血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer等4個指標(biāo)對下肢靜脈曲張的診斷評估價值，特建立ROC曲線診斷分析模型，以下肢靜脈曲張組為陽性樣本，以對照組為陰性樣本。血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer聯(lián)合檢測診斷下肢靜脈曲張ROC曲線下面積為0.862，分別高于單獨檢測ROC曲線下面積0.711、0.676、0.736、0.759(P<0.05)。見表2，圖1。

表2 血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer診斷下肢靜脈曲張價值分析

注：TIMP-1為金屬蛋白酶組織抑制因子；IL-2為白細(xì)胞介素2；IL-10為白細(xì)胞介素10；D-dimer為D-二聚體。

2.3 下肢靜脈曲張患者HVVSS癥狀評分與血清指標(biāo)的相關(guān)性分析 120例下肢靜脈曲張患者HVVSS癥狀評分(9.25±1.91)分，Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示患者HVVSS癥狀評分與血清TIMP-1、D-dimer呈正相關(guān)(r=0.358，r=0.321,P值均<0.05)，與血清IL-2、IL-10含量無相關(guān)性(P>0.05)?；颊逪VVSS癥狀評分與血清TIMP-1、D-dimer指標(biāo)的相關(guān)數(shù)據(jù)散點圖見圖2。

3 討論

靜脈曲張是全身大血管、微血管病變常見合并疾病類型，在靜脈高壓、管壁缺氧等始動因素驅(qū)動下，白細(xì)胞激活、炎癥介質(zhì)釋放導(dǎo)致血管壁重塑[8]，因此部分學(xué)者認(rèn)為[9]靜脈曲張是系統(tǒng)炎癥反應(yīng)的結(jié)果，治療的關(guān)鍵在于靜脈血液逆流，緩解炎癥。炎癥細(xì)胞因子依照其作用機制可分為促炎癥細(xì)胞因子和抗炎癥細(xì)胞因子，其中促炎癥細(xì)胞因子包括IL-2、TNF-α、IL-1β、IL-6 和IL-8等，而抗炎癥細(xì)胞因子包括IL-4、IL-10、IL-13、轉(zhuǎn)化生長因子β、集落刺激因子等[10]。本研究中下肢靜脈曲張組IL-2含量高于對照組，IL-10含量低于對照組，與有關(guān)研究[11-13]結(jié)果一致。進一步分析兩者對下肢靜脈血栓疾病的診斷價值，ROC曲線下面積分別為0.676、0.736，提示兩者可作為下肢靜脈血栓疾病診斷的參考依據(jù)。

金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)是基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)主要內(nèi)源性抑制因子，其家族包括4個成員，以其發(fā)現(xiàn)先后順序命名為TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3 和TIMP-4，四者均可與特定活性MMP結(jié)合形成1∶1的復(fù)合物，不可逆結(jié)合，抑制MMP對細(xì)胞外機制的降解活性，同與酶原結(jié)合阻止其活化進程[14]。TIMP-1可抑制大部分MMPs，尤其是MMP-1活性。賀新奇等[15]研究表明TIMP-1廣泛存在于人體組織與體液中，可由多種細(xì)胞因子例如TNF-α、IL-1誘導(dǎo)生成，其作為基質(zhì)降解抑制因子，在曲張靜脈中表達增加。本研究中下肢靜脈曲張組患者血清TIMP-1含量高于對照組，下肢靜脈曲張診斷ROC曲線下面積為0.711。下肢靜脈曲張患者血液淤積于淺靜脈，局部血流速度緩慢，全身與局部血流動力學(xué)改變，血液中 D-dimer含量增加，機體高凝狀態(tài)與繼發(fā)性纖溶活性增強。本研究中下肢靜脈曲張組患者血清D-dimer含量高于對照組，其在疾病診斷中ROC曲線下面積為0.759，且特異度達到82.5%，靈敏度僅為60.8%，這可能是由于臨床上冠心病、動脈硬化等亦均可引起D-dimer含量升高，單純檢測D-dimer陽性結(jié)果意義不大，陰性預(yù)測價值更高。

注：TIMP-1為金屬蛋白酶組織抑制因子；D-dimer為D-二聚體；HVVSS為洪堡靜脈曲張嚴(yán)重程度評分量表。

血清TIMP-1、IL-2、IL-10、D-dimer四項指標(biāo)聯(lián)合檢測對下肢靜脈曲張的診斷價值，ROC曲線下面積為0.862，高于4項指標(biāo)單獨檢測，診斷效能較高。本研究通過HVVSS癥狀評分評價靜脈曲張患者病情，分析上述血清指標(biāo)與HVVSS癥狀評分的相關(guān)性，結(jié)果顯示HVVSS癥狀評分與血清TIMP-1、D-dimer含量呈正相關(guān)，說明TIMP-1、D-dimer含量與下肢靜脈曲張患者疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。

綜上所述，下肢靜脈曲張患者血清TIMP-1、D-dimer、IL-2含量升高，IL-10含量降低，聯(lián)合檢測上述血清指標(biāo)可作為下肢靜脈曲張患者篩查指標(biāo)，對疾病的早期診斷具有一定臨床價值，且血清TIMP-1、D-dimer與可反映患者疾病癥狀嚴(yán)重程度。