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    噬菌體在治療大腸桿菌誘導的肉雞氣囊炎中的作用研究

    2021-08-26 05:39:22杜新永王立坤劉爽李先勝羅成盛
    家禽科學 2021年6期
    關鍵詞:噬菌體

    杜新永 王立坤 劉爽 李先勝 羅成盛

    摘 要:為驗證噬菌體對大腸桿菌誘導的肉雞氣囊炎的治療效果,選擇高致病性大腸桿菌采用灌服結合肌肉注射方案誘導氣囊炎模型,并采用噬菌體、抗菌肽、抗生素等方法進行治療。實驗結果表明:從剖檢結果、降低死淘率的情況來看,多西環(huán)素治療大腸桿菌性氣囊炎效果最好,噬菌體、林可霉素治療效果相當,抗菌肽效果較差,陰性對照(未治療)組死亡率最高,達71.4%。綜上所述,噬菌體制劑可用于大腸桿菌性肉雞氣囊炎的輔助性治療。

    關鍵詞:白羽肉雞;氣囊炎;噬菌體;無抗養(yǎng)殖

    中圖分類號:S858.31? ? ? ? 文獻標識碼:B? ? ? ? 文章編號:1673-1085(2021)6-0042-05

    在白羽肉雞密集化養(yǎng)殖中,肉雞氣囊炎是常見疾病之一[1-4],輕者造成許多肉雞到出欄時呼吸道癥狀還存在,重者不到正常出欄日齡就提前出欄了,給養(yǎng)殖戶造成很大經濟損失[5]。據報道,白羽肉雞養(yǎng)殖過程中,氣囊炎發(fā)病率高達50%~60%,嚴重影響了白羽肉雞的生產性能,造成巨大經濟損失[5,6]。氣囊炎不是指一個單獨的疾病,而是某些全身性感染的癥狀[7]。臨床上最常見的是大腸桿菌感染引起的氣囊炎,表現病雞精神沉郁、呼吸困難、有啰音、咳嗽、呼吸急促、排黃白或綠色稀糞等主要癥狀[3,8]。剖檢可見氣囊混濁,有大量混濁的滲出液;重者氣囊壁增厚,有大小不等的干酪樣凝塊[4]。

    除大腸桿菌外,新城疫病毒、傳染性法氏囊炎病毒、傳染性支氣管炎病毒、傳染性鼻炎病毒、支原體(敗血支原體、滑膜支原體、毒支原體)、曲霉菌等,感染肉雞后都可以引起氣囊炎[8]。除了病原菌感染之外,環(huán)境、管理因素也極易引發(fā)肉雞的氣囊炎[1,3]。

    合理用藥可以在一定程度上緩解氣囊炎的危害。由于氣囊血管少[4],加上細菌耐藥性普遍提升等情況,養(yǎng)殖戶使用阿莫西林[9]、恩諾沙星[5]治療效果不佳。專家建議采用注射或專門的噴霧措施可有效治療雞氣囊炎[2];用藥則建議氟苯尼考、強力霉素(多西環(huán)素)或者中藥制劑[1]。

    本文中,我們采用高致病性大腸桿菌對白羽肉雞進行氣囊炎造模,同時采用青島潤達生物科技有限公司提供的噬菌體進行治療,得到了較好的實驗效果,為肉雞氣囊炎無抗治療提供了一種新的選擇。

    1材料與方法

    1.1 實驗動物及其氣囊炎造模

    實驗動物為1日齡白羽肉雞50只,攻毒病菌為高致病性大腸桿菌E6(分離自白羽肉雞病料肝臟,青島潤達生物科技有限公司提供),細菌濃度為106 cfu/mL,用量為0.8 mL/只雞,初始采用灌服(2 mL菌液/只雞)方案,雞群未出現氣囊炎相關癥狀,死淘率低。接著采用了雞腿注射(0.8 mL菌液/只雞)的方式進行造模。至11日齡時,僅剩余35只肉雞,且出現了明顯的發(fā)病癥狀,對死淘的肉雞進行剖檢,發(fā)現了氣管栓塞、有干酪樣物等典型癥狀,說明肉雞氣囊炎造模成功,接下來啟動治療過程。

    1.2 噬菌體制劑

    噬菌體制劑為青島潤達生物科技有限公司提供的單一噬菌體(RDP-EC-16029),體外配型實驗結果表明,該噬菌體對1.1所用的攻毒大腸桿菌E6有較好的體外裂解效果。噬菌體制劑的滴度為107 pfu/mL,治療時采用灌服,按照1 mL/只雞用量。

    1.3 治療方案

    造模成功后(實驗肉雞出現死亡,解剖有較典型的氣囊炎癥狀),將存活的剩余35只雞,隨機分成5組(陰性對照組、噬菌體組、抗菌肽組、林可霉素治療組和多西環(huán)素治療組),每組7只,進行氣囊炎治療。其中,陰性對照組為不治療組,陽性對照組為抗生素治療組(林可霉素治療組和多西環(huán)素治療組)。具體治療情況見表1。

    1.4 數據分析

    本文主要依據肉雞生長情況、剖檢癥狀等進行分析,對于死淘數,采用SPSS進行方差分析及圖形繪制,F值表示不同數據之間的顯著性差異,F值越大說明差異越明顯;P值表示假設性檢驗,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

    2 結果與分析

    2.1 實驗雞群狀況

    使用高致病性大腸桿菌攻毒后3 d,雞群出現明顯的趴臥、聚堆、精神不振的狀況,采食、飲水量下降,同時出現大量死淘。個別雞甩鼻、腫眼、流淚(圖1)。通過對各造模過程中死亡的肉雞進行解剖,剖檢后發(fā)現典型的氣囊污濁、有干酪樣沉積物,全都出現了氣囊炎、包心包肝的癥狀。

    治療4 d后,雞群陰性對照組(1組)持續(xù)死亡,只剩2只;其他組情況均有所好轉,趴臥、流淚等癥狀基本消失。

    其中,第5組多西環(huán)素(強力霉素)實驗雞群迅速恢復健康。而且,從臨床表現上,第5組雞群精神狀況恢復快,羽翅明亮,采食積極,效果最好。其他實驗組中,噬菌體組(2組)、林可霉素組(4組)、抗菌肽組(3組)的雞群死亡率大大下降(死亡數分別為1、2、3只),采食、飲水增加,腿、嘴部破潰逐漸好轉(圖2)。

    2.2 剖檢狀況

    給藥10 d之后,對不同實驗組的肉雞進行解剖,觀察氣囊炎的治療效果,見圖3。

    陰性對照組(1組)包心現象明顯,氣囊仍有許多干酪樣分泌物,說明雞只雖然成活,卻依然有氣囊炎癥狀;而其他組均沒再發(fā)現氣囊炎癥狀。多西環(huán)素(強力霉素,5組)組表現最好,氣囊清亮,沒有渾濁;而噬菌體組(2組)、抗菌肽組(3組)、林可霉素組(4組)氣囊癥狀明顯減輕,氣囊基本明亮,基本無渾濁。

    2.3 死淘情況及存活率統(tǒng)計分析

    雞群生存曲線見圖4。

    從生存曲線圖(圖4)中可以明顯看出,陰性對照組死淘較快,第4天時,僅存活2只雞;而抗菌肽組在第2天死亡3只,此后死淘不再增加;而林可霉素組第3天死亡2只后,死淘不再增加;噬菌體組給藥后次日死亡1只,之后死淘不再增加。表現最好的是多西環(huán)素組,無死淘,存活率達100%。

    結合體外藥敏試驗,本次實驗所用的噬菌體、抗菌肽、抗生素(多西環(huán)素、林可霉素)均有體外抑菌的效果,而動物試驗結果表明,采用上述試劑治療,能夠有效控制死淘,保證雞群的健康。

    為了分析各實驗組之間的數據是否具有統(tǒng)計學上的顯著性差異,我們利用SPSS 26對實驗數據進行了方差分析,結果見表2所示。

    從表2(實驗中沒有交互作用)分析中可以看出,各實驗分組之間F值為24.406,P < 0.01,說明各實驗組間結果差異極顯著,通過LSD對各組數據進行兩兩比較,其中,多西環(huán)素實驗效果好,優(yōu)于其他組;林可霉素組、噬菌體組相互之間無顯著性差異;抗菌肽組優(yōu)于陰性對照組。

    3 結論

    從上述結果分析可以看出,肉雞氣囊炎(大腸桿菌攻毒所致)可導致明顯的氣囊阻塞、有干酪樣沉積物等癥狀,同時,雞群死淘率上升,對于肉雞養(yǎng)殖造成較大的損失。

    本文采用噬菌體對肉雞氣囊炎進行治療,取得了較好的效果,但考慮到氣囊炎發(fā)病機制復雜,給藥困難等,建議:①采用噬菌體與抗生素復合治療,起效快,效果更佳;②考慮采用噴霧給藥,結合雞舍消毒等,能夠更好地預防、治療肉雞氣囊炎。

    參考文獻:

    [1] 叢志慧,趙瑞芳.肉雞氣囊炎的防治[J].家禽科學,2014(12):55.

    [2] 高洪敏,宋光宇.淺析肉雞氣囊炎發(fā)病及防治[J].中國畜禽種業(yè),2020,16(2):175.

    [3] 李永芳.肉雞氣囊炎的預防與治療[J].山東畜牧獸醫(yī),2015 (10):77-78.

    [4] 亓英修.肉雞氣囊炎的發(fā)病特點及防治對策[J].北方牧業(yè), 2014(1):20.

    [5] 崔晨光.肉雞氣囊炎的病例防治[J].獸藥市場指南, 2012(3):47.

    [6] 徐京生,楊素娟.白羽肉雞氣囊炎防控要點[J].中國家禽,2011, 33(19):61-62.

    [7] 費強.淺談肉雞氣囊炎及防控措施[J].家禽科學,2014(11):33-34.

    [8] 高艷,翟蘭.肉雞氣囊炎的綜合防治[J].今日畜牧獸醫(yī),2012(4):43-44.

    [9] 陳紅,花天榮,汪長道,等.一例肉雞氣囊炎的診斷與治療[J]. 家禽科學, 2014(5):59-60.

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