藥用植物蠟葉標本色差測定及保色工藝優(yōu)化

黃萍 曾白林 童黃錦 徐夢丹 朱立忠

摘 要 目的：建立色差法測定藥用植物蠟葉標本顏色的方法，研究溫度和壓力對蠟葉標本葉片顏色的影響，優(yōu)化標本保色工藝。方法：色差法測定6種藥用植物蠟葉標本葉顏色值，統(tǒng)計分析不同溫度、不同壓力總色差ΔE大小。結果：色差法測出的結果客觀精確，6種藥用植物標本色差冷藏加壓優(yōu)于常溫加壓（P<0.05）；壓力大小對6種藥用植物標本葉片色差影響不同，石榴葉加壓100 kg、桔梗葉加壓300 kg、凌霄葉、射干葉、菊葉、月季葉加壓500 kg條件色差最小下保色最好。結論：色差法可應用于藥用植物蠟葉標本顏色測定，冷藏加壓法可應用于蠟葉標本保色研究。

關鍵詞 藥用植物 蠟葉標本 工藝優(yōu)化

中圖分類號：R281 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2021）15-0043-04

Determination of the color difference of wax leaf specimen of medicinal plants and the optimization of color preservation technology

HUANG Ping， ZENG Bailin， TONG Huangjin， XU Mengdan， ZHU Lizhong

（Department of Pharmacy， the Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine affiliated to Nanjing University of Chinese Medicine； Department of Pharmacy， Jiangsu Province Academy of Traditional Chinese Medicine， Nanjing 210028， China）

ABSTRACT Objective： To establish a method for the determination of the color of medicinal plant wax leaf specimens by color difference method， to study the influence of temperature and pressure on the color of wax leaf specimens and to optimize the color preservation technology. Methods： The color values of six kinds of medicinal plant wax leaf samples were measured by color difference method， and the total color difference ΔE value at different temperatures and pressures was statistically analyzed. Results： The results measured by color difference method were objective and accurate， and the color difference of six kinds of medicinal plant specimens under cold storage and pressure was better than that under normal temperature （P<0.05）. The influence of pressure on the color difference of six kinds of medicinal plant specimens was different and the color was the best and the color difference was the smallest when the pomegranate leaves were pressurized under 100 kg， platycodon grandiflorum leaves under 300 kg， Chinese trumpet creeper leaves， belamcanda leaves， chrysanthemum leaves and rose leaves under 500 kg， respectively. Conclusion： The color difference method can be used for the determination of the color of medicinal plant wax leaf specimens， and the cold storage and pressure method can be used for the study of color retention of wax leaf specimens.

KEY WORDS medicinal plants； wax leaf specimen； process optimization

藥用植物標本在科研和教學中有重要的作用，是藥用植物鑒別的永久性查考資料[1]。蠟葉標本因為有操作簡便、成本低、環(huán)保、易于查閱、便攜等優(yōu)點被廣泛應用，但由于長期暴露在空氣中，藥用植物色素對光、熱、氧、微生物等變化敏感，穩(wěn)定性差，顏色變枯黃，與鮮品色差大，失去了標本最直觀的特征[2-3]，因此，標本保色研究是標本制作工藝中需要解決的難題。目前對標本顏色沒法做到客觀量化研究，實驗者主要通過眼睛主觀評判色差，評分誤差大。課題組經(jīng)過長期反復實踐，優(yōu)化傳統(tǒng)的綁扎帶捆扎標本制作方法，采用三角鐵和螺絲加固標本，給標本夾施以重壓，最高壓力可達500 kg，將壓制好的標本夾貯藏在冷藏室和常溫室，通過實驗考察六種藥用植物蠟葉標本在不同溫度、不同壓力下的保色情況，并嘗試用色差計測量蠟葉標本色度值，進一步優(yōu)化標本保色工藝。

1 材料與方法

1.1 藥用植物

石榴、凌霄、桔梗、射干、菊花、月季六種藥用植物標本葉。

1.2 儀器

SBT710-1000 kg壓力傳感器（廣州市斯巴拓電子科技有限公司）；SBT951-T控制顯示儀表（廣州市斯巴拓電子科技有限公司）；JZ-350色彩色差計（深圳市金準儀器設備有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 蠟葉標本色差測量方法

1）色差測定方法 測定前對儀器進行零位和白板較準，較準完畢后進入測試。選擇光源條件D65/10°，色彩空間選擇數(shù)據(jù)L*a*b值。在每片葉片正面中間葉肉部分中心位置重復掃描3次，取平均值。

1.3.2 色差測定的方法學考察

1）精密度考察 取石榴、凌霄、桔梗、射干、菊花、月季葉各1片，在相同測定條件下，連續(xù)測量6次，記錄顏色值L、a、b。六種葉片L、a、b值的RSD<3%，儀器精密度良好。

2）穩(wěn)定性考察 取石榴、凌霄、桔梗、射干、菊花、月季葉各1片，在相同測定的條件下，每隔10 min測1次，每次重復掃描3次，取平均值，記錄顏色值L、a、b。六種葉片L、a、b值的RSD<3%，標本葉片在測量的1 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3）重復性考察 取石榴、凌霄、桔梗、射干、菊花、月季葉各1片，在相同測定條件下，測量6個點，每次重復掃描3次，以平均值為測定結果記錄顏色值L、a、b。六種葉片L、a、b值的RSD<3%，該方法重復性良好。

1.4 蠟葉標本的制作

采集的新鮮標本經(jīng)清理、定型、整形后，分別放入8個標本夾中，采用傳統(tǒng)綁扎帶捆綁法，測得受力值10 kg（以下簡稱10 kg標本夾）。將標本夾改良，使用螺絲和三角鐵加固，設定壓力分別為100、300、500 kg，每個壓力值的標本夾做2個。將10、100、300、500 kg標本夾分別放置常溫（10～30 ℃）和冷藏庫（2～10 ℃）保存，剛壓制的標本每天換紙1次，3～4 d后隔天換紙，直至標本壓制成功[5]。

1.5 蠟葉標本色差測定

壓制標本設定的八種方案，即常溫條件下壓力分別為10、100、300、500 kg，冷藏條件下壓力分別為10、100、300、500 kg，每種方案均壓制標本石榴、凌霄、桔梗、射干、菊花、月季葉3株，標本壓制24 h后每種植物標本取中段葉片10片，將測量的葉片做好標記并編號，按照“1.3.2”項下藥材色差測定方法對樣品葉進行顏色值的測定，計算標本葉片總色差ΔE。

1.6 統(tǒng)計方法

2 結果與分析

2.1 標本色差均值描述

通過方差分析結果可以看出，八種實驗條件下六種藥用植物標本色差均值間均有差異（表1）。從標本色差的均值描述，石榴葉加壓100 kg、桔梗葉加壓300 kg、凌霄葉、射干葉、菊葉、月季葉加壓500 kg條件色差最小，六種藥用植物標本色差最大均為常溫加壓500 kg。

2.2 溫度對標本色差的影響

考察溫度對標本色差影響，用t檢驗分析冷藏和常溫兩條件下色差均值差異，六種藥用植物冷藏加壓和常溫加壓條件下色差差異顯著（P<0.05），標本色差冷藏加壓比常溫加壓顯著偏小（表2）。

2.3 壓力對標本色差

考察壓力對標本色差影響，用方差分析多重比較，分別將冷藏和常溫加壓10 kg這兩種條件作為對照進行分析。在冷藏條件下，與冷藏加壓10 kg比較，石榴葉加壓100 kg、凌霄葉加壓500 kg、月季葉加壓500 kg標本色差明顯偏?。≒<0.05），桔梗葉、菊葉加壓100、300、500 kg標本色差均明顯偏?。≒<0.05），射干葉在不同壓力下標本色差并無顯著差異（P>0.05）。在常溫條件下，石榴葉、凌霄葉、桔梗葉加壓500 kg時標本色差明顯偏大（P<0.05），射干葉、菊葉、月季葉在不同壓力下標本色差并無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

傳統(tǒng)評價蠟葉標本顏色的方法是目測法或者采用比色卡判定，受個人主觀因素影響大，實驗結果可信度有偏差。采用色差計法對標本顏色進行測定，操作簡便直觀準確，可將標本顏色進行量化研究，定量判斷結果客觀、精準可靠，規(guī)避傳統(tǒng)目視法定性判斷的主觀性大的問題，所以此方法值得推廣。色差計測定蠟葉標本顏色葉有它的缺點，色差計精密度高反應靈敏，測得數(shù)據(jù)誤差大，在測量時需要多次測量取平均值來減少誤差，并且只可用于色澤均勻葉片直接測量，課題組將嘗試用色差法測定藥用植物花的顏色，進一步研究標本花的保色。

藥用植物蠟葉標本在制作過程中，影響藥用植物標本保色的因素很多，有內(nèi)在因素和外在因素。標本快速失水，有利于標本保色，一般標本含水量越低，成品率越高[6]，冷藏加壓后標本葉片組織被壓平破壞，導致其水分快速流出，縮短標本干燥時間[7]，課題組使用三角鐵和螺絲固定標本夾，可將整理好的標本夾厚度縮小，使標本完全貼合于吸水紙，最大化的減少標本與吸水紙之間的空氣含量，降低標本色素的氧化速度，使成品標本色澤保存得更好。在常溫條件下加壓到500 kg，標本內(nèi)部不透氣并不利于水分蒸散，反而影響標本保色。

色差法可應用于藥用植物蠟葉標本顏色測定，冷藏加壓保色優(yōu)于常溫加壓，石榴葉加壓100 kg、桔梗葉加壓300 kg、凌霄葉、射干葉、菊葉、月季葉加壓500 kg條件下保色最好。溫度是影響藥用植物標本保色的一個關鍵因素，壓力大小對不同植物影響作用不同。不同藥用植物品種，都可以采用冷藏加壓的方法，通過實驗選擇最佳的條件組合來保證標本色澤最佳，實驗考察顏色值的時間相對較短，可以在今后的實驗中延長標本顏色考察時間，使實驗更加完善。

參考文獻

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