西寧野生動(dòng)物園大鵟、雕鸮血液生理生化指標(biāo)及血清中部分維生素、礦物質(zhì)含量的測(cè)定

汪曉飛

(西寧野生動(dòng)物園，青海 西寧 810006)

大鵟(Buteohemilasius)和雕鸮(Bubobubo)均屬于國(guó)家二級(jí)保護(hù)野生動(dòng)物，其中大鵟是我國(guó)鵟中個(gè)體最大者，體色變化比較大，上體通常為暗褐色，下體白色至棕黃色，并有暗色的斑紋，尾羽具有3～11條暗色橫斑，先端灰白色。雕鸮是我國(guó)最大的夜行猛禽之一，廣泛分布于世界各地，主要捕食鼠類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)及小型爬行動(dòng)物，對(duì)維持生態(tài)平衡起著重要的作用。Jung等報(bào)道了16只雕鸮救護(hù)后放歸前測(cè)定的8項(xiàng)血液生化指標(biāo)測(cè)定范圍[1]。許杰等報(bào)道了1例疑似滅鼠藥二次中毒雕鸮放歸野外前測(cè)定的雕鸮的14項(xiàng)血液生理生化指標(biāo)[2]。郭婷婷等在大鵟和長(zhǎng)耳鸮的部分血液生理生化指標(biāo)及血細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)觀察中報(bào)道了3只大鵟和3只長(zhǎng)耳鸮血液生化指標(biāo)19項(xiàng)，血象指標(biāo)12項(xiàng)[3]。在野生動(dòng)物血液指標(biāo)對(duì)比研究方面，有研究表明，籠養(yǎng)成年白冠長(zhǎng)尾雉、白腹錦雞、白鷴等野生禽類(lèi)的所測(cè)生理生化指標(biāo)在雌雄之間差異不顯著(P>0.05)[4-6]。目前關(guān)于大鵟和雕鸮血液生理生化、維生素等指標(biāo)的報(bào)道較少，本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)西寧野生動(dòng)物園6只雕鸮和6只大鵟的14項(xiàng)血生化指標(biāo)、19項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)、5項(xiàng)維生素和5項(xiàng)礦物質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定，提升了野生動(dòng)物資源保護(hù)和救護(hù)力度，對(duì)野生動(dòng)物救護(hù)、野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)有一定的參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 西寧野生動(dòng)物園內(nèi)飼養(yǎng)的健康成年雕鸮和大鵟，數(shù)量為每種動(dòng)物6只，年齡3～4歲，雌雄各3只，以上動(dòng)物均處于非繁殖期，所有動(dòng)物均定期驅(qū)蟲(chóng)，外觀被毛光滑，食欲、糞便均正常，經(jīng)獸醫(yī)臨床檢查確認(rèn)為健康成年個(gè)體。

1.2 血液樣本的采集 采血部位消毒，翼下靜脈采血。血常規(guī)檢測(cè)前使用EDTA抗凝管采血，混勻后立即取樣進(jìn)行檢測(cè)。血生化、礦物質(zhì)、維生素指標(biāo)檢測(cè)前使用促凝管采血，采血后室溫靜置采血管2 h， 3 000 r/min離心15 min，分離出血清，保存于-20 ℃ 冰箱內(nèi)待檢。

1.3 測(cè)定方法 利用mindray(邁瑞) BC-2800Vet 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀測(cè)定2種動(dòng)物血液中的白細(xì)胞數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、淋巴細(xì)胞數(shù)(Lymph)、單核細(xì)胞數(shù)(MON)、中性粒細(xì)胞數(shù)(Gran)、淋巴細(xì)胞百分比(Lymph%)、單核細(xì)胞百分比(MON%)、中性粒細(xì)胞百分比(Gran%)、血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW)、血小板數(shù)目(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)、血小板壓積(PCT)、嗜酸性粒細(xì)胞百分比(Eos%)共19項(xiàng)指標(biāo)。利用IDEXX vetTest8008血液生化儀測(cè)定2種動(dòng)物白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(ALP)、丙谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、球蛋白(GLOB)、血糖(GLU)、總膽紅素(TBIL)、總蛋白(TP)、鈉(Na)、鉀(K)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(CHOL)共14項(xiàng)指標(biāo)。用分光光度法測(cè)定血清中鈣(Ca)、磷(Pi)、鐵(Fe)、銅(Cu)、鋅(Zn)(試劑盒為南京建成公司產(chǎn)品)含量。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清β-胡蘿卜素(β-carotene)、血清維生素A(Vitamine A)、血清維生素C(Vitamine C)、血清維生素E(Vitamine E)、血清維生素B2(Vitamine B2)(試劑盒為上海酶聯(lián)生物公司產(chǎn)品)共10項(xiàng)生化指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 25.0軟件對(duì)采集的動(dòng)物血液樣本原始數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)和正態(tài)分布檢驗(yàn),對(duì)服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)通過(guò)正態(tài)分布法、對(duì)不服從正態(tài)分布的數(shù)據(jù)通過(guò)百分位數(shù)法,根據(jù)所測(cè)指標(biāo)的實(shí)際意義求出雙側(cè)95%可信區(qū)間作為指標(biāo)的參考范圍。運(yùn)用t檢驗(yàn)對(duì)各組間差異進(jìn)行比較，并參考各類(lèi)文獻(xiàn)，對(duì)比數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 血常規(guī)指標(biāo)的測(cè)定 結(jié)果見(jiàn)表1。在雕鸮和大鵟中，RBC、HGB、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW、PDW等指標(biāo)均差異極顯著(P<0.01)，兩者M(jìn)PV差異顯著(P<0.05)，PLT差異不顯著(P>0.05)；同時(shí)，兩者的WBC、Lymph、MON、Gran等指標(biāo)差異極顯著(P<0.01)，而Lymph%、MON%、Gran%、Eos%等指標(biāo)均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表1 雕鸮、大鵟血常規(guī)指標(biāo)Table 1 Blood routine indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)

2.2 血生化指標(biāo)的測(cè)定 結(jié)果見(jiàn)表2。雕鸮和大鵟兩者的血生化指標(biāo)中，ALT、GLOB、AST等指標(biāo)差異性極顯著(P<0.01)；ALP差異性顯著(P<0.05)；ALB、AMY、BUN、CRE、GLU、TBIL、TP、Na、K、CHOL等指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

表2 雕鸮、大鵟血生化指標(biāo)Table 2 Blood biochemical indicators of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)

2.3 礦物質(zhì)、維生素的測(cè)定 結(jié)果見(jiàn)表3。雕鸮和大鵟兩者的Ca、Pi、Fe、Zn、Cu等礦物元素指標(biāo)差異性均不顯著(P>0.05)；兩者維生素比對(duì)中，維生素C、β-胡蘿卜素指標(biāo)差異性不顯著(P>0.05)，而維生素A、維生素E等指標(biāo)差異極顯著(P<0.01)，維生素B2指標(biāo)差異性顯著(P<0.05)。

表3 雕鸮、大鵟礦物質(zhì)、微量元素指標(biāo)Table 3 Mineral and trace element indexes of Buteo hemilasius and Bubo bubo (n=6)

3 討論

血生化、血常規(guī)等檢查是監(jiān)測(cè)野生動(dòng)物健康狀況的重要依據(jù)，準(zhǔn)確有效的血液指標(biāo)數(shù)值對(duì)動(dòng)物個(gè)體健康評(píng)估及疾病監(jiān)測(cè)、生理狀態(tài)評(píng)定具有十分重要的作用。本試驗(yàn)采用常規(guī)法、分光光度法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和全自動(dòng)血液生化儀測(cè)定、全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀測(cè)定等方法對(duì)雕鸮、大鵟2種猛禽血液的血生化、血常規(guī)、血清維生素和礦物質(zhì)等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。本試驗(yàn)所涉及的動(dòng)物樣本均為西寧野生動(dòng)物園圈養(yǎng)的動(dòng)物，且數(shù)量較少，用以確定一類(lèi)動(dòng)物的血液指標(biāo)正常參考范圍來(lái)說(shuō)較為困難，但本試驗(yàn)測(cè)定的數(shù)據(jù)在分析評(píng)估本地區(qū)雕鸮、大鵟等野生禽類(lèi)的機(jī)體健康狀況方面仍有一定科學(xué)意義，可以作為雕鸮、大鵟在血液生理生化領(lǐng)域的輔助診斷依據(jù)和研究基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

運(yùn)用t檢驗(yàn)方法對(duì)比大鵟和雕鸮的各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，本試驗(yàn)中，2種動(dòng)物肝腎功能指標(biāo)中ALB、GLU、ALP等差異性不顯著(P>0.05)。大鵟血清中白細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)WBC、Lymph、MON、Gran等指標(biāo)均高于雕鸮，且差異極顯著(P<0.01)。這表明除個(gè)體差異外，雕鸮的機(jī)體免疫能力弱于大鵟。2種動(dòng)物的紅細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)中，大鵟的RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC等指標(biāo)均高于雕鸮，且兩者差異極顯著(P<0.01)，由于本地的大鵟棲息地海拔相對(duì)高于雕鸮，這種差異性的出現(xiàn)表明大鵟的攜氧能力高于雕鸮。對(duì)比2種動(dòng)物的維生素指標(biāo)數(shù)據(jù)，維生素C、β-胡 蘿卜素指標(biāo)差異性不顯著(P>0.05)，而維生素A、維生素E等指標(biāo)差異極顯著(P<0.01)，維生素B2指標(biāo)差異性顯著(P<0.05)，由于兩者食物來(lái)源和數(shù)量相同，因此考慮這種差異的出現(xiàn)是由于物種不同導(dǎo)致機(jī)體對(duì)維生素吸收利用的程度不同。

本試驗(yàn)中測(cè)得的雕鸮ALB指標(biāo)數(shù)據(jù)與Jung等[1]研究中的ALB數(shù)據(jù)差別很大。Jung等測(cè)定的白蛋白平均值為34.9 g/L，而本試驗(yàn)測(cè)定的白蛋白平均值為43.17 g/L。但Jung等研究中的動(dòng)物樣本為救護(hù)后經(jīng)治療放歸的16只雕鸮，其中41.7%的雕鸮感染吸蟲(chóng)，而本試驗(yàn)中的雕鸮均為健康個(gè)體。根據(jù)沈永林等[7]的報(bào)道，山羊試驗(yàn)感染肝片吸蟲(chóng)囊蚴后，血清總蛋白前10周有緩慢上升趨勢(shì)，之后呈直線下降，這或許正是導(dǎo)致本試驗(yàn)ALB數(shù)據(jù)與Jung等測(cè)得的ALB數(shù)據(jù)差別較大的原因。本試驗(yàn)血生化數(shù)據(jù)與許杰等[2]試驗(yàn)中的血生化數(shù)據(jù)相比較，TBIL、GLOB等指標(biāo)差別較大，由于許杰等研究中采集的雕鸮血液樣本為中毒后治療康復(fù)放歸前采集獲得，因此這種指標(biāo)水平不同的出現(xiàn)可能與雕鸮的病理過(guò)程、生活環(huán)境等因素相關(guān)。

與郭婷婷等[3]的研究結(jié)果相比，本試驗(yàn)中大鵟的血紅蛋白和血紅蛋白濃度指標(biāo)平均值均明顯高于郭婷婷等測(cè)定的大鵟指標(biāo)數(shù)據(jù)，郭婷婷等測(cè)定的ALT、AST等指標(biāo)則明顯高于本試驗(yàn)中測(cè)得的數(shù)據(jù)。由于郭婷婷等的樣本為未救護(hù)成功的大鵟，而本試驗(yàn)中的動(dòng)物為健康個(gè)體，因此考慮這種差異的出現(xiàn)可能是因?yàn)楣面玫鹊臉颖境霈F(xiàn)失血、受傷等導(dǎo)致的病理性變化。由于雕鸮、大鵟的維生素、礦物質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的數(shù)據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道很少，因此缺乏比對(duì)分析的依據(jù)，有待后續(xù)研究。