基于數(shù)據(jù)挖掘方法探究中藥改善子宮內(nèi)膜容受性的用藥規(guī)律

于 琴 趙以琳 周 娟 嚴(yán) 驊

上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，上海 201203

子宮內(nèi)膜容受性（endometrial receptivity，ER），即子宮內(nèi)膜允許胚胎定位、黏附、穿透并最終允許胚胎著床的能力[1]。研究表明[2]，反復(fù)移植失敗的原因中，ER 占據(jù)2/3。因此，在移植優(yōu)質(zhì)胚胎過程中，提高ER顯得尤為重要[3-4]。目前常用改善ER的方法主要有：促進(jìn)子宮內(nèi)膜生長、增加子宮血供、抑制子宮收縮、機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜、宮腔灌注等[5-9]，中醫(yī)藥在輔助生殖的各個(gè)環(huán)節(jié)中均可發(fā)揮作用，特別在改善ER、提高妊娠率等方面具有明顯優(yōu)勢(shì)[10]。本研究通過收集中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫、維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫中中醫(yī)藥改善ER 近10 年的文獻(xiàn)，探索其組方用藥規(guī)律，以期為中醫(yī)藥改善ER 提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 處方來源

1.1.1 資料來源 以“子宮內(nèi)膜容受性”“中藥”“中醫(yī)”為檢索詞進(jìn)行組合，收集2010 年1 月至2020 年6 月中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫、維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫發(fā)表的有關(guān)中醫(yī)藥改善ER的論文。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) 中醫(yī)藥治療明確診斷為低ER的臨床觀察及醫(yī)家經(jīng)驗(yàn)文獻(xiàn)；有完整的處方組成、藥味、藥量參與治療；明確記錄是在中醫(yī)藥的參與下患者的ER提高的論文。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 同一名醫(yī)經(jīng)驗(yàn)重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)類文獻(xiàn)；內(nèi)服和外治同用的文獻(xiàn)；方藥描述模糊的文獻(xiàn)。

1.1.4 文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的篩選 按照檢索規(guī)則檢索文獻(xiàn)，排除各個(gè)數(shù)據(jù)庫重復(fù)及不合格文獻(xiàn)后，再按納入與排標(biāo)準(zhǔn)篩選得到最終納入的文獻(xiàn)。

1.2 數(shù)據(jù)的規(guī)范及數(shù)據(jù)庫的建立

采用一人錄入，一人檢查的方法將最終納入的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)錄入Microsoft Excel 表中，參照第5 版《中藥學(xué)》[11]及2015 版《中華人民共和國藥典》[12]將中藥名稱、炮制方法及中藥性味進(jìn)行統(tǒng)一規(guī)范，如將“仙靈脾”規(guī)范為“淫羊藿”，“熟地”規(guī)范為“熟地黃”等，將“微寒、微辛”規(guī)范為“寒、辛”等。

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用Microsoft Excel 對(duì)中藥、藥味、藥性、歸經(jīng)頻次進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。使用IBM SPSS Modeler 18.0 軟件對(duì)高頻藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，將支持度設(shè)置為20%，置信度設(shè)置為80%，最大前項(xiàng)數(shù)設(shè)置為5。其中支持度表示前項(xiàng)和后項(xiàng)藥物同時(shí)出現(xiàn)的頻率，置信度表示前項(xiàng)藥物存在的前提下后項(xiàng)藥物出現(xiàn)的概率，提升度反映了關(guān)聯(lián)規(guī)則中的藥物之間的相關(guān)性；提升度＞1 且越高，表明正相關(guān)性越高；提升度＜1 且越低表明負(fù)相關(guān)性越高；提升度=1 表明沒有相關(guān)性。使用Apriori 建模挖掘高頻藥物之間的配伍關(guān)系繪制高頻藥物的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)可視化圖，將可顯示的最大鏈接數(shù)設(shè)置為80，并將記錄過多或記錄過少的丟棄，其中最大鏈接數(shù)為兩味中藥在同一處方中出現(xiàn)次數(shù)。線條虛實(shí)和粗細(xì)與關(guān)聯(lián)程度的強(qiáng)弱呈正相關(guān)，即虛線表示關(guān)聯(lián)程度最弱。使用IBM SPSS Statistics 21 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行聚類分析。

2 結(jié)果

檢索規(guī)則共檢索到文獻(xiàn)466 篇，排除各個(gè)數(shù)據(jù)庫重復(fù)及不合格文獻(xiàn)320 篇，初步納入146 篇，根據(jù)納入與排標(biāo)準(zhǔn)最終納入88 篇文獻(xiàn)。

2.1 用藥頻次分析

88 篇文獻(xiàn)中共有110 首處方，142 味中藥。使用頻數(shù)≥15的中藥有30 味，使用頻數(shù)最高前5 味中藥依次為菟絲子、當(dāng)歸、熟地黃、丹參、香附。見表1。

表1 改善子宮內(nèi)膜容受性使用中藥頻數(shù)（≥15 次）

2.2 高頻藥物（頻數(shù)≥15 次）的四氣五味及歸經(jīng)

高頻藥物按藥味分為酸、苦、甘、辛、咸、澀、淡，頻次最高的前3 位是甘（605 次）、苦（342 次）、辛（290 次）。高頻藥物按藥性分為寒、溫、涼、平，頻次最高的前兩位是溫（507 次）、平（260 次）。中藥按歸經(jīng)，頻次最高的前3 位是，肝（732 次）、腎（494 次）、脾（457 次），詳見圖1～3。

圖1 高頻藥物藥味統(tǒng)計(jì)（頻數(shù)≥15 次）

圖2 高頻藥物藥性統(tǒng)計(jì)（頻數(shù)≥15 次）

2.3 高頻藥物（頻數(shù)≥15 次）關(guān)聯(lián)規(guī)則分析

對(duì)高頻藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，剔除支持度＜20%，置信度＜80%的關(guān)聯(lián)規(guī)則，最終得到核心藥組21 條，其提升度均＞1，表示均為有效規(guī)則。并按照置信度由高到低排列（表2），其中置信度最高的為當(dāng)歸-川芎-熟地黃，支持度最高的為菟絲子-熟地黃-當(dāng)歸，提升度最高的為當(dāng)歸-川芎-熟地黃、當(dāng)歸-川芎。因?qū)⒆畲箧溄訑?shù)設(shè)置為80，故在挖掘高頻藥物之間的配伍關(guān)系時(shí)剔除牡丹皮、紫石英、川牛膝及陳皮，最終關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)可視化圖發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸與熟地黃、白芍、菟絲子之間，熟地黃、當(dāng)歸、菟絲子之間關(guān)聯(lián)程度強(qiáng)。見圖4。

圖3 高頻藥物歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)（頻數(shù)≥15 次）

表2 高頻藥常用藥對(duì)關(guān)聯(lián)規(guī)則

圖4 高頻藥物的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 高頻藥物（頻數(shù)≥15 次）聚類分析

高頻藥物聚類分析發(fā)現(xiàn)可將藥物分為白術(shù)-黨參-茯苓-白芍-炙甘草-杜仲-紫河車-山藥-山茱萸-菟絲子-枸杞子-熟地黃-女貞子、當(dāng)歸-川芎-赤芍-紅花-香附-陳皮-柴胡-牡丹皮-丹參-黃芪、續(xù)斷-川牛膝-雞血藤、巴戟天-紫石英-淫羊藿-肉蓯蓉4 類。見圖5。

圖5 高頻藥物（頻數(shù)≥15 次）聚類分析

3 討論

祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)并無ER的記載，現(xiàn)可將其歸屬于“不孕”的范疇?！端貑枴ど瞎盘煺嬲摗吩唬骸澳I氣盛，天癸至，任脈通……故有子……天癸竭，地道不通，故形壞而無子也?！毙蜗蟮闹赋隽四I氣對(duì)女性生殖的影響[13]?！稄埵厢t(yī)通》記載：“氣滯……故爾不能成孕?！笨梢姼螝庥艚Y(jié)，氣機(jī)不暢，血海蓄意失常，則影響胎孕[14]。《傅青主女科》中有“脾胃之氣雖充于脾胃之中……無腎中之火氣，則脾之氣不能化”的記載，說明脾為后天之本，腎為先天之本，脾腎精血互生互養(yǎng)[15]。夏中穎等[16]將病機(jī)歸納為臟腑功能失調(diào)，認(rèn)為不孕癥的發(fā)生與肝、脾、腎密切相關(guān)。

本研究通過對(duì)近10 年來中醫(yī)藥改善ER的110首處方的用藥頻次分析顯示，使用頻數(shù)前5 味中藥依次為菟絲子、當(dāng)歸、熟地黃、丹參、香附，可見中藥改善ER 以補(bǔ)益肝腎、調(diào)理氣血為主。分析高頻藥物四氣五味及歸經(jīng)發(fā)現(xiàn)，改善ER的藥味以甘、苦、辛為主，藥性上多選用溫、平類。高頻藥物歸經(jīng)以肝脾腎為主，與夏中穎等[16]歸納的一致。

高頻藥物關(guān)聯(lián)分析顯示當(dāng)歸-川芎-熟地黃為置信度及支持度均較高的藥組，此三味藥取自“婦科第一方”—四物湯。相關(guān)研究表明四物湯有抗自由基損傷、調(diào)節(jié)免疫功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等作用[17-18]。其中當(dāng)歸有補(bǔ)血和血之功，川芎則可祛風(fēng)活血行氣，加之熟地黃補(bǔ)血養(yǎng)陰共湊補(bǔ)血不滯血，行血不傷血之功。藥理研究表明[19]當(dāng)歸中約含有15%的多糖，具有增強(qiáng)免疫的功效。熟地黃中的粗多糖也具有增強(qiáng)免疫的功能[20]。川芎中的川芎生物堿在抑制血栓形成、血小板聚集、子宮平滑肌收縮等方面具有明顯效果[21]。

高頻藥物共聚為4 類，聚類2 主要以理氣調(diào)經(jīng)，活血化瘀為主。聚類1、3、4 體現(xiàn)了補(bǔ)益肝腎、益氣養(yǎng)血。聚類1 與毓麟珠組成相似，方中四君子補(bǔ)氣，菟絲子、杜仲、紫河車、枸杞子、女貞子補(bǔ)腎強(qiáng)腰膝益精髓，山藥補(bǔ)脾健胃，佐以熟地黃滋陰補(bǔ)血。全方既滋先天腎氣，又補(bǔ)后天脾氣，使經(jīng)血充足，沖任得養(yǎng)，胎孕乃成[22]。研究發(fā)現(xiàn)菟絲子、杜仲具有調(diào)節(jié)性激素水平，改善下丘腦-垂體-性腺軸功能紊亂的功效[23-24]。鹿角膠具有補(bǔ)血活血、壯陽、抗炎鎮(zhèn)痛的作用[25]。王晨曄等[26]發(fā)現(xiàn)毓麟珠加減可以通過降低血清miRNA-31水平，增強(qiáng)種植窗口期子宮內(nèi)膜Foxp3、eNOS miRNA 表達(dá)來改善反復(fù)移植失敗的患者的ER。

ER 是影響胚胎著床的重要因素，目前臨床上ER的診斷標(biāo)準(zhǔn)及治療方法尚在不斷的探索研究中，本研究通過對(duì)110 首改善ER的處方進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)了一些中藥配伍規(guī)律，治療上以補(bǔ)益肝腎、調(diào)理氣血為主，為中醫(yī)藥改善ER 提供了處方用藥的思路。由于本文只是初步探索中藥改善ER的規(guī)律，所以臨床上尚需要不斷地深入研究。