子宮內(nèi)膜癌中SOX11 表達(dá)及其與血管新生的相關(guān)研究

徐曉冬

近年來(lái),我國(guó)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率不斷攀升。血管新生與子宮內(nèi)膜癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血管生成不僅可以判斷腫瘤預(yù)后,也成為腫瘤治療新的靶點(diǎn)。然而血管新生與子宮內(nèi)膜癌之間的相關(guān)機(jī)制并不明確,能否將抗血管生成應(yīng)用于腫瘤的治療尚需進(jìn)一步探討［1］。一系列與性別決定區(qū)Y 框基因［sex-determining Y(Sry) box-containing gene］同源、編碼轉(zhuǎn)錄因子的基因統(tǒng)稱SOX 家族,其共同特點(diǎn)是具有高度保守的HMG框(high-mobility group box,HMG-box)。SOX 家族近年來(lái)被廣泛關(guān)注,它與胚胎的早期發(fā)育有關(guān)。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中,SOX 基因的變異起到了至關(guān)重要的作用。SOX11 是SOX 家族中非常重要的干細(xì)胞標(biāo)志蛋白,已被證實(shí)與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有關(guān),例如乳腺癌、胃癌、子宮內(nèi)膜癌,SOX11 與這些惡性腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān)。本研究通過(guò)檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌組織中SOX11 的表達(dá)與血管新生的相關(guān)性,探討SOX11在子宮內(nèi)膜癌發(fā)病中的作用機(jī)制和診治前景?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年1 月～2019 年12 月本院收治的182例子宮內(nèi)膜癌、子宮內(nèi)膜癌前病變、子宮附件無(wú)病變的子宮脫垂或無(wú)器質(zhì)性病變的異常子宮出血患者的病理組織標(biāo)本。依據(jù)子宮內(nèi)膜癌臨床分期(2015 FIGO 分期)分為子宮內(nèi)膜癌組(62例)、子宮內(nèi)膜癌前病變組(60例)、正常子宮內(nèi)膜組(60例)。所有入組患者術(shù)前均未行激素、放化療。

1.2 染色方法 采用PV-9002 二步法免疫組化法進(jìn)行免疫組化染色。采用SOX11 鼠多克隆抗體(ab154138,工作濃度1∶200)。所有實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格遵守說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較SOX11 在正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組及子宮內(nèi)膜癌組中的表達(dá)情況,采用免疫組化檢測(cè)在10×40 倍顯微鏡下觀察SOX11 蛋白的表達(dá),評(píng)分參照Fromowitz 綜合計(jì)分法［1］。在統(tǒng)計(jì)分析中除外陰性均視為陽(yáng)性。分析子宮內(nèi)膜癌中SOX11 陽(yáng)性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床特征的關(guān)系。比較正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組、子宮內(nèi)膜癌組的MVD 水平,MVD 計(jì)數(shù)遵從Weidner［2］推薦的測(cè)量方法。分析SOX11 的陽(yáng)性表達(dá)與MVD 之間的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Spearman 相關(guān)分析。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SOX11 在正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組及子宮內(nèi)膜癌組中的表達(dá)比較 子宮內(nèi)膜癌前病變組與子宮內(nèi)膜癌組SOX11 表達(dá)陽(yáng)性率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.270,P=0.604>0.05)。正常子宮內(nèi)膜組的SOX11 表達(dá)陽(yáng)性率低于子宮內(nèi)膜癌前病變組和子宮內(nèi)膜癌組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=43.926、49.842,P=0.000、0.000<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 SOX11 在正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組及子宮內(nèi)膜癌組中的表達(dá)比較 (n,%)

2.2 SOX11 陽(yáng)性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 不同年齡子宮內(nèi)膜癌患者SOX11 表達(dá)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；不同病理組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、癌組織浸潤(rùn)深度及臨床分期子宮內(nèi)膜癌患者SOX11 表達(dá)陽(yáng)性率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 SOX11 陽(yáng)性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 (n,%,n=62)

2.3 正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組、子宮內(nèi)膜癌組的MVD 比較 子宮內(nèi)膜癌組的平均 MVD 明顯高于子宮內(nèi)膜癌前病變組及正常子宮內(nèi)膜組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.601、26.225,P=0.000、0.000<0.05)。子宮內(nèi)膜癌前病變組的平均 MVD 明顯高于正常子宮內(nèi)膜組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=11.690,P=0.000<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組及子宮內(nèi)膜癌組的 MVD 比較 (±s,個(gè)/HP)

表3 正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜癌前病變組及子宮內(nèi)膜癌組的 MVD 比較 (±s,個(gè)/HP)

注：與子宮內(nèi)膜癌組比較,aP<0.05；與子宮內(nèi)膜癌前病變組比較,bP<0.05

2.4 SOX11 的陽(yáng)性表達(dá)與MVD 之間的關(guān)系 根據(jù)每例癌組織標(biāo)本中每個(gè)標(biāo)本SOX11 的免疫組化計(jì)分及MVD 計(jì)數(shù)行Spearman 相關(guān)分析,子宮內(nèi)膜癌中SOX11陽(yáng)性表達(dá)與MVD 顯著相關(guān)(r=0.869,P<0.05)。

3 討論

在女性生殖道三大惡性腫瘤中,子宮內(nèi)膜癌近年來(lái)發(fā)病率逐年上升。探索子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制,尋找對(duì)腫瘤有效的治療辦法已經(jīng)迫在眉睫［3］。相關(guān)研究表明,在血管生成前,實(shí)體腫瘤的平均直徑約為1.0～1.3 mm,從而保持腫瘤生長(zhǎng)的平衡狀態(tài),腫瘤處于休眠階段。一旦新生血管開(kāi)始生長(zhǎng),腫瘤細(xì)胞將加速生長(zhǎng)［4］。由于該理論的形成,在腫瘤治療的研究中,越來(lái)越多的研究者將目光聚焦到了抗血管生成治療中［5］。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),血管新生是腫瘤組織生長(zhǎng)所必須的［6,7］。Weidner 等［2］認(rèn)為,在腫瘤組織中一些具有較高水平血管新生活性的腫瘤細(xì)胞成為了腫瘤生成和轉(zhuǎn)移的源頭。因此在腫瘤中對(duì)MVD 的相關(guān)研究成為熱點(diǎn),通常采用對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞能夠進(jìn)行特異性抗原染色的蛋白進(jìn)行研究。

SOX11 屬于SOX 基因家族C 亞群編碼轉(zhuǎn)錄因子,在胚胎分化、神經(jīng)細(xì)胞存活和細(xì)胞變異中起重要作用［8］。SOX11 的致癌潛力已在異種移植模型中得到證實(shí),但其促進(jìn)功能的具體機(jī)制仍不清楚［9］。研究結(jié)果證實(shí),SOX11 可以促進(jìn)腫瘤血管生成并使其生長(zhǎng)和擴(kuò)散［9］。Chang 等［10］發(fā)現(xiàn),在子宮內(nèi)膜癌組織中SOX11的表達(dá)較癌旁組織的表達(dá)明顯增高,SOX11 低表達(dá)的患者總生存期和無(wú)病生存期明顯高于SOX11 高表達(dá)的患者。敲除SOX11 基因后,子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和遷徙明顯受到抑制。Inoue 等［11］發(fā)現(xiàn),在Ishikawa 細(xì)胞中SOX11 促進(jìn)ALK 基因表達(dá),進(jìn)而通過(guò)NF-κB 和pAkt 通路促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抑制細(xì)胞凋亡,提示SOX11 可以促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌的進(jìn)展。血管新生是腫瘤細(xì)胞生成的最重要機(jī)制之一［12］。Palomero 等［13］在研究中發(fā)現(xiàn),與敲除SOX11 基因相比較,更多的血管生成基因富集在SOX11 中從而使MVD 增加。血小板衍生生成因子A(platelet-derived growth factor A,PDGFA)是一種唯一以SOX11 為靶點(diǎn)的染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)因子。PDGFA參與腫瘤血管生成,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的形成和招募間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞。熒光素酶標(biāo)記檢測(cè)顯示,SOX11 能夠通過(guò)旁分泌增加PDGFA 的轉(zhuǎn)錄。研究發(fā)現(xiàn)［14］,PDGFA分泌的條件是SOX11 陽(yáng)性的細(xì)胞系中血管的增殖和遷移。因此,腫瘤中的血管新生是依靠PDGFA-SOX11而實(shí)現(xiàn)的。本研究中發(fā)現(xiàn),SOX11 在正常子宮內(nèi)膜組織中低表達(dá),在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)明顯增高,在子宮內(nèi)膜癌中SOX11 的陽(yáng)性表達(dá)和MVD 呈正相關(guān)(P<0.05)。SOX11 在子宮內(nèi)膜癌中導(dǎo)致新生血管增加的機(jī)制可能是復(fù)雜的。在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中新生血管的生成起到重要的作用。

綜上所述,隨著子宮內(nèi)膜癌的分期增加,血管新生逐漸增加,SOX11 的陽(yáng)性表達(dá)增加。因此檢測(cè)SOX11蛋白表達(dá)可能為子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展及診治提供關(guān)鍵線索。