2019年新疆兵團(tuán)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)的淺析

張 旭，殷 濤，李 巖，張 力

(新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站，烏魯木齊830052)

為進(jìn)一步提高新疆兵團(tuán)各師獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力，強(qiáng)化動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)預(yù)警，更好地為動(dòng)物疫病防控工作提供技術(shù)支持，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室生物安全措施落實(shí)落地，特組織了2019年兵團(tuán)師級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)樣品及試劑

比對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)樣品由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站準(zhǔn)備，所有比對(duì)檢測(cè)樣品均已分別進(jìn)行豬瘟抗體、高致病性禽流感病毒、非洲豬瘟病毒的標(biāo)定。

采用雙隨機(jī)分組的原則，每組比對(duì)檢測(cè)樣品共計(jì)6份，其中隨機(jī)分配陰性與陽(yáng)性樣品個(gè)數(shù)，同時(shí)進(jìn)行樣品的隨機(jī)編號(hào)，檢測(cè)樣品體積均能夠完成3次重復(fù)試驗(yàn)所需。(見表1)。

表1 比對(duì)樣品清單

豬瘟病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：CSFV20181120E)、高致病性禽流感H5H7亞型雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：20190710P)、非洲豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：ASF20190323P)購(gòu)于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司。

1.2 比對(duì)范圍

兵團(tuán)12個(gè)師畜牧獸醫(yī)站獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。

1.3 比對(duì)項(xiàng)目與試驗(yàn)方法

豬瘟病毒抗體檢測(cè)，采用阻斷ELISA方法，按《豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T16551-2008)[1]進(jìn)行；高致病性禽流感病毒型鑒別檢測(cè)，采用熒光RT-PCR方法，按《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測(cè)方法》(GB/T 19438.2-2004)[2]、《H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測(cè)方法》(GB/T 19438.3-2004)[3]進(jìn)行；非洲豬瘟病毒檢測(cè)，采用熒光PCR方法，按試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4 結(jié)果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

各師獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)檢測(cè)方法判定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行定性，判定陰陽(yáng)性。如果整組檢測(cè)樣品出現(xiàn)一個(gè)錯(cuò)誤結(jié)果，則視為該比對(duì)項(xiàng)目不通過(guò)。

2 比對(duì)結(jié)果

2.1 豬瘟病毒抗體比對(duì)檢測(cè)結(jié)果

參加本比對(duì)項(xiàng)目的有12個(gè)師級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)6份樣品，共計(jì)72份，其中71份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.61%，合格率為91.67%(見表2)。

2.2 高致病性禽流感病毒型比對(duì)鑒別結(jié)果

參加本比對(duì)項(xiàng)目的有9個(gè)師級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)6份樣品，共計(jì)54份，檢測(cè)結(jié)果全部正確，符合率為100%，合格率為100%(見表2)。

2.3 非洲豬瘟病毒比對(duì)檢測(cè)結(jié)果

參加本比對(duì)項(xiàng)目的有9個(gè)師級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)6份樣品，共計(jì)54份，其中53份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.15%，合格率為88.89%(見表2)。

表2 兵團(tuán)師級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果情況表

3 討論與分析

比對(duì)試驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制和質(zhì)量保證的重要措施，對(duì)各師實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)進(jìn)行驗(yàn)證，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室的管理能力，確保實(shí)驗(yàn)室能夠維持較高的檢測(cè)水平，有效的實(shí)施獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督和管理手段，通過(guò)外部質(zhì)量控制手段來(lái)測(cè)試一個(gè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確度的途徑和對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作能力進(jìn)行評(píng)估驗(yàn)證的客觀方法，而能力驗(yàn)證是評(píng)價(jià)一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和分析能力的有效手段，各師實(shí)驗(yàn)室在比對(duì)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中的表現(xiàn)是獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室和客戶評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室能力的重要依據(jù)。

比對(duì)試驗(yàn)成績(jī)作為各師獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)考核檢測(cè)操作的評(píng)分依據(jù)，比對(duì)結(jié)果顯示，12個(gè)實(shí)驗(yàn)室中有10實(shí)驗(yàn)室的比對(duì)項(xiàng)目全部符合，2個(gè)實(shí)驗(yàn)室有1個(gè)比對(duì)項(xiàng)目存在較大偏差。比對(duì)試驗(yàn)共檢測(cè)樣品180份，總體符合率為98.89%。結(jié)果表明，絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力總體較好，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量體系穩(wěn)定可靠，維持了較高檢測(cè)水準(zhǔn)。但同時(shí)也發(fā)現(xiàn)個(gè)別實(shí)驗(yàn)室存在檢測(cè)樣品分包編號(hào)不規(guī)范的問(wèn)題，在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制和管理方面有待改進(jìn)。

根據(jù)國(guó)家“非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)”等有關(guān)文件[4]，測(cè)評(píng)非洲豬瘟達(dá)標(biāo)的實(shí)驗(yàn)室，也將作為非洲豬瘟授權(quán)實(shí)驗(yàn)室授權(quán)依據(jù)。

4 建 議

為提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平，更好的應(yīng)對(duì)突發(fā)疫情診斷，做好動(dòng)物疫病防控流行病學(xué)調(diào)查及檢測(cè)，配備相應(yīng)的設(shè)備，培訓(xùn)熟練操作的專業(yè)技術(shù)人員，積極提高檢測(cè)能力[5]，加強(qiáng)兵團(tuán)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室熒光PCR檢測(cè)能力建設(shè)，適應(yīng)目前先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)，為動(dòng)物疫病防控提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)保障。此次比對(duì)試驗(yàn)中具備熒光PCR檢測(cè)條件的9個(gè)師實(shí)驗(yàn)室，有8個(gè)師實(shí)驗(yàn)室在非洲豬瘟病毒檢測(cè)方面，具備開展檢測(cè)非洲豬瘟的能力，結(jié)果準(zhǔn)確、操作熟練。不具備熒光PCR檢測(cè)條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加快實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)，購(gòu)置相應(yīng)的設(shè)備[6]，培訓(xùn)熟練的技術(shù)人員，提高生物安全防范意識(shí)，做好獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物疫病的檢測(cè)診斷工作。

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的構(gòu)建、運(yùn)作、維持是實(shí)驗(yàn)室確保檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性以及檢測(cè)報(bào)告質(zhì)量的根本要求。在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量行程過(guò)程和過(guò)程的各個(gè)階段可能影響檢測(cè)報(bào)告質(zhì)量的各個(gè)因素進(jìn)行有效的管控，并對(duì)這些因素采取相應(yīng)的管理和控制，才能確保檢測(cè)報(bào)告的質(zhì)量，是整個(gè)過(guò)程處于受控狀態(tài)。結(jié)合本次能力比對(duì)情況，認(rèn)真對(duì)照實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件，梳理分析目前實(shí)驗(yàn)室管理方面存在的問(wèn)題和不足，對(duì)沒有嚴(yán)格按照質(zhì)量體系文件操作的過(guò)程，及時(shí)制定整改措施并開展糾正活動(dòng)，強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室的日常監(jiān)管[7]，不斷提高實(shí)驗(yàn)室管理水平[8]。

針對(duì)相關(guān)檢測(cè)原始記錄填寫不規(guī)范等問(wèn)題，如：填寫錯(cuò)誤的地方只能杠改糾正，不能涂改糾正等，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件要求制定預(yù)防糾正措施，通過(guò)監(jiān)督實(shí)施，逐漸減少相關(guān)問(wèn)題的發(fā)生。

移液器、生物安全柜等重點(diǎn)儀器設(shè)備應(yīng)定期經(jīng)過(guò)專業(yè)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)、維護(hù)，提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性、科學(xué)性和安全性[9，10]。本次比對(duì)試驗(yàn)中出現(xiàn)2個(gè)實(shí)驗(yàn)室有1個(gè)比對(duì)項(xiàng)目存在較大偏差，其中移液器的準(zhǔn)確性對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度有很大的影響，建議開展實(shí)驗(yàn)儀器的校準(zhǔn)工作。

嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室體系文件，強(qiáng)化管理，確保監(jiān)測(cè)工作科學(xué)規(guī)范，避免實(shí)驗(yàn)室事故發(fā)生。以實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)管理為抓手[11]，加強(qiáng)學(xué)習(xí)及轉(zhuǎn)化，不斷提升動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)能力，拓展監(jiān)測(cè)范圍，充分發(fā)揮預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)作用。利用實(shí)驗(yàn)室優(yōu)勢(shì)，開展監(jiān)測(cè)技術(shù)培訓(xùn)、課題研究推廣，提高師市監(jiān)測(cè)水平，為畜牧業(yè)發(fā)展提供服務(wù)。如本次比對(duì)試驗(yàn)中個(gè)別檢測(cè)報(bào)告缺少流轉(zhuǎn)記錄，體現(xiàn)出個(gè)別實(shí)驗(yàn)室未嚴(yán)格按照體系文件進(jìn)行操作管理，實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量行程過(guò)程出現(xiàn)了不受控的現(xiàn)象，是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)報(bào)告質(zhì)量的潛在影響因素，應(yīng)加強(qiáng)管理，確保實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理各個(gè)環(huán)節(jié)均在受控狀態(tài)。