雛番鴨鴨3型腺病毒與鴨圓環(huán)病毒共感染診斷報(bào)告

王秀娟 福清市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊(duì) 福建福清 350300

鴨3型腺病毒（Duck adenovirus 3，DAdV-3）屬于腺病毒科（Adenoviridae）I群腺病毒屬成員[1]，是2014年以來在我國流行的一種引起番鴨肝臟腫大、出血和壞死為特征的新發(fā)疫病病原[2]，最早由張新珩等在廣東的番鴨養(yǎng)殖場報(bào)道發(fā)生該病[3]，現(xiàn)已在我國的安徽、福建、浙江、江西、河南、云南等大部分地區(qū)流行，對我國番鴨養(yǎng)殖業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失[4-5]。鴨圓環(huán)病毒（Duck circovirus，DuCV）病是近些年來新發(fā)現(xiàn)的一種高度接觸性傳染病，主要侵害鴨的免疫系統(tǒng)，臨床上以鴨生長遲緩、器官萎縮和淋巴細(xì)胞減少為主要致病特征，可感染各品種、各日齡鴨。臨床上由于鴨圓環(huán)病毒感染多呈亞臨床狀態(tài)，患鴨常因機(jī)體免疫應(yīng)答能力下降，易導(dǎo)致其它疫病并發(fā)或繼發(fā)感染，從而造成更大的經(jīng)濟(jì)損失[6-7]?，F(xiàn)將2021年5月福清市漁溪鎮(zhèn)郭某番鴨養(yǎng)殖場雛番鴨鴨3型腺病毒與鴨圓環(huán)病毒共感染的診斷情況報(bào)道如下，以期為同行提供參考。

1 發(fā)病情況

2021年5月，該養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的番鴨14日齡時(shí)發(fā)病，鴨群采食量和飲水量下降、喜扎堆蹲伏、體溫升高、排水樣稀糞，隨后陸續(xù)出現(xiàn)死亡，至21日齡時(shí)，鴨群發(fā)病率為45%左右，病死率約25%；就診時(shí)患鴨體況消瘦、羽毛雜亂、翅尖和尾部被毛斷裂嚴(yán)重、背部皮膚外露。

2 剖檢病變

剖檢病死鴨，可見肝臟腫大、出血，質(zhì)地變脆；脾臟呈大理石樣外觀，腎臟腫大、出血；胰腺有彌散性出血點(diǎn)；腸道充盈，腸壁稀薄。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測

無菌采集病死鴨肝臟、脾臟、腎臟和腦組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測。采集的樣品分成2份，一份用于細(xì)菌分離，另一份用于鴨常見病毒檢測。

無菌取病死鴨肝臟和腦組織等病料分別接種于麥康凱瓊脂平板和血瓊脂平板上，于37℃恒溫培養(yǎng)24~48 h。以病毒DNA/RNA抽提試劑盒，按照產(chǎn)品說明書提取樣品中的核酸，以提取的核酸作為模板，開展禽流感病毒、水禽細(xì)小病毒、鴨3型腺病毒、鴨甲肝病毒、鴨呼腸孤病毒、鴨圓環(huán)病毒、水禽禽1型副黏病毒等雛番鴨常見病毒核酸檢測，(RT-)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳。

采集的樣品經(jīng)平板劃線培養(yǎng)未分離到細(xì)菌。

針對7種病毒的核酸(RT-)PCR檢測發(fā)現(xiàn)，從樣品中檢測到鴨3型腺病毒和鴨圓環(huán)病毒核酸雙陽性（見圖1），其余病原均呈陰性。將（RT-）PCR陽性擴(kuò)增產(chǎn)物送福州尚亞生物科技有限公司進(jìn)行測序，對獲得序列編輯后使用NCBI blast進(jìn)行在線比對。結(jié)果，兩組序列分別與NCBI數(shù)據(jù)庫中的鴨3型腺病毒和鴨圓環(huán)病毒核苷酸序列同源性分別為100%和98.6%。

圖1 樣品PCR產(chǎn)物電泳圖

根據(jù)以上發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果，初步判定該群雛鴨發(fā)生鴨3型腺病毒與鴨圓環(huán)病毒共感染。

4 討論與體會(huì)

禽腺病毒是一類侵害禽類的病毒群，根據(jù)其抗原結(jié)構(gòu)不同分為3個(gè)群，即Ⅰ群禽腺病毒、Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒。危害鴨群的腺病毒主要包括Ⅰ群腺病毒屬的Ⅰ群腺病毒血清4型、鴨腺病毒2型（DAdV-2）、鴨腺病毒3型（DAdV-3）和III群腺病毒屬的鴨腺病毒1型[DAdV-1，即產(chǎn)蛋下降綜合征病毒（EDSV）][1-2]。鴨3型腺病毒是近年來我國鴨群新出現(xiàn)的一種鴨源腺病毒，臨床上鴨感染該病毒后引起實(shí)質(zhì)性臟器尤其是肝臟腫大、局灶性散狀出血，脾臟腫大，腎臟腫大、出血。該病發(fā)病率20%~50%、病死率40%~60%[2]。該病毒最早由張新衍等[3]從廣東地區(qū)表現(xiàn)為精神沉郁，剖檢肝臟黃化和出血的20~30 d番鴨組織中分離發(fā)現(xiàn)，經(jīng)血凝試驗(yàn)、理化試驗(yàn)、透射電鏡觀察及基因組序列測定及分析，確定該病病原為鴨3型腺病毒。隨后萬春和等[4]、程龍飛等[5]先后報(bào)道了鴨腺病毒病的發(fā)生和流行。

鴨圓環(huán)病毒最早由Hattermann等[6]于2003年發(fā)現(xiàn)并報(bào)道。2008年，傅光華等[7]在我國大陸地區(qū)鴨群中首次檢測到鴨圓環(huán)病毒感染。該病臨床上主要表現(xiàn)為鴨免疫器官萎縮和生長受阻等，在鴨群中感染該病十分普遍，已成為威脅我國養(yǎng)鴨業(yè)的重要免疫抑制性疫病之一[2]。

近年來，養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展迅猛，涌現(xiàn)出許多不同規(guī)模養(yǎng)禽企業(yè)、養(yǎng)殖合作社及大量散養(yǎng)戶，各自的飼養(yǎng)條件、設(shè)施、技術(shù)力量參差不齊。鴨場多數(shù)仍沿用傳統(tǒng)水面養(yǎng)殖，環(huán)境調(diào)控能力差、生產(chǎn)性能不穩(wěn)定，導(dǎo)致鴨病頻發(fā)，疫病發(fā)生常呈亞臨床癥狀或多病原共感染情況，防疫形勢日益復(fù)雜，常出現(xiàn)老病未除新病不斷的局面。鴨圓環(huán)病毒和鴨3型腺病毒都是DNA病毒[1]，隨著養(yǎng)殖規(guī)模和密度的增加，鴨病的發(fā)生愈發(fā)頻繁，我國鴨群感染這兩種病毒較為普遍，臨床上二者單獨(dú)感染的病例較多，且嚴(yán)重阻礙鴨的生長發(fā)育，極大降低了鴨肉的產(chǎn)品質(zhì)量，嚴(yán)重?fù)p害養(yǎng)殖生產(chǎn)企業(yè)的市場競爭力和經(jīng)濟(jì)效益。鴨3型腺病毒與鴨圓環(huán)病毒共感染的病例報(bào)道較少，共感染病例的出現(xiàn)給臨床診斷帶來一些困難，容易造成誤診或漏診，因此，在診斷時(shí)除了要了解患鴨臨床癥狀和剖檢病變，還應(yīng)結(jié)合病原流行病學(xué)、利用實(shí)驗(yàn)室檢測等手段，以提高診斷的準(zhǔn)確性。