L-FABP在2型糖尿病患者中的表達及其與尿蛋白4項的相關性*

王 玫,金 姍,趙 珂,萬曉華△

(1.首都醫(yī)科大學附屬北京同仁醫(yī)院檢驗科,北京 100730；2.首都醫(yī)科大學第四臨床醫(yī)學院,北京 100176)

糖尿病腎病(DKD)是糖尿病主要的微血管并發(fā)癥之一，是目前引起終末期腎病(ESRD)的首要原因[1-2]。據(jù)報道,國內2型糖尿病患者DKD患病率為10%～40%[1，3-5]。因此早期診斷治療DKD，對于避免終末期腎病的發(fā)生意義重大。臨床上由于腎活檢病理檢查的有創(chuàng)性,早期診斷DKD主要依據(jù)尿蛋白標志物檢測。

尿肝型脂肪酸結合蛋白 (L-FABP) 是近年來廣受關注的一種新的尿蛋白標志物，在人類腎臟中，尿L-FABP主要存在于近曲小管上皮細胞中，腎臟損傷時可在尿液中檢出，研究表明尿L-FABP水平可反映腎臟功能狀態(tài)[6-7]。本研究旨在分析2型糖尿病患者尿L-FABP表達水平，以及尿L-FABP與各臨床指標及尿蛋白4項包括尿微量清蛋白/肌酐比值(UACR)、尿α1微球蛋白/肌酐比值(UA1MG)、尿免疫球蛋白G/肌酐比值(UIGG)、尿轉鐵蛋白/肌酐比值(UTRF)的相關性，探討尿L-FABP檢測在糖尿病腎病診斷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年4月至2019年10月在首都醫(yī)科大學附屬北京同仁醫(yī)院內分泌科住院的2型糖尿病患者160例，年齡36～84歲，平均(59.00±12.08)歲。將患者依據(jù)UACR值分為3組，正常清蛋白尿組(UACR<30 mg/g)39例、微量清蛋白尿組(UACR 30～300 mg/g)42例、大量清蛋白尿組(UACR>300 mg/g)60例[2]。

1.2 納入與排除標準

納入標準:所有病例均符合《中國2型糖尿病防治指南 (2017年版)》中2型糖尿病診斷標準[8]。且2型糖尿病病史≥5年的成年患者。排除標準:近期有急性感染或合并惡性腫瘤或自身免疫性疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎等)；已行腎移植或透析等腎臟替代治療。

1.3 方法

1.3.1檢測方法

(1)采用HLC-732G8全自動糖化血紅蛋白(HbA1c)分析儀檢測HbA1c；(2)采集空腹5 mL靜脈血，1 500 r/min離心 10 min，分離血清。采用美國 Beckman-Coulter AU5800 全自動生化分析儀檢測血清生化指標，主要包括空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿酸(UA)、總蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)；(3)采用慢性腎臟病流行病學協(xié)作公式(CKD-Epi公式)計算估算腎小球濾過率(eGFR)[9-10]；(4)受檢者尿液10 mL，1 500 r/min離心5 min，取上清液，常規(guī)檢測尿蛋白4項。其中尿肌酐(UCr)檢測采用Beckman-Coulter DXC800全自動生化分析儀檢測,尿微量清蛋白、尿α1微球蛋白、尿免疫球蛋白G、尿轉鐵蛋白均采用 Beckman-Coulter Immage 800免疫散射比濁儀檢測。尿L-FABP水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，本研究所有尿L-FABP結果均已用尿肌酐校正，即尿L-FABP/肌酐比值(本文均簡稱為L-FABP)。

1.3.2研究方法

收集患者一般資料，分析糖尿病組尿L-FABP及常規(guī)尿蛋白4項(包括UACR、UA1MG、UIGG、UTRF)的百分位數(shù)分布特征。對尿L-FABP與尿蛋白4項指標進行相關性分析。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 基本情況

本研究中男98例，女62例，男、女患者的年齡、病史、BMI及血壓(包括收縮壓及舒張壓)差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 男女患者一般資料比較

2.2 血液生化及代謝參數(shù)

男性患者BUN中位數(shù)為6.10 mmol/L，eGFR中位數(shù)為99.83 mL·min-1·1.73 m-2均明顯高于女性患者(P<0.05)，而男性患者SCr、TC及LDL-C均明顯低于女性患者(P<0.05)，見表2。

表2 男女患者血液生化及代謝參數(shù)比較

性別TG[M(P25～P75),mmol/L]TC[M(P25～P75),mmol/L]LDL-C[M(P25～P75),mmol/L]HDL-C[M(P25～P75),mmol/L]HbA1c[M(P25～P75),%]eGFR[M(P25～P75),mL·min-1·1.73 m-2]男1.56(0.98～2.51)3.94(3.26～4.64)a2.16(1.71～2.87)a0.95(0.82～1.15)8.65(7.30～10.03)99.83(81.02～111.00)a女1.86(1.43～2.50)4.44(3.77～5.22)2.61(1.98～3.32)1.03(0.84～1.32)9.30(7.60～11.10)93.09(79.42～102.24)P0.094 0.002 0.005 0.121 0.065 0.035

2.3 尿液蛋白標志物參數(shù)

所有患者L-FABP中位數(shù)為422.85 ng/g，男性患者尿L-FABP中位數(shù)為355.77 ng/g，女性患者尿L-FABP中位數(shù)為579.88ng/g，男性患者明顯低于女患者(P<0.05)。對于另外常規(guī)尿蛋白4項(UACR、UA1MG、UIGG、UTRF)，男性患者和女性患者差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表3。尿L-FABP及常規(guī)尿蛋白4項指標的百分位數(shù)分布特征結果顯示，尿L-FABP 5%、10%、25%、50%、75%、90%、95%百分位數(shù)值分別為126.92、162.17、237.01、422.85、742.06、1 132.91、1 302.69、1 716.86 ng/g，見圖1。

表3 男女患者尿液蛋白標志物參數(shù)[M(P25～P75]

圖1 尿L-FABP及常規(guī)尿蛋白4項指標的百分位數(shù)分布特征

2.4 尿L-FABP比較

正常清蛋白尿組尿L-FABP中位數(shù)為320.89 ng/g，微量清蛋白尿組尿L-FABP中位數(shù)為438.74 ng/g，大量清蛋白尿組尿L-FABP中位數(shù)為456.26 ng/g，3組間比較差異無統(tǒng)計學意義，見圖2。

圖2 3組患者尿L-FABP水平

2.5 尿L-FABP與其他指標相關性分析

尿L-FABP與UACR、UA1MG、UIGG、UTRF均呈正相關(r值分別為0.275、0.389、0.434、0.502，P<0.05)，L-FABP與BMI(r=-0.179，P<0.05)及eGFR(r=-0.179，P<0.05)均呈負相關。與尿L-FABP類似，UACR、UA1MG、UIGG、UTRF各指標與eGFR均分別呈負相關(r值分別為-0.310、-0.422、-0.380、-0.386，P<0.05)，見圖3。尿L-FABP與糖尿病病史、FBG、BUN、SCr及HbA1c均無明顯相關性，而尿蛋白4項各指標與病史、FBG、BUN、SCr及HbA1c均分別呈正相關(P<0.05)。

圖3 尿蛋白4項與尿L-FABP及eGFR的相關性分析

3 討 論

尿L-FABP是一種相對分子質量低(15×103)的細胞內載體蛋白，在腎近曲小管和肝臟中均有表達。在腎臟疾病中，尿L-FABP基因表達上調，并且尿L-FABP水平與腎間質損傷相關，主要反映近端小管上的損傷及功能異常[6-7,11-13]。

研究顯示，與微量清蛋白尿和正常清蛋白尿糖尿病患者相比，大量清蛋白尿患者的尿L-FABP水平顯著升高，而且微量清蛋白尿患者的尿L-FABP水平顯著高于清蛋白尿糖尿病患者[11,14]。而本研究中，通過對正常清蛋白尿組、微量清蛋白尿組及大量清蛋白尿組尿L-FABP比較發(fā)現(xiàn)，3組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，這種結果的不一致可能源于本研究各組樣本例數(shù)偏少。梁雅靈等[14]研究表明，尿L-FABP水平與蛋白尿的進展有關，而且尿L-FABP水平在尿蛋白水平正常的人群中已經開始升高,尿L-FABP水平有望作為DKD風險評估指標，從而有效地預測DKD的進展。

研究表明，糖尿病腎病患者的尿L-FABP水平與UACR呈正相關，與腎小球濾過率呈負相關[7,12-13]，本研究發(fā)現(xiàn)，在糖尿病病例中尿L-FABP與尿蛋白4項(包括UACR、UA1MG、UIGG、UTRF)均呈明顯正相關，L-FABP與BMI及eGFR均呈負相關。VISWANATHAN等[7]在一項來自2型糖尿病患者的研究中發(fā)現(xiàn)，在微量清蛋白尿階段尿L-FABP水平升高，表明糖尿病腎病的早期即有腎小管的損傷，這項研究也發(fā)現(xiàn)，微量清蛋白尿組尿中L-FABP水平與收縮壓、空腹血糖和HbA1c顯著相關，這表明尿中L-FABP可能是糖尿病腎病早期，反映腎小球和腎小管功能障礙的最敏感指標之一。而粱衍等[15]研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病患者尿L-FABP與UACR呈正相關， 而與Scr、UA、TC、TG、LDL-C、HDL-C及HbAlc水平無相關。本研究數(shù)據(jù)顯示，尿L-FABP與糖尿病病史、FBG、BUN、SCr及HbA1C均無明顯相關性，而UACR、UA1MG、UIGG、UTRF各指標與病史、FBG、BUN、SCr及HbA1C均分別呈正相關。由于本研究例數(shù)偏少，所以尿L-FABP與臨床各指標的相關性研究需要更大樣本的數(shù)據(jù)進一步闡述。

國外研究資料顯示，糖尿病患者發(fā)展為終末期腎病(ESRD)的發(fā)生率約為每年1%，合并大量清蛋白尿者ESRD的發(fā)生率接近每年6%[1-3]。FUFAA等[16]研究發(fā)現(xiàn)，尿L-FABP水平與2型糖尿病患者的進展相關，更高的尿L-FABP水平提示患者有可能進展為ESRD的風險進一步加大。此外，對2型糖尿病患者進行的長期觀察研究發(fā)現(xiàn)，尿L-FABP的高水平與腎功能惡化和較高的心血管病發(fā)病率有關。這種關聯(lián)性在正常清蛋白尿的糖尿病患者中是顯著的，表明它在患有早期腎功能不全和獨立性蛋白尿的糖尿病患者中，尿L-FABP可能作為預測未來腎功能不全和心血管疾病發(fā)生率的一個標志物[14]。

綜上所述，尿L-FABP水平與2型糖尿病患者的腎功能狀態(tài)密切相關，與UACR等其他尿蛋白標志物正相關，檢測尿L-FABP水平對于糖尿病腎病的早期診斷及預后判斷有重要臨床意義，有望成為糖尿病腎病早期診斷及進展評估的新型生物標志物，值得進一步深入研究。