流蘇金石斛化學(xué)成分及其分析研究

萬(wàn)恂達(dá)

摘要：流蘇金石斛作為蘭科的金石斛屬植物，可以將全草入藥，且具有滋陰清熱和益胃生津的功能和效果。但了解現(xiàn)如今國(guó)內(nèi)外對(duì)這類植物的研究文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，與其化學(xué)成分有關(guān)的研究并不多，且相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究更是少之又少，因此為了更好利用這類植物藥材，本文在深入掌握流蘇金石斛基本定義的基礎(chǔ)上，對(duì)其所包含的化學(xué)成分和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行系統(tǒng)研究，以此為未來(lái)臨床應(yīng)用和質(zhì)量控制提供有效依據(jù)。

關(guān)鍵詞：流蘇金石斛;化學(xué)成分;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);蘭科

0引言：結(jié)合我國(guó)2010年出版的《中國(guó)藥典》分析可知，研究流蘇金石斛并對(duì)其所包含的水分、灰分以及浸出物進(jìn)行全面檢測(cè)，并利用反相高效液相色譜法構(gòu)建實(shí)際指標(biāo)測(cè)量方法，而后通過(guò)觀察穩(wěn)定性和精密度等，來(lái)明確其所包含的化學(xué)成分，并由此明確具體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。這項(xiàng)研究對(duì)現(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域發(fā)展而言具有積極作用，同樣也可以提高實(shí)際流蘇金石斛藥材種植質(zhì)量和應(yīng)用水平。

1.流蘇金石斛價(jià)值應(yīng)用

流蘇金石斛是指一種生長(zhǎng)在海拔760到1700米山地林中樹干上或林下巖石上的蘭科金石斛屬植物，也被叫做瓜石斛，主要存在于越南、泰國(guó)以及印度等地，我國(guó)境內(nèi)生長(zhǎng)在云南、海南以及廣西等地。這類植物不僅能用于藥物研究，而且具備栽培價(jià)值，屬于當(dāng)前園藝栽培行業(yè)關(guān)注的重要元素。從醫(yī)學(xué)角度來(lái)看，流蘇金石斛具備清熱潤(rùn)肺、止咳等功能，在臨床醫(yī)學(xué)中應(yīng)用主要用來(lái)治療胸膜炎、哮喘以及肺癆咳嗽等[1]。

2.儀器材料

本文在研究流蘇金石斛化學(xué)成分時(shí)選用了以下幾種必需的設(shè)備儀器：第一，X6型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀;第二，SHIMADZU GCMS-QP2010氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀;第三，Bruker AM600型核磁共振光譜儀;第四，Sephadex LH-20;第五，薄層色譜硅膠;第六，柱色譜硅膠;第七，原有植物材料。

3.提取分離

具體操作如下所示：第一，先將流蘇金石斛已經(jīng)經(jīng)過(guò)干燥處理后得到的3.5g全草放在粉碎機(jī)粉碎;第二，利用體積分?jǐn)?shù)分別為95%和70%的乙醇回流進(jìn)行提取，且保障每次一小時(shí);第三，在合并提取液后進(jìn)行有效過(guò)濾，并在減壓濃縮之后添加水溶液進(jìn)行混合;第四，再利用石油醚、二氯甲烷以及乙酸乙酯、正丁醇等進(jìn)行萃取，而后經(jīng)過(guò)減壓濃縮后得到石油醚部位20g;第五，要利用20g的石油醚浸膏在硅膠柱色譜中按照40：1到3：2的梯度進(jìn)行洗脫，最終得到9個(gè)組分。同時(shí)，要將40：1獲取的組分2再利用硅膠柱色譜按照100：1到10：1的梯度進(jìn)行洗脫，最終得到2mg的化合物5。另外，按照石油醚→丙酮15：1的比例進(jìn)行洗脫，就可以得到組分4和組分5，前者可以再次結(jié)合40：1到10：1的梯度進(jìn)行洗脫，進(jìn)而得到9mg的化合物1、200mg的化合物3、8mg的化合物7以及3.7mg的化合物8。而后者可以按照50：1到10：1的梯度進(jìn)行洗脫，進(jìn)而得到1mg的化合物6和11mg的化合物10。根據(jù)石油醚→丙酮10：1的比例進(jìn)行洗脫就能得到組分6，此時(shí)再按照10：1到0：1的梯度進(jìn)行洗脫，最終可以得到11mg的化合物4。按照4：1的比例進(jìn)行洗脫可以得到組分7，其經(jīng)過(guò)5：1到0：1的梯度洗脫可以在再次結(jié)晶中得到7mg的化合物2和12mg的化合物9[2]。

4.成分分析

運(yùn)用硅膠柱色譜儀、HW-40C凝膠色譜、ODS柱色譜等多類現(xiàn)代化分離純化技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究可知，可以在流蘇金石斛全草乙醇提取溶液當(dāng)中獲取十九個(gè)化合物，按照理化常數(shù)、化學(xué)方法等進(jìn)行逐一鑒定，最終可以明確其中十四種化合物的構(gòu)成，其中涉及到九個(gè)二萜類，一個(gè)單萜類、一個(gè)黃酮類、一個(gè)甾體類以及兩個(gè)酚酸類，具體鑒定結(jié)果如下表1所示。結(jié)合上述實(shí)驗(yàn)分析可知，最終可以得到以下幾種化學(xué)成分：第一，正二十五烷醇，其屬于白色粉末，mp控制在82°C到83°C之間;第二，7α-羥基谷甾醇，其屬于白色針晶，mp主要控制在220°C到202°C之間;第三，豆甾-4-烯-3-酮，其屬于沒(méi)有顏色的針晶，mp主要控制在159°C到160°C之間;第四，6β-羥基-豆甾-4-烯-3-酮也屬于沒(méi)有顏色的針晶，mp主要控制在208°C到210°C之間;第五，5α-豆甾-3-酮也屬于沒(méi)有顏色的針晶，也叫做石油醚-乙酸乙酯，mp主要控制在147°C到148°C之間;第六，β-谷甾醇同樣屬于沒(méi)有顏色的針晶，mp主要控制在139°C到141°C之間;第七，麥角甾-4，6，8（14），22E-四烯-3-酮屬于黃綠色的針晶，mp主要控制在124°C到125°C之間等。

本文研究介紹主要以二萜類為例進(jìn)行研究，其中本次實(shí)驗(yàn)操作得到的二萜類FJD-1和FJD-9的H譜和C譜測(cè)量數(shù)據(jù)結(jié)果對(duì)比情況。兩者的絕對(duì)構(gòu)型都是利用CD來(lái)明確的。比如說(shuō)，F(xiàn)JD-1的CD譜在291nm的位置上存在負(fù)Cotton效應(yīng)，和（16R）-16，17-滴hydroxy-ent-kauran-3-one非常類似，由此證明C-5的結(jié)構(gòu)形態(tài)和（16R）-16，17-滴hydroxy-ent-kauran-3-one是一樣的，都屬于S構(gòu)型，由此可以進(jìn)一步推解出其他手性碳的絕對(duì)構(gòu)型。同時(shí)，結(jié)合HRESIMS提供的準(zhǔn)分子離子峰m/z375.2167[M+Na]+，具體理論數(shù)值為375.2167）及m/z727.4442[M+Na]+，由此證明FJD-4和FJD-3屬于同分異構(gòu)體，對(duì)比兩者的1H、13C NMR（CD3OD），可以明確發(fā)現(xiàn)它們最大的差異在于羥基的取代區(qū)域有差異。同時(shí)，結(jié)合HSQC、1H-1H COSY以及HMBC譜可以進(jìn)一步驗(yàn)證這一結(jié)論。而后再結(jié)合NOESY譜進(jìn)行研究分析發(fā)現(xiàn)，化合物FJD-4的相對(duì)構(gòu)型是指（4α，11α，16α）-11，16，17，19-tetrol-ent-kaur-3-one。

雖然在實(shí)驗(yàn)研究當(dāng)中，F(xiàn)JD-4的CD譜并沒(méi)有骨過(guò)多變化，但研究其所擁有的化學(xué)位移數(shù)值可知，尤其是研究實(shí)際耦合常數(shù)和相同生物來(lái)源可以發(fā)現(xiàn)，這一化合物的C-16位和FJD-1和FJD-3的C-16是相同的，也就是R構(gòu)型。由此在成分分析當(dāng)中可以進(jìn)一步推導(dǎo)出所有手性碳的絕對(duì)構(gòu)型。因此，最終可以明確化合物FJD-4的結(jié)構(gòu)是（11R，16R）-11，16，17，19-tetrol-ent-kaur-3-one。

結(jié)語(yǔ)

綜上所述，從上世紀(jì)九十年代開始到二十一世紀(jì)初期，就曾有科研學(xué)者對(duì)流蘇金石斛的小極性部位的化學(xué)成分提出了研究與分析。隨著現(xiàn)如今社會(huì)經(jīng)濟(jì)和科研技術(shù)水平的提升，為了更好利用我國(guó)境內(nèi)生長(zhǎng)的流蘇金石斛藥材，確保其可以在實(shí)踐醫(yī)療領(lǐng)域發(fā)揮作用，我國(guó)在有關(guān)產(chǎn)品開發(fā)項(xiàng)目的引導(dǎo)下，對(duì)這類植物的大極性部分所包含的化學(xué)成分進(jìn)行深入探討，并從中得到了非常多有價(jià)值的信息，這對(duì)研究藥材成分、應(yīng)用療效以及構(gòu)建質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等工作而言具有積極作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 費(fèi)嬌冬， 陳林， 丁剛，等. 流蘇金石斛中牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷的分離鑒定及含量測(cè)定[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2013， 19（001）：64-67.

[2] 陳業(yè)高， 王紅艷. 金石斛屬植物化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥， 2005（08）：725-727.

南昌大學(xué)資源環(huán)境與化工學(xué)院 江西南昌 330000