15種植物精油致敏成分檢測(cè)與分析

余 悅，梁柱業(yè)，肖樹(shù)雄

(國(guó)家藥品監(jiān)督管理局化妝品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省藥品檢驗(yàn)所，廣州 510663)

隨著我國(guó)國(guó)民消費(fèi)升級(jí)，“天然”“健康”的產(chǎn)品成為時(shí)下消費(fèi)熱點(diǎn)，“綠色”“天然”的植物源化妝品原料受到追捧，化妝品生產(chǎn)企業(yè)在天然植物原料上下足功夫，研發(fā)以植物提取物為賣(mài)點(diǎn)的化妝品。以植物精油為例，植物精油存在于天然植物體中，是植物體內(nèi)的揮發(fā)性成分，因其氣味芬芳，且具有顯著的生物活性，如抗氧化、抗菌等，在香水、美白、祛痘產(chǎn)品中發(fā)揮著重要作用。曹陽(yáng)[1]研究發(fā)現(xiàn)，玫瑰精油對(duì)黑色素含量的抑制作用比曲酸陽(yáng)性參照組好。姜洪芳等[2]研究結(jié)果表明，薰衣草精油對(duì)酪氨酸酶活性的抑制表現(xiàn)出良好的劑量-效應(yīng)關(guān)系。王玥等[3]研究表明，廣藿香精油起到抑制炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和繼發(fā)性炎癥介質(zhì)生成的作用。此外，近年來(lái)芳香療法在積極心理學(xué)領(lǐng)域興起，未來(lái)可能有更強(qiáng)保健作用宣稱(chēng)的產(chǎn)品面市[4]。

然而，“天然”并不等同于“健康”“安全”。雖然市場(chǎng)上宣稱(chēng)“天然”“無(wú)添加”的化妝品越來(lái)越多，但化妝品接觸性皮炎患者并沒(méi)有減少。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[5-6]，導(dǎo)致化妝品接觸性皮炎的主要原因是患者使用的化妝品中含有光敏成分、刺激性成分或其他過(guò)敏原。香精香料是導(dǎo)致過(guò)敏的常見(jiàn)過(guò)敏原之一，這些致敏的香精香料包含天然的植物精油。值得我們思考的是，植物精油是如何引起皮膚過(guò)敏的？其中的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么？關(guān)于香精致敏，目前的研究大多聚焦在合成香精上，關(guān)于植物精油致敏風(fēng)險(xiǎn)的研究較少。通過(guò)查閱植物精油的化學(xué)成分分析相關(guān)文獻(xiàn)，植物精油中含有檸檬烯、芳樟醇、香葉醇、香茅醇、香豆素、水楊酸芐酯等成分[7-10]，這些成分多為過(guò)敏原或有光毒性。香茅醇、丁香酚、香豆素等成分在《日用香精》(GB/T 22731—2017)中屬于禁限用成分[11]?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)規(guī)定禁用成分為化妝品中不得添加的成分，限用成分在化妝品中有添加的最高限量要求[12]。但對(duì)于植物精油中天然存在的禁限用成分的情況，上述兩部標(biāo)準(zhǔn)中尚無(wú)規(guī)定。在化妝品中添加的植物精油，其活性成分含量缺乏數(shù)據(jù)，使用量也沒(méi)有科學(xué)可靠的依據(jù)，從化妝品配方中可以發(fā)現(xiàn)不少產(chǎn)品會(huì)同時(shí)添加多種植物精油。因此，由植物精油原料帶入的致敏成分因無(wú)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或法規(guī)作為使用及監(jiān)管的依據(jù)，可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)，值得關(guān)注。對(duì)植物精油進(jìn)行化學(xué)成分分析，尤其是對(duì)在化妝品法規(guī)中禁限用的或有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)存在風(fēng)險(xiǎn)的成分進(jìn)行分析，對(duì)于化妝品植物精油原料的科學(xué)監(jiān)管是不可缺少的環(huán)節(jié)。

為對(duì)香精致敏成分進(jìn)行快速高效的定性定量分析，本實(shí)驗(yàn)室結(jié)合《日用香精》(GB/T 22731—2017)附錄C中涉及的日用香精中的禁用物質(zhì)，在歐盟24種香精致敏檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上[13]，覆蓋較為常見(jiàn)的具致敏性的日用香精禁用物質(zhì)，建立了40種香精致敏成分同時(shí)測(cè)定的氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS)檢測(cè)方法。本研究采用上述檢測(cè)方法對(duì)植物精油進(jìn)行檢測(cè)，目的是探究植物精油中是否存在風(fēng)險(xiǎn)組分，分析植物精油中的禁限用成分和經(jīng)報(bào)道的致敏成分，從監(jiān)管角度來(lái)看具有實(shí)用意義。本研究以使用頻率較高的15種常用植物精油為樣本，以我國(guó)法規(guī)中的禁限用及歐盟報(bào)道的致敏成分分析為切入點(diǎn)，探索植物精油作為化妝品原料的安全風(fēng)險(xiǎn)，以期為進(jìn)一步加強(qiáng)化妝品植物精油原料的監(jiān)管提供數(shù)據(jù)和理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 樣品信息

15種植物精油的樣品信息見(jiàn)表1。

表1 15種植物精油的樣品信息

1.2 儀器

GCMS-TQ8050三重四極桿型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配EI源(日本島津公司)；XS205DU分析天平(梅特勒-托利多公司)；LAB DANCER S25渦旋混合儀(德國(guó)艾卡公司)。

1.3 試藥

乙酸乙酯(美國(guó)Honeywell公司，色譜純)；無(wú)水硫酸鈉(廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)，優(yōu)級(jí)純)。40種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息見(jiàn)表2。

表2 40種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息

1.4 色譜條件

色譜柱：DB-WAX毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.50 μm)；載氣：氦氣，純度不低于99.999%；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比10∶1；流速：2.0 ml/min；進(jìn)樣量：1 μl；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；升溫程序：40 ℃保持2 min，后以5 ℃/min升溫至240 ℃，保持18 min。

1.5 質(zhì)譜條件

離子化方式：EI離子源；掃描方式：選擇離子檢測(cè)(SIM)模式；電離能量：70 eV；色譜-質(zhì)譜接口溫度：250 ℃，離子源溫度：230 ℃。

2 結(jié)果

15種植物精油的GC-MS定量分析結(jié)果顯示：有11種植物精油被檢測(cè)出致敏成分，具體成分及其含量見(jiàn)表3。

表3 15種植物精油中致敏成分及其含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 結(jié)果分析

通過(guò)GC-MS檢測(cè)方法，以40種香精致敏成分作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，對(duì)15種植物精油進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)結(jié)果顯示，15種植物精油中，有11種含致敏成分，檢出率為73.3%。綜合所測(cè)植物精油的結(jié)果得到含量大于0.001%的成分有：檸檬烯、丁香酚、肉桂醛、苯甲酸芐酯、芳樟醇、香葉醇、水楊酸芐酯、苯甲醇、檸檬醛、α-己基肉桂醛、香茅醇、葵子麝香，共12種。其中，檸檬烯、丁香酚、芳樟醇、香葉醇在多種植物精油中檢出，含有檸檬烯的植物精油有：桉葉油、留蘭香油、甜橙油、薰衣草油、檸檬油；含有丁香酚的植物精油有：丁香油、依蘭油、丁香葉油、玫瑰精油；含有芳樟醇的植物精油有：依蘭油、甜橙油、薰衣草油、玫瑰精油、檸檬油、香葉天竺葵油；含有香葉醇的植物精油有：依蘭油、薰衣草油、玫瑰精油、香葉天竺葵油。

3.2 植物精油的安全風(fēng)險(xiǎn)

將所測(cè)結(jié)果與美國(guó)FDA自愿注冊(cè)計(jì)劃(Voluntary Cosmetic Registration Program)公布的最常用的植物精油的主要過(guò)敏原進(jìn)行對(duì)比(見(jiàn)表4)，情況如下：根據(jù)美國(guó)FDA的相關(guān)報(bào)道，桉葉油、丁香油、甜橙油、薰衣草油的主要致敏原分別為檸檬烯、丁香酚、檸檬烯、芳樟醇，與本研究所得結(jié)果一致；依蘭油、玫瑰精油、香葉天竺葵油的主要過(guò)敏原分別為水楊酸芐酯、香茅醇、檸檬醛[4]，本研究測(cè)得上述3種植物精油中含量最高的致敏成分分別為苯甲酸芐酯、香葉醇、香葉醇，且均比相應(yīng)植物精油中測(cè)得的水楊酸芐酯、香茅醇、檸檬醛含量高出10倍以上。以上對(duì)比結(jié)果提示，同種植物精油中致敏成分的種類(lèi)和含量不一定相同。植物精油所含成分及其含量與植物產(chǎn)地產(chǎn)期、提取工藝、分析方法等密切相關(guān)。目前市場(chǎng)上的化妝品植物原料還沒(méi)有像中藥一樣要求申報(bào)基原和提取工藝，也無(wú)相關(guān)數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)生產(chǎn)和規(guī)范使用，提示植物精油在化妝品原料生產(chǎn)端仍需加強(qiáng)管理，以進(jìn)一步保證植物精油原料的穩(wěn)定性和安全性。根據(jù)所測(cè)結(jié)果，植物精油中的致敏成分含量均未超出《日用香精》(GB/T 22731—2017)和《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)中對(duì)限用成分的限量規(guī)定，但如果多種含相同成分或相同致敏機(jī)制成分的精油同時(shí)或大量使用，可能因疊加效果導(dǎo)致安全風(fēng)險(xiǎn)。

表4 檢測(cè)結(jié)果與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)比

3.3 國(guó)內(nèi)外對(duì)植物精油的監(jiān)管差異

本研究選取的15種植物精油未列入我國(guó)化妝品相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的禁限用植物名單，而在歐盟消費(fèi)者安全科學(xué)委員會(huì)(SCCS)發(fā)表的OpiniononFragranceAllergensinCosmeticProducts中屬于已確定有致敏風(fēng)險(xiǎn)的植物提取物[14]，其中8種在美國(guó)FDA自愿注冊(cè)計(jì)劃已有明確的過(guò)敏原[4]。本研究測(cè)得的12種致敏成分，在歐盟化妝品法規(guī)中屬于香精過(guò)敏原，法規(guī)中的相關(guān)規(guī)定為：駐留產(chǎn)品中濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))超過(guò)0.001%和用后沖洗性產(chǎn)品中的濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))超過(guò)0.01%時(shí)，須標(biāo)注該香精組分的全名稱(chēng)。我國(guó)化妝品標(biāo)準(zhǔn)《日用香精》(GB/T 22731—2017)中則對(duì)丁香酚、肉桂醛、苯甲酸芐酯、香葉醇、水楊酸芐酯、苯甲醇、檸檬醛、α-己基肉桂醛、香茅醇9種成分在11類(lèi)產(chǎn)品(日化產(chǎn)品，含護(hù)理用品的化妝品)中有限量要求，對(duì)檸檬烯、芳樟醇未作要求，葵子麝香為禁用物質(zhì)[13]。雖然該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)上述10種致敏成分有限量或禁用的規(guī)定，但對(duì)植物精油作為原料帶入的情況未作出規(guī)定，此類(lèi)安全風(fēng)險(xiǎn)需引起關(guān)注。上述國(guó)內(nèi)外的監(jiān)管差異提示我國(guó)對(duì)植物精油的監(jiān)管仍需進(jìn)一步加強(qiáng)才能更好地適應(yīng)發(fā)展現(xiàn)狀。

4 結(jié)論

2020年頒布的《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》和廣東省人民政府發(fā)布的《廣東省推動(dòng)化妝品產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展實(shí)施方案》均提到要支持利用特色植物資源研究開(kāi)發(fā)化妝品。同時(shí)，以植物來(lái)源為原料開(kāi)發(fā)化妝品越來(lái)越受到生產(chǎn)者和消費(fèi)者的追捧，也是今后化妝品產(chǎn)業(yè)發(fā)展的新趨勢(shì)。但目前化妝品相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)尚未能很好地防范由植物精油帶入的安全風(fēng)險(xiǎn)，植物精油的安全風(fēng)險(xiǎn)研究也較少。本研究所測(cè)的40種成分均為香精致敏成分，15種植物精油為化妝品中使用頻率較高的植物精油原料，且在國(guó)外已有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)其存在致敏風(fēng)險(xiǎn)，具有代表性。分析結(jié)果表明了目前市場(chǎng)上存在化妝品植物精油原料含致敏成分的情況，有一定參考意義，為植物精油的安全風(fēng)險(xiǎn)研究提供一種思路。本研究尚在探索階段，所測(cè)結(jié)果僅代表本研究所收集的樣品，后續(xù)研究將從縱向上增加植物精油種類(lèi)，從橫向上收集同種植物不同產(chǎn)地、不同提取方法的精油，以求獲得更全面的結(jié)果，為植物精油的安全性評(píng)估及使用目錄清單的制定提供基礎(chǔ)。