布拉氏酵母菌對高膽紅素血癥新生兒腸道菌群及免疫功能的影響

河南省許昌市中醫(yī)院（461000）何春榮

河南省許昌市食品藥品檢驗檢測中心（461000）李剛

新生兒黃疸是指胎兒血紅蛋白被大量破壞，且新生兒肝臟功能發(fā)育不完全，導(dǎo)致血液轉(zhuǎn)運膽紅素能力不足，而引發(fā)血中膽紅素濃度升高，即出現(xiàn)臨床上肉眼可見的黃疸[1]。若情況良好且出現(xiàn)程度和時限不超過上限，則預(yù)后較好，若黃疸程度較重，出現(xiàn)時間早且速度較快，則需求醫(yī)檢查治療。臨床上通過減少患兒體內(nèi)膽紅素水平治療。光療法通過使用光波，作用于膽紅素，使膽紅素變成膽綠素，可溶于體液內(nèi)，通過便、尿排出體內(nèi)，使體內(nèi)膽紅素水平下降，從而保護(hù)細(xì)胞不受損傷，避免免疫細(xì)胞受到傷害，進(jìn)而改善患兒免疫功能。但是，光療法對患兒機(jī)體有一定影響。布拉氏酵母菌通過消耗腸道內(nèi)氧氣使需氧性致病菌無法生長，能夠改善機(jī)體腸道功能，同時，布拉氏酵母菌通過降低β-GD數(shù)量，促進(jìn)膽紅素含量下降，且布拉氏酵母菌通過調(diào)節(jié)pH值，促進(jìn)腸道蠕動，能夠進(jìn)一步減少膽紅素含量。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我科2017年12月～2020年12月期間98例高膽紅素血癥新生兒作為研究對象。經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。把98例高膽紅素血癥新生兒分為兩組，其中對照組49例，男25例，女24例；年齡：平均（35.61±2.37）周；病程：平均（2.94±0.29）個月。觀察組49例，男26例，女23例；年齡：平均（35.29±2.16）周；病程：平均（2.67±0.37）個月。兩組患兒資料無統(tǒng)計學(xué)比較意義（P＜0.05）。納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)新生兒高膽紅素血癥診斷和治療專家共識[2]診斷?；純耗挲g在0～1個月。經(jīng)過患兒家屬同意并簽訂知情權(quán)同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除患有天生心臟病患兒。排除資料不齊全患兒。實驗經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 對照組采用光療法治療，選取YZB新生兒黃疸治療箱(浙食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2010第2260196號)，箱底下面使用LED燈，上面使用藍(lán)光燈，光強(qiáng)度調(diào)整為13μW/(cm2.nm)，波長為400～480nm，患兒均裸放到箱子內(nèi)，用紙尿布保護(hù)好患兒會陰，治療前給予患兒苯巴比妥鈉注射液靜脈滴注3～5mg/kg。觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用布拉氏酵母菌每天一袋，每天一次。兩組患兒共干預(yù)1個月。

1.3 觀察指標(biāo) 腸道菌群：選用MolPure?Stool DNA Kit糞便DNA提取試劑盒檢測兩組患兒腸道內(nèi)擬桿菌屬、腸埃希菌屬和葡萄球菌屬豐度，先對樣本基因進(jìn)行提取，采用瓊脂凝膠電泳檢測樣本中DNA純度和DNA濃度。再利用IlluminaMiseq測序平臺進(jìn)行測定，得出有效數(shù)據(jù)，再進(jìn)行OTUs物種分類分析，在對OTUS進(jìn)行豐度分析。菌群水平相對豐度=該菌基因拷貝數(shù)/總拷貝數(shù)。免疫功能：使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測患兒的CD4+、CD4+/CD8+。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS24.0統(tǒng)計軟件處理，計數(shù)資料采用[n(%)]表示，x2檢驗，計量資料采用（±s）表示，t檢驗，P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腸道菌群 觀察組擬桿菌屬較對照組高，葡萄球菌屬、腸埃希菌群較對照組低（P＜0.05）。見附表1。

附表1 對比兩組患兒腸道菌群(±s,%)

附表1 對比兩組患兒腸道菌群(±s,%)

注：#表示與同組干預(yù)前比較（P＜0.05）；*表示兩組之間對比（P＜0.05）。

組別 例數(shù) 擬桿菌屬豐度 腸埃希菌屬豐度 葡萄球菌屬豐度治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組 49 0.04±0.01 0.07±0.02* 0.37±0.10 0.22±0.06* 0.79±0.20 0.54±0.37*觀察組 49 0.03±0.09# 0.10±0.03*# 0.35±0.09# 0.12±0.05*# 0.76±0.30# 0.32±0.26*#

2.2 免疫功能 觀察組CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組高（P＜0.05）。見附表2。

附表2 對比兩組患兒治療前后免疫功能(±s)

附表2 對比兩組患兒治療前后免疫功能(±s)

注：與同組治療前比較，#P＜0.05；*表示兩組之間對比（P＜0.05）。

組別 例數(shù) CD4+(%) CD4+/CD8+治療前 治療后 治療前 治療后對照組 49 30.51±4.42 34.23±2.32* 1.22±0.34 1.37±0.16*觀察組 49 30.58±4.23# 37.56±2.56*# 1.26±0.37# 1.67±0.57*#

3 討論

新生兒高膽紅素血癥又稱為新生兒黃疸，是體內(nèi)紅細(xì)胞破裂，引起機(jī)體內(nèi)膽紅素增多，使患兒皮膚和其他器官黃染的現(xiàn)象?；純罕憩F(xiàn)為貧血、肝脾腫大、面色發(fā)黃等癥狀。臨床上通過降低膽紅素，阻止并發(fā)癥進(jìn)行治療。光療法能夠作用于膽紅素與長鏈脂肪酸聯(lián)合，使膽紅素結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，形成未結(jié)合膽紅素，再從膽汁中排放[3]。但是，光療法產(chǎn)熱過多，患兒體溫難以控制，因此單獨使用光療法效果并不明顯。布拉氏酵母菌屬于兼性厭氧性細(xì)菌，存在于腸道內(nèi)，能夠使結(jié)合膽紅素被細(xì)菌酶分解、還原形成尿膽原，經(jīng)糞便排出，避免大部分結(jié)合膽紅素在腸道內(nèi)蓄積，造成膽紅素在肝腸內(nèi)持續(xù)性進(jìn)行循環(huán)。

實驗結(jié)果顯示，觀察組擬桿菌屬較對照組高，葡萄球菌屬、腸埃希菌群較對照組低（P＜0.05）。說明布拉氏酵母菌聯(lián)合光療法能夠穩(wěn)定腸道內(nèi)菌群，緩解膽紅素肝腸循環(huán)癥狀。光療法屬于物理方法，通過熒光照射，使4Z，15Z-膽紅素C15處雙鍵旋轉(zhuǎn)180度，促使4Z，15E-膽紅素異構(gòu)體和光紅素異構(gòu)體生成，從而易于從膽汁和尿液中排出體外，使機(jī)體內(nèi)膽紅素含量減少。但是，光療法長時間照射會灼傷眼角膜上皮，引起眼部疼痛。布拉氏酵母菌屬于一種藥物，能夠消耗腸道內(nèi)氧氣，使腸埃希菌屬和葡萄球菌屬無法生存，避免致病菌對機(jī)體的二次傷害，再和膽紅素結(jié)合，經(jīng)糞便排出，促使機(jī)體內(nèi)膽紅素含量減少，同時，布拉氏酵母菌能夠降低腸道內(nèi)PH值，也能使腸埃希菌屬和葡萄球菌屬無法生長，且腸埃希菌屬具有促進(jìn)腸蠕動的作用，能夠增加排泄次數(shù)，降低機(jī)體內(nèi)膽紅素水平。

實驗結(jié)果顯示，觀察組CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組高（P＜0.05）。說明布拉氏酵母菌聯(lián)合光療法能夠改善患兒免疫功能，促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)。光照能使皮膚血流流到皮膚淺層，易被照射，光療法能夠增加患兒溫度，促進(jìn)基礎(chǔ)代謝，擴(kuò)張機(jī)體血管，增加循環(huán)血量，促使氧飽和度升高，從而增加細(xì)胞能量代謝，保護(hù)細(xì)胞不受損傷，緩解免疫功能障礙[4]。但是，光療法使體內(nèi)核黃素減少，引起核黃素缺乏癥，使患兒的正常生長受到限制。布拉氏酵母菌能夠調(diào)節(jié)患兒腸功能的紊亂，促進(jìn)腸道對食物吸收，使患兒營養(yǎng)增加，從而提高機(jī)體生長水平，緩解光療法對患兒生長的限制，同時，布拉氏酵母菌能夠直接作用于β-GD活性，使β-GD的結(jié)構(gòu)和數(shù)量發(fā)生改變，從而減少L-β-GD分解膽紅素-葡萄糖醛酸脂的酯鏈，使未結(jié)合膽紅素含量減少，進(jìn)而減少未結(jié)合膽紅素被重吸收含量，促使血清中膽紅素水平下降，能夠緩解機(jī)體單核-巨噬系統(tǒng)的吞噬功能，改善細(xì)胞免疫功能。本研究不足之處在于觀察的時間較短，前后指標(biāo)變化存在的誤差可能較大，且納入樣本量較少，下一步研究可延長觀察時間，擴(kuò)大研究樣本。

綜上所述，布拉氏酵母菌聯(lián)合光療法治療高膽紅素血癥新生兒的效果好，通過加大膽紅素的代謝功能，使腸道內(nèi)菌群恢復(fù)穩(wěn)定狀態(tài)，改善機(jī)體免疫功能。