深海真菌Neoroussoella sp.固體發(fā)酵物中次生代謝產(chǎn)物及其生物活性研究

鐘晉謙，陳玉嬋，陳閃沖，劉昭明，劉洪新，章衛(wèi)民*，嚴(yán)寒靜

1廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院，廣州 510006；2廣東省科學(xué)院微生物研究所 華南應(yīng)用微生物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510070

海洋微生物長期處于高鹽、高壓、低溫、低光照及寡營養(yǎng)等極端環(huán)境下，進(jìn)化出了與陸生生物不同的代謝系統(tǒng)及防御機(jī)制，因而產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物具有高度的復(fù)雜性和多樣性。海洋微生物源天然產(chǎn)物種類極其豐富，幾乎涵蓋了所有天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)類型，并具有廣泛的生物活性，是新型天然藥物先導(dǎo)化合物的重要來源。對海洋微生物次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究，將能夠發(fā)現(xiàn)化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎、生物活性顯著的先導(dǎo)化合物，為新藥研究與開發(fā)提供重要的模式結(jié)構(gòu)和藥物前體[1-4]。

本課題組前期對我國南海(114°34′52″E,13°57′27″N)4 314 m深處沉積物中的真菌進(jìn)行了分離鑒定，獲得了一株新型的海洋真菌Neoroussoellasp.。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，目前國內(nèi)外尚未有關(guān)于其次生代謝產(chǎn)物研究的報(bào)道。通過對小量液體發(fā)酵獲得的粗提物進(jìn)行HPLC-MS分析，發(fā)現(xiàn)其代謝產(chǎn)物十分豐富?；诖?，我們利用正相硅膠柱、凝膠柱和高效液相色譜等多種色譜技術(shù)對該真菌進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

核磁共振波譜儀(AVANCE III型500 MHz和AVANCE III型600 MHz，瑞士Bruker公司)；高效液相色譜儀(1220 Infinity II制備型，美國Agilent Technologies公司)；高效液相色譜儀(LC-20A半制備型，日本島津公司)；YMC-pack ODS-AQ制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；Phenomenex ACE 5 C18-PFP制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；Phenomenex MD(2)-RH制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；Phenomenex Chiral MJ(2)制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；S-chirial A制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；Chiralpak IC制備柱(250 mm × 10 mm，5 μm)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(OSB-2100型，日本東京理化器械株式會社)；大容量普通搖床(PZ1000B旋轉(zhuǎn)式，武漢瑞華儀器設(shè)備有限公司)；柱色譜硅膠(200～300目，山東青島海洋化工廠)；Sephadex LH-20(18～110 μm，瑞典Amersham Bioscience公司)；薄層層析硅膠板(HSGF254，煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司)；石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇(分析純，廣州化學(xué)試劑廠)；甲醇、乙腈、正己烷、異丙醇(色譜純，美國BCR公司)。

1.2 菌株鑒定

菌株FS526分離自我國南海(114°34′52″E，13°57′27″N)4 314 m深處的沉積物，通過液氮凍融法提取菌株的基因組DNA，采用引物ITS1擴(kuò)增其rDNA ITS區(qū)，并對產(chǎn)物進(jìn)行測序；測序結(jié)果提交GenBank，登錄號為MW255342。序列blast結(jié)果顯示，菌株FS526與Neoroussoellasp.AP-2019(登錄號為MN556318.1)的相似度為96.93%。下載相關(guān)種屬ITS區(qū)序列，連同F(xiàn)S526序列，以Neoconiothyriumvitcola(登錄號為MN556318.1)為外群，運(yùn)用MEGA5.0通過鄰近法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖1)。在發(fā)育樹中，菌株FS526與若干Neoroussoella屬的種類聚為一個分支，彼此間遺傳距離很小。通過系統(tǒng)學(xué)分析確定FS526為Neoroussoellasp.，菌種保藏于廣東省微生物研究所。將該菌株接種于裝有PDA培養(yǎng)基(含3%海鹽)斜面上27 ℃培養(yǎng)好后，置于4 ℃冰箱保藏。

1.3 發(fā)酵培養(yǎng)

在無菌條件下，將活化后的Neoroussoellasp.菌體接種至裝有馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液(PDB)的錐形瓶中，在28 ℃、120 rpm的條件下振蕩培養(yǎng)5天，獲得種子液。將適量種子液轉(zhuǎn)接到裝有9 g海鹽、250 g大米、300 mL水的3 L錐形瓶中，制作成大米固體培養(yǎng)基。室溫下靜置培養(yǎng)30天，共發(fā)酵大米5 kg。

1.4 分離純化

發(fā)酵結(jié)束后，培養(yǎng)基用乙酸乙酯提取3次，合并全部提取液，經(jīng)旋蒸濃縮后得到棕紅色提取物。浸膏進(jìn)行硅膠柱層析(200～300目)，以石油醚-乙酸乙酯(體積比10∶1→1∶1)和二氯甲烷-甲醇(體積比10∶1→0∶1)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，并用薄層色譜(TLC)檢測；合并相似組分，得到12個組分Fr.1～12。

Fr.5經(jīng)Sephadex LH-20凝膠(二氯甲烷-甲醇體系，體積比為50∶50)得到3個亞組分Fr.5.1～Fr.5.3。Fr.5.3經(jīng)硅膠柱(200～300目，石油醚-乙酸乙酯體系，體積比為10∶1→1∶1，梯度洗脫)得到5個組分Fr.5.3.1～Fr.5.3.5；其中Fr.5.3.1為化合物10(4.1 mg)。Fr.5.3.3經(jīng)Phenomenex Chiral MJ(2)制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比為80∶20，2 mL/min)得到Fr.5.3.3.1～Fr.5.3.3.4。Fr.5.3.3.4經(jīng)硅膠柱(200～300目，石油醚-乙酸乙酯體系，體積比為5∶1，等度洗脫)得到化合物13(14.4 mg)。Fr.5.3.3.1經(jīng)Phenomenex Chiral MJ(2)制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比為50∶50，2 mL/min)得到化合物6(0.7 mg)。

Fr.6經(jīng)Sephadex LH-20凝膠(二氯甲烷-甲醇體系，體積比為50∶50)得到4個亞組分Fr.6.1～Fr.6.4。Fr.6.2經(jīng)Chiralpak IC制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比50∶50，2 mL/min)得到6個組分Fr.6.2.1～Fr.6.2.6。Fr.6.2.3經(jīng)Chiralpak IC制備柱(乙腈-水體系，體積比50∶50，2 mL/min)純化得到化合物3(11.1 mg)，F(xiàn)r.6.2.6經(jīng)Chiralpak IC制備柱(乙腈-水體系，體積比50∶50，2 mL/min)純化得到化合物1(9.0 mg)。Fr.6.3經(jīng)Chiralpak IC制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比50∶50，2 mL/min)得到8個組分Fr.6.3.1～Fr.6.3.8。Fr.6.3.1經(jīng)兩次Sephadex LH-20凝膠(二氯甲烷-甲醇體系，體積比為50∶50)后，再經(jīng)Chiralpak IC制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比80∶20，2 mL/min)純化得到化合物4(6.9 mg)，F(xiàn)r.6.3.3經(jīng)Sephadex LH-20凝膠(二氯甲烷-甲醇體系，體積比為50∶50)與YMC-pack ODS-AQ制備柱(乙腈-水體系，體積比70∶30，2 mL/min)，得到化合物11(4.4 mg)。Fr.6.3.6經(jīng)Chiralpak IC制備柱(乙腈-水體系，體積比50∶50，2 mL/min)純化，得到化合物2(4.9 mg)。Fr.6.4經(jīng)硅膠柱(200～300目，石油醚-乙酸乙酯體系，體積比為8∶1→1∶1，梯度洗脫)分離，得到6個組分Fr.6.4.1～Fr.6.4.6。Fr.6.4.1經(jīng)硅膠柱(200～300目，石油醚-乙酸乙酯體系，體積比為8∶1→7∶1，梯度洗脫)與YMC-pack ODS-AQ制備柱(甲醇-水體系，體積比50∶50，2 mL/min)純化，得到化合物14(1.9 mg)和組分Fr.6.4.1.1與Fr.6.4.1.2。Fr.6.4.1.1通過Phenomenex Chiral MJ(2)制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比為60∶40，2 mL/min)純化得到化合物15(0.6 mg)。Fr.6.4.1.2通過Phenomenex Chiral MJ(2)制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比為75∶25，2 mL/min)與Phenomenex MD(2)-RH制備柱(乙腈-水體系，體積比為40∶60，2 mL/min)純化，得到化合物12(1.1 mg)。Fr.6.4.2經(jīng)硅膠柱(200～300目，石油醚-乙酸乙酯體系，體積比為7∶1→5∶1，梯度洗脫)與MC-pack ODS-AQ制備柱(甲醇-水體系，體積比75∶25，2 mL/min)純化，得到化合物7(10.5 mg)。

Fr.8經(jīng)正相硅膠柱(200～300目)層析，溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯，體積比為20∶1→2∶1，梯度洗脫，得到3個亞組分Fr.8.1～8.3。Fr.8.3經(jīng)Chiralpak IC制備柱(正己烷-異丙醇體系，體積比60∶40，2 mL/min)得到化合物9(25.1 mg)與粗組分Fr.8.3.1～Fr.8.3.6，F(xiàn)r.8.3.3經(jīng)Chiralpak IC制備柱(甲醇-水體系，體積比50∶50，2 mL/min)純化，得到化合物8(21.5 mg)和5(9.8 mg)。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色固體;分子式C24H26O8。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.38(1H，t，J= 1.2 Hz，H-14)，6.30(1H，d，J= 5.3 Hz，H-22)，6.15(1H，d，J= 1.6 Hz，H-2)，4.20(1H，q，J= 7.1 Hz，H-9)，3.73(1H，d，J= 10.0 Hz，H-11)，3.39(1H，dd，J= 9.9，5.4 Hz，H-21)，3.26(1H，d，J= 4.7 Hz，H-24β)，2.91(1H，ddd，J= 13.0，4.7，2.7 Hz，H-5)，2.83(1H，d，J= 4.7 Hz，H-24α)，2.07(1H，dd，J= 14.6，4.6 Hz，H-6β)，1.66(3H，s，H-17)，1.66(3H，s，H-18)，1.58(1H，dd，J= 14.6，13.1 Hz，H-6α)，1.35(3H，s，H-23)，1.30(3H，d，J= 7.1 Hz，H-20)，1.22(3H，d，J= 1.5 Hz，H-19)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：214.0(C-10)，206.2(C-13)，178.5(C-8)，164.6(C-1)，153.9(C-3)，143.4(C-15)，131.2(C-14)，118.7(C-2)，100.7(C-22)，84.5(C-16)，75.4(C-9)，60.9(C-4)，55.3(C-24)，50.9(C-12)，49.5(C-11)，47.1(C-21)，44.9(C-7)，34.2(C-5)，29.3(C-6)，27.0(C-18)，26.9(C-17)，26.4(C-23)，18.2(C-20)，17.5(C-19)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[5]基本一致，故鑒定化合物1為amestolkolide B。

化合物2無色油狀;分子式C27H32O8。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：11.06(1H，s，4′-OH)，7.15(1H，d，J= 10.2 Hz，H-1)，6.51(1H，s，H-5′)，6.16(1H，d，J= 1.7 Hz，H-7′)，5.99(1H，d，J= 10.2 Hz，H-2)，4.72(1H，m，H-8′)，4.17(1H，dd，J= 8.9，2.9 Hz，H-7)，2.96(1H，dd，J= 15.5，5.0 Hz，H-11β)，2.61(1H，m，H-11α)，2.26(2H，overlapped，H-6α，H-9)，2.18(1H，overlapped，H-5)，2.17(3H，s，7′-Ac)，1.85(1H，ddd，J= 14.4，14.0，3.0 Hz，H-6β)，1.49(3H，d，J= 6.6 Hz，H-9′)，1.36(3H，s，H-15)，1.27(3H，s，H-12)，1.17(3H，s，H-14)，1.15(3H，s，H-13)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：203.9(C-3)，170.8(7′-Ac)，168.9(C-10′)，162.5(C-4′)，159.8(C-6′)，156.2(C-1)，136.0(C-2′)，127.7(C-2)，112.4(C-3′)，106.5(C-5′)，102.5(C-1′)，79.9(C-8)，76.2(C-8′)，72.1(C-7)，64.3(C-7′)，44.9(C-4)，42.6(C-5)，42.1(C-9)，38.6(C-10)，27.8(C-14)，27.6(C-15)，26.8(C-6)，21.7(C-11)，21.6(C-12)，21.5(C-13)，20.9(7′-Ac)，16.6(C-9′)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[6]基本一致，故鑒定化合物2為thailandolide B。

化合物5紅棕色晶體;分子式C12H12O5。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.37(1H，s，H-4)，6.31(1H，d，J= 2.2 Hz，H-7)，6.30(1H，d，J= 2.0 Hz，H-5)，4.15(1H，m，H-2′)，2.58(2H，m，H-1′)，1.26(3H，d，J= 6.3 Hz，H-3′);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：167.8(C-1)，167.5(C-8)，164.9(C-6)，156.1(C-3)，141.2(C-10)，107.0(C-4)，103.7(C-7)，102.7(C-5)，99.8(C-9)，66.2(C-2′)，43.8(C-1′)，23.3(C-3′)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[8]基本一致，故鑒定化合物5為de-O-methyldiaporthin。

化合物6紅棕色固體;分子式C10H12O3。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.08(2H，d，J= 8.5 Hz，H-2，6)，6.77(2H，d，J= 8.5 Hz，H-3，5)，4.23(2H，t，J= 7.1 Hz，H-8)，2.86(2H，t，J= 7.1 Hz，H-7)，2.04(3H，s，H-2′);13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ：171.2(C-1′)，154.4(C-4)，130.2(C-1)，130.1(C-2，6)，115.5(C-3，5)，65.3(C-8)，34.4(C-7)，21.1(C-2′)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[9]基本一致，故鑒定化合物6為4-(2-乙氧基乙基)苯酚。

化合物7綠色晶體;分子式C11H10O6。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：7.26(1H，s，H-3)，6.52(1H，s，H-7)，4.99(1H，q，J= 6.6 Hz，H-9)，1.50(3H，d，J= 6.5 Hz，H-10);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：166.7(C-1)，158.2(C-8)，155.9(C-6)，139.4(C-3)，132.5(C-5)，120.7(C-4a)，119.8(C-4)，102.4(C-7)，97.4(C-8a)，66.5(C-9)，22.0(C-10)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[10]基本一致，故鑒定化合物7為5，6，8-三羥基-4-(1′-羥乙基)異香豆素。

化合物8無色晶體;分子式C11H10O5。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：7.36(1H，d，J= 0.9 Hz，H-3)，6.60(1H，d，J= 2.1 Hz，H-5)，6.36(1H，d，J=2.1 Hz，H-7)，4.88(1H，m，H-9)，1.50(3H，d，J= 6.4 Hz，H-10);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：167.5(C-1)，167.2(C-6)，165.5(C-8)，142.7(C-3)，130.0(C-4a)，123.4(C-4)，103.1(C-7)，102.4(C-5)，100.4(C-8a)，65.2(C-9)，23.2(C-10)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[11]基本一致，故鑒定化合物8為sescandelin。

化合物9紅棕色固體;分子式C11H12O4。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.56(1H，d，J= 2.1 Hz，H-4)，6.34(1H，d，J= 2.2 Hz，H-6)，4.61(2H，s，H-9)，3.92(3H，s，H-10)，2.41(3H，s，H-8);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：155.0(C-5)，154.4(C-2)，146.3(C-7)，139.1(C-7a)，132.0(C-3a)，115.9(C-3)，97.4(C-4)，97.2(C-6)，56.6(C-10)，55.3(C-9)，12.0(C-8)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[12]基本一致，故鑒定化合物9為penicifuran A。

化合物10紅棕色固體;分子式C11H12O4。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.70(1H，m，7-OH)，5.20(2H，s，H-3)，3.76(3H，s，H-9)，2.20(3H，s，H-8)，2.14(3H，s，H-10);13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ：173.2(C-1)，164.0(C-5)，154.0(C-7)，143.6(C-3a)，118.7(C-6)，116.6(C-4)，106.3(C-7a)，70.2(C-3)，60.4(C-9)，11.5(C-8)，8.7(C-10)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[13]基本一致，故鑒定化合物10為7-羥基-5-甲氧基-4，6-二甲基鄰苯二甲酯。

化合物11黃色油狀;分子式C10H16O3。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：4.96(1H，t，J= 7.5 Hz，H-7)，2.98(1H，qd，J= 7.7，5.1 Hz，H-2)，2.62(1H，td，J= 8.2，5.1 Hz，H-3)，2.14(1H，d，J= 15.2 Hz，H-6β)，1.89(1H，d，J= 8.0 Hz，H-6α)，1.87(1H，M，H-4)，1.27(3H，d，J= 7.4 Hz，H-8)，1.25(3H，s，H-10)，1.05(3H，d，J= 7.0 Hz，H-9);13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：186.2(C-1)，81.4(C-7)，79.7(C-5)，51.4(C-3)，58.0(C-6)，45.3(C-4)，36.3(C-2)，25.8(C-10)，19.0(C-8)，8.5(C-9)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[14]基本一致，故鑒定化合物11為pestalotiolactone A。

化合物12黃色固體;分子式C10H12O4。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ：5.96(1H，s，H-3)，3.83(3H，s，H-8)，2.68(3H，s，H-10)，2.01(3H，s，H-7);13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ：203.4(C-9)，163.6(C-2)，163.4(C-6)，163.4(C-4)，106.2(C-5)，104.9(C-1)，91.4(C-3)，55.7(C-8)，32.9(C-10)，7.1(C-7)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[15]基本一致，故鑒定化合物12為2′，4′-二羥基-6′-甲氧基-3′-甲基苯乙酮。

化合物13黃色晶體;分子式C10H12O4。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：6.03(1H，s，H-5)，3.84(3H，s，H-7)，2.65(3H，s，H-10)，1.93(3H，s，H-8);13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：205.1(C-9)，165.3(C-4)，163.60(C-6)，162.3(C-2)，106.0(C-3)，104.6(C-1)，90.9(C-5)，55.9(C-10)，33.0(C-7)，7.2(C-8)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[16]基本一致，故鑒定化合物13為1-(2，4-二羥基-6-甲氧基-3-甲基苯基)乙酮。

化合物14白色固體;分子式C8H10O2。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.14(2H，s，H-4，6)，2.15(3H，d，J= 0.9 Hz，H-8)，1.99(3H，s，H-7);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：157.1(C-1，3)，136.8(C-5)，109.0(C-2)，108.3(C-4，6)，21.3(C-8)，8.2(C-7)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[17]基本一致，故鑒定化合物14為2，5-二甲基間苯二酚。

化合物15白色固體;分子式C7H8O2。1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.12(2H，d，J= 2.3 Hz，H-4，6)，6.07(1H，t，J= 2.3 Hz，H-2)，2.18(3H，d，J= 0.7 Hz，H-7);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：158.9(C-1，3)，140.7(C-5)，108.1(C-4，6)，100.2(C-2)，21.1(C-7)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[18]基本一致，故鑒定化合物15為1，3-二羥基甲苯。

2.2 生物活性測試

采用SRB法[19]以人神經(jīng)癌細(xì)胞(SF-268)、人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、人肝癌細(xì)胞(HepG-2)為供試細(xì)胞株、阿霉素作為陽性對照分離得到的化合物進(jìn)行細(xì)胞毒活性評價(jià)(表1)，結(jié)果顯示化合物1表現(xiàn)出一定的細(xì)胞毒活性，對三株細(xì)胞株的IC50值為41.44～77.89 μM，而其余化合物無明顯的細(xì)胞毒活性。

圖2 化合物1～15的結(jié)構(gòu)式Fig.2 Structures of compounds 1-15

此外，采用DPPH法[20]以DPPH自由基清除率為指標(biāo)、Vc作為陽性對照，對分離得到的化合物進(jìn)行抗氧化活性評價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示化合物7有較強(qiáng)的抗氧化活性，其IC50值為14.95 μM，接近陽性對照Vc的IC50值13.93 μM，其余化合物則無明顯抗氧化活性(表1)。

表1 化合物1和7的細(xì)胞毒活性與抗氧化活性評價(jià)

3 討論

Neoroussoella是Liu等[21]在2014年首次發(fā)現(xiàn)并描述的一個真菌新屬。目前分離鑒定的Neoroussoella屬真菌主要來源于植物，存在于竹子、草本植物以及棕櫚樹中，而海洋來源的報(bào)道較少，集中在地中海流域，且來源均為海底植物[22-24]。本研究使用的FS526菌株為南海深海沉積物中分離得到。經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研表明，該屬真菌未見次生代謝產(chǎn)物的研究報(bào)道。

本研究首次從深海真菌Neoroussoellasp.FS526的固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離鑒定了15個單體化合物，其結(jié)構(gòu)類型多樣，包括雜萜2個、異香豆素5個、苯并呋喃2個、單萜1個、苯酚衍生物5個，所有化合物均為首次從Neoroussoella屬真菌中分離得到。從這些化合物的結(jié)構(gòu)類型上推測，苯酚及其衍生物是該真菌主要的特征性次生代謝產(chǎn)物，該類型化合物主要由聚酮生源合成途徑產(chǎn)生?；衔?有C-9位構(gòu)型不同的結(jié)構(gòu)類似物，該結(jié)構(gòu)類型的S構(gòu)型被Stierle等[25]從Penicillium屬真菌中首次發(fā)現(xiàn)，并命名為berkeleyacetal C，該化合物對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系有抑制作用。之后Sun等[26]從PenicilliumpurpurogenumMHZ 111中也發(fā)現(xiàn)了berkeleyacetal C。隨后，Chen等[5]從TalaromycesamestolkiaeYX1中分離純化到C-9位R構(gòu)型的新結(jié)構(gòu)類似物，并命名為amestolkolide B。對berkeleyacetal C和amestolkolide B兩種不同構(gòu)型的單體化合物進(jìn)行活性測試，結(jié)果均顯示有較強(qiáng)的NO產(chǎn)生抑制活性，但未發(fā)現(xiàn)明顯的細(xì)胞毒活性[5,26]。而本研究的生物活性測試結(jié)果顯示化合物1具有較弱的細(xì)胞毒活性。此外，異香豆素化合物7具有較強(qiáng)的抗氧化活性，其IC50值接近陽性對照Vc，值得進(jìn)一步研究。本研究結(jié)果豐富了Neoroussoella屬真菌的化學(xué)成分，為今后進(jìn)一步開展其他生物活性研究提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。