不同克氏原螯蝦養(yǎng)殖模式下幼蝦生長、體成分和血淋巴生化指標的比較

徐 濱，魏開金，馬寶珊，徐 進，朱祥云，劉 偉

(中國水產(chǎn)科學研究院長江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水生物多樣性保護重點實驗室，武漢 430223)

養(yǎng)殖模式指在某一特定條件下，使養(yǎng)殖生產(chǎn)達到一定產(chǎn)量而采用的經(jīng)濟與技術相結合的規(guī)范化養(yǎng)殖方式。由于養(yǎng)殖模式的不同，在生長特性和品質(zhì)特性上會有所差異[1]。養(yǎng)殖模式會影響?zhàn)B殖對象的生存對策，同時也會改變其生命代謝特征[2-3]。生長性能、體成分、血清生化是衡量水產(chǎn)養(yǎng)殖動物健康程度的重要指標，也是其生存狀況、生命代謝的重要依據(jù)[4-5]，對比不同養(yǎng)殖模式生長性能、體成分、血清生化指標，揭示由養(yǎng)殖模式引起的生存對策、生理代謝的變化本質(zhì)，對推進水產(chǎn)動物的健康高效養(yǎng)殖具有重要意義。

克氏原螯蝦(Procambarusclarkii)俗稱小龍蝦，屬甲殼綱十足目螯蝦科原螯蝦屬，原產(chǎn)于墨西哥北部和美國南部，是我國重要的經(jīng)濟水產(chǎn)養(yǎng)殖對象之一，也是目前淡水蝦類增養(yǎng)殖的主要品種[6-7]。近年來，國內(nèi)外學者對克氏原螯蝦的關注與研究較多[8-12]，同時隨著克氏原螯蝦價格的提高、養(yǎng)殖規(guī)模的擴大，出現(xiàn)了多種多樣的養(yǎng)殖模式，養(yǎng)殖模式的發(fā)展對克氏原螯蝦養(yǎng)殖起著積極的促進作用，而不同養(yǎng)殖模式的養(yǎng)殖效果研究還存在空白。本研究通過對江漢平原池塘單養(yǎng)、蝦魚混養(yǎng)、蝦蟹混養(yǎng)、稻蝦養(yǎng)殖四種養(yǎng)殖模式的幼蝦的生長、體成分、血淋巴生化指標等進行了分析，為比較不同養(yǎng)殖模式的特點，生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)綠色水產(chǎn)品提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 養(yǎng)殖實驗

實驗用蝦均取自湖北潛江水產(chǎn)局后湖稻蝦養(yǎng)殖基地，其中蝦單養(yǎng)、蝦魚混養(yǎng)、蝦蟹混養(yǎng)養(yǎng)殖實驗于湖北百瑞生物公司仙桃基地內(nèi)進行，實驗池為水泥池，大小為(6 m×6 m×1 m)，小龍蝦養(yǎng)殖密度12 尾/m2，蝦魚(小龍蝦：泥鰍)和蝦蟹(小龍蝦：中華絨螯蟹)數(shù)量比均為12 ∶1。每組設3個平行，養(yǎng)殖用水為經(jīng)曝氣過濾的室外池塘水，投喂飼料為市場上常見的蝦蟹飼料，蛋白含量為30%，日投喂量為蝦體重的5%～7%，同時每隔10 d，投放水草一次；稻蝦養(yǎng)殖在湖北潛江水產(chǎn)局后湖稻蝦養(yǎng)殖基地進行(每口稻田面積33 330 m2，共20口，在稻田四周挖溝，溝寬3～4 m，溝深1～1.5 m，中晚稻，6月份插秧)，養(yǎng)殖密度12 尾/m2，同時種植水草，投喂飼料同為蛋白含量為30%的蝦蟹飼料，日投喂量為蝦體重的5%～7%。定期用YSI EXO2水質(zhì)分析儀監(jiān)測水溫、溶氧、pH、葉綠素、藍綠藻、氨氮、硝氮等水質(zhì)指標，養(yǎng)殖周期為4月5日至6月5日，各實驗組水溫17.8～27.7 ℃，溶氧5.5～8.9，pH7.3～7.9。

1.2 樣品采集及測定

養(yǎng)殖實驗共進行60 d，每隔10 d每組取樣50尾克氏原螯蝦，用吸水紙吸干蝦體表水分后，分別用游標卡尺和電子天平測量蝦的體長(精確到0.01 mm)和體重(精確到0.01 g)。養(yǎng)殖實驗結束后，每組取10尾測定全蝦的體成分，另取8尾測定蝦的血淋巴生化指標。先測量蝦體長、體重，然后用1 mL一次性注射器從頭胸甲縫隙插入圍心腔內(nèi)取血淋巴，放入2 mL離心管內(nèi)，靜止2 h后，4 ℃、3 000 r/min離心5 min吸取上層血清，-80 ℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

全蝦的粗脂肪含量測定采用索氏抽提法(乙醚)；粗蛋白含量測定采用凱氏定氮法(GB/T5009.5-2003)；灰分含量測定采用550 ℃馬弗爐灰化法(GB/T5009.4-2003)；水分采用105 ℃恒溫烘干恒重法測定(GB 6435-86)；血清生化指標(谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、膽固醇、甘油三脂、總蛋白、白蛋白)采用CHEMIX-800全自動生化分析儀測定。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)值采用均用平均值±標準差表示，所得數(shù)據(jù)均以Excel與SPSS 21.0軟件作單因素方差分析、Pesrson相關系數(shù)分析和Duncan氏多重比較分析，顯著性水平為P=0.05。

體重增長率(WGR)=(W1-W0)/W0×100%

體長增長率(LGR)=(L1-L0)/L0×100%

式中，W0和W1分別為實驗蝦測量時間段內(nèi)的起始、結束體重(g)，L0和L1分別為實驗蝦測量時間段內(nèi)的起始、結束體長(cm)。

2 結果與分析

2.1 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦生長性能比較

由圖1可見，在實驗開始至10 d時，4個模式的幼蝦體長、體重基本處于同一水平，無顯著差異。隨著試驗的進行，體長和體重均呈現(xiàn)蝦單養(yǎng)組>蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組，且體重比體長差異更大。在20 d，稻蝦組體長顯著低于其余三組，蝦單養(yǎng)組體重顯著大于其余三組，其余各組差異不顯著；在30 d，體長和體重均表現(xiàn)為蝦單養(yǎng)組顯著大于另外3組，稻蝦組顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組無顯著差異；40 d，稻蝦組體長顯著低于另外3組，蝦單養(yǎng)組體重顯著大于另外3組，稻蝦組體重顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組體重無顯著差異；至50 d，蝦單養(yǎng)組體長顯著高于稻蝦組，蝦單養(yǎng)組和蝦魚組體重顯著高于稻蝦組，其余各組差異不顯著；至60 d體長和體重均表現(xiàn)為蝦單養(yǎng)組顯著大于另外3組，稻蝦組顯著低于另外3組，蝦魚組和蝦蟹組無顯著差異。

圖1 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的體長和體重變化

四種養(yǎng)殖模式下，克氏原螯蝦LGR隨時間大體呈逐漸下降的趨勢，WGR率則呈先升高后降低的趨勢，見圖2。其中LGR在前30 d體長保持較高增長，然后逐漸降低。WGR在前40 d保持較高增長，然后逐漸降低，蝦單養(yǎng)組、蝦魚組和蝦蟹組WGR在30 d達到最高，稻蝦組在40 d達到最高。

2.2 四種養(yǎng)殖模式水環(huán)境理化指標變化

在60 d的養(yǎng)殖期間，水溫在前30 d一直保持升高，而后隨天氣變化而變化。溶氧則是先升高后降低，在前30 d增加較快，而后迅速降低。pH則是先降低后升高，開始時蝦單養(yǎng)組最高，稻蝦組最低，試驗結束時稻蝦組最高，4個模式組均在40 d時pH最低。葉綠素和藍綠藻含量在實驗開始時4個組均處于較低水平，而后均開始增長，20 d至60 d稻蝦組葉綠素和藍綠藻含量最低且差異顯著。硝氮和氨氮隨著養(yǎng)殖的持續(xù)不斷升高。其中稻蝦組的氨氮在實驗開始時顯著大于其余三組，至60 d，稻蝦組氨氮含量顯著低于另外三組。硝氮無顯著差異。

圖3 養(yǎng)殖期間水體理化指標變化

2.3 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦體成分比較

四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的體成分組成見表1，結果顯示，全蝦的水分含量稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養(yǎng)組，稻蝦組最高，顯著高于蝦單養(yǎng)組、蝦蟹組，與蝦魚組差異不顯著。全蝦的粗蛋白含量蝦蟹組>蝦單養(yǎng)組>蝦魚組>稻蝦組，蝦蟹組最高，顯著高于另外3組，其余三組間差異不顯著。全蝦粗脂肪含量稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養(yǎng)組，蝦單養(yǎng)組最低，顯著低于另外3組，其余三組間差異不顯著。全蝦的灰分蝦單養(yǎng)組>蝦蟹組>蝦魚組>稻蝦組，蝦稻組最低，顯著低于另外3組，蝦單養(yǎng)組與蝦魚組也差異顯著，其余各組間差異不顯著。

表1 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的全蝦常規(guī)組成

2.4 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦血淋巴生化指標比較

養(yǎng)殖實驗結束后，四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的血清生化指標見表2?？偟鞍诪槲r蟹組>蝦魚組>蝦單養(yǎng)組>稻蝦組，其中蝦蟹組、蝦魚組與稻蝦組差異顯著，其余各組差異不顯著。白蛋白與總蛋白類似，蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養(yǎng)組>稻蝦組，蝦魚組、蝦蟹組與蝦單養(yǎng)組、稻蝦組差異顯著，其余各組差異不顯著?？偰懝檀己?，蝦單養(yǎng)組>蝦魚組、蝦蟹組>稻蝦組，蝦單養(yǎng)組顯著高于其余3組，其余各組差異不顯著。甘油三脂含量稻蝦組>蝦魚組>蝦單養(yǎng)組>蝦蟹組，稻蝦組顯著高于其余蝦單養(yǎng)組和蝦蟹組，其余各組差異不顯著。葡萄糖含量蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組>蝦單養(yǎng)組，蝦魚組與蝦單養(yǎng)組差異顯著，其余各組差異不顯著。谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，蝦單養(yǎng)組>稻蝦組>蝦魚組>蝦蟹組，蝦魚組和蝦蟹組差異顯著，其余各組差異不顯著。谷草轉(zhuǎn)氨酶含量稻蝦組>蝦單養(yǎng)組>蝦魚組>蝦蟹組，其中稻蝦組與蝦蟹組差異顯著，其余各組差異不顯著。

表2 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的血液生化指標

3 討論

3.1 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦生長性能比較

克氏原螯蝦的生長受到其生物習性、食物資源、發(fā)育階段、養(yǎng)殖密度及環(huán)境條件等多因素的影響?？耸显r適宜的水溫范圍為21～30 ℃，當水溫高于32.2 ℃時，蝦的生長則會受到影響，當水溫降至5～6 ℃時，幼蝦會停止攝食[13]。同時，水體溶氧也會影響其生長，溶氧降低會引起攝食的減少[14-15]，幼蝦的適宜pH范圍為7.5～8.5[16]。本實驗條件下水溫、溶氧和pH與建議值均比較接近。本實驗期間，水溫在10 d略低于20 ℃，其體重增長率略低，但其體長增長率是整個試驗期間最快，我們推測跟幼蝦所處的發(fā)育階段相關。在實驗前10 d，四個模式的幼蝦體長、體重無顯著差異。隨著試驗的進行，體長和體重均呈現(xiàn)蝦單養(yǎng)組>蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組，且體重比體長差異更大，克氏原螯蝦的體長增長率大體呈逐漸下降的趨勢，體重增長率則呈先升高后降低的趨勢?？耸显r為蛻殼生長，蛻殼后體長才能增加，結果表明克氏原螯蝦在試驗前30 d蛻殼較多，體長生長較快。

克氏原螯蝦生長指標從高到低依次為蝦單養(yǎng)組、蝦魚組、蝦蟹組、稻蝦組，分析其原因，一是前三組試驗池較小，水溫相比稻田升高快，水體的葉綠素和藍綠藻水平較高，能給幼蝦提供額外的餌料，有利于幼蝦的生長；其次，蝦魚和蝦蟹模式的養(yǎng)殖對象之間存在競爭關系，導致這兩組生長速度略低于蝦單養(yǎng)組。蝦單養(yǎng)組、蝦魚組及蝦蟹組的體重增長率均在30 d時達到最高，而稻蝦組的體重增長率在40 d時達到最高，且稻蝦組的標準差比其余三組大，表明稻蝦組的幼蝦規(guī)格不整齊，推測稻蝦模式應該有去年打洞的留塘抱卵親蝦，該批蝦苗處于不同的生長階段的原因。

3.2 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦體成分比較

克氏原螯蝦的全蝦體成分主要包括粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分等，體成分的含量將影響其營養(yǎng)價值與經(jīng)濟價值。體成分是其對特定生境的表型適應，受環(huán)境中餌料的豐富程度所驅(qū)動，其中蛋白質(zhì)和脂肪決定了機體的營養(yǎng)水平，已有研究表明蛋白質(zhì)主要用于動物的生長發(fā)育，脂肪主要用于為機體儲存能量[17]。對水產(chǎn)動物進行營養(yǎng)成分分析有助于了解其經(jīng)濟應用價值，并為人工飼料的配置提供理論依據(jù)。四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦的體成分組成差異較大，全蝦的水分含量稻蝦組顯著高于蝦單養(yǎng)組、蝦蟹組。全蝦的粗蛋白含量蝦蟹組顯著高于另外3組。全蝦粗脂肪含量蝦單養(yǎng)組顯著低于另外3組。全蝦的灰分稻蝦組顯著低于另外3組。一般養(yǎng)殖品種的個體水分含量低于野生個體，實驗結果顯示稻蝦組的水分含量顯著高于其余3組，表明稻蝦組更接近野生個體。同時稻蝦組蝦可以在稻田內(nèi)打洞穴居，由于競爭少，能量消耗少，導致多余的能量以脂肪形式儲存在體內(nèi)，所以粗脂肪高于其余三組。蝦蟹組因其存在較大競爭關系，需要更多的能量用于生存，蛋白含量顯著高于另外三組。

3.3 四種養(yǎng)殖模式克氏原螯蝦血淋巴生化指標比較

血清生化指標被廣泛用于評價動物的營養(yǎng)和健康狀況，反映動物體內(nèi)器官功能狀態(tài)和物質(zhì)代謝的重要特征[18]。影響水產(chǎn)動物的血液生化指標的因素很多，包括：養(yǎng)殖模式、溫度、鹽度、光照、重金屬、饑餓、飼料等。

總蛋白可以維持血液滲透壓和pH平衡，具有運輸、凝血、免疫等功能。白蛋白功能包括營養(yǎng)、保持血液滲透壓以及對離子、膽紅素、脂肪酸、激素等運輸[19]?？偟鞍诪槲r蟹組>蝦魚組>蝦單養(yǎng)組>稻蝦組，其中蝦蟹組、蝦魚組與稻蝦組差異顯著，白蛋白為蝦魚組>蝦蟹組>蝦單養(yǎng)組>稻蝦組，蝦魚組、蝦蟹組與蝦單養(yǎng)組和稻蝦組差異顯著。一般認為，血清中總蛋白含量增加是體內(nèi)營養(yǎng)成分充足，代謝較快，蛋白質(zhì)合成旺盛，分泌到血液中的蛋白質(zhì)增多造成的[4]，魚類在低溶氧條件下總蛋白和白蛋白含量會降低[20]，這與稻蝦組溶氧較低吻合。結果表明蝦蟹組和蝦魚組蝦的體內(nèi)營養(yǎng)充足、新陳代謝較快，患病少。

脂類是甲殼動物重要的能源儲備物質(zhì)[21-22]，甘油三脂和膽固醇是血脂的主要成分，主要在肝臟合成，并經(jīng)血液循環(huán)至全身各處[23]。過多攝食脂類食物和肥胖可使血清甘油三酯升高，而運動則可以降低甘油三酯[4,17]。甘油三脂含量稻蝦組>蝦魚組>蝦單養(yǎng)組>蝦蟹組，稻蝦組顯著高于蝦單養(yǎng)組和蝦蟹組，表明稻蝦組運動低于其余三組，這與體成分結果相印證。飽和脂肪酸的攝入會促進機體膽固醇的合成，進而使血清膽固醇升高，總膽固醇含量，蝦單養(yǎng)組>蝦魚組、蝦蟹組>稻蝦組，表明稻蝦組蝦的飽和脂肪酸的攝入低于另外三組。

葡萄糖是提供機體活動所需的能量，受棲息環(huán)境等許多因素影響，流水環(huán)境較靜水高，活動較少的生物血糖濃度較低[23]。葡萄糖含量為蝦魚組>蝦蟹組>稻蝦組>蝦單養(yǎng)組，表明蝦魚組和蝦蟹組蝦的水里活動多于稻蝦組和蝦單養(yǎng)組，混養(yǎng)種類存在競爭關系。Imsland等[24]認為在正常情況下,魚類體內(nèi)有機成分的分解代謝與合成代謝保持動態(tài)平衡,血糖含量較高時,魚類表現(xiàn)為積極攝食,健康狀況良好。

轉(zhuǎn)氨酶可以反映肝臟健康狀態(tài)，在正常狀態(tài)下轉(zhuǎn)氨酶只有少量釋放到血液中，血清轉(zhuǎn)氨酶活性較??；當肝臟發(fā)生病變時，細胞的通透性增加，導致轉(zhuǎn)氨酶大量釋放到血液內(nèi)，使谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高[25]。一般認為血液中轉(zhuǎn)氨酶活性增加表明肝臟功能出現(xiàn)障礙[5,26]。谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，蝦蟹組<蝦魚組<稻蝦組<蝦單養(yǎng)組，蝦單養(yǎng)組和蝦蟹組差異顯著。谷草轉(zhuǎn)氨酶含量蝦蟹組<蝦魚組<蝦單養(yǎng)組<稻蝦組，其中稻蝦組與蝦蟹組差異顯著。本結果表明蝦蟹組蝦的轉(zhuǎn)氨酶含量最低，肝臟最健康，這可能與蝦蟹組葉綠素和藍綠藻水平較高，幼蝦攝入浮游生物較多有關。本實驗是在4-5月份進行，池塘的水草及浮游生物隨水溫升高快速生長，而稻蝦是在5月底開始插秧，稻蝦組的葉綠素和藍綠藻水平偏低。綜上所述，從生長角度看蝦單養(yǎng)組生長最快，從蝦體成分看稻蝦組最接近野生群體，從血清生化指標看蝦蟹組最健康，我們建議在積極開展稻蝦綜合種養(yǎng)的同時，在養(yǎng)殖產(chǎn)量較少的地區(qū)可以適當增大池塘單養(yǎng)的規(guī)模，在養(yǎng)殖規(guī)模較大的地區(qū)適當開展蝦魚、蝦蟹模式。