檸條、沙柳顆粒飼料對小尾寒羊血清生化、抗氧化和免疫指標的影響

呂宗浩，王金全，喬增強，李信福，劉 杰

（1. 懷化市農(nóng)業(yè)科學研究所，湖南 懷化 418000；2. 中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所，北京 100081；3. 內(nèi)蒙古凱程匯德農(nóng)牧科技有限公司，內(nèi)蒙古 包頭 014060）

近年來，隨著我國牛羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和對粗飼料的需求不斷增加，常規(guī)粗飼料不足問題日益顯現(xiàn)，飼料原料的緊缺己經(jīng)成為阻礙飼料產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素之一。因此，加大對非常規(guī)飼料資源的研究，是保障我國牛羊養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展的重要途徑之一。

有些非常規(guī)飼料資源營養(yǎng)價值很高，如檸條、沙柳等的粗蛋白質(zhì)含量高，是優(yōu)質(zhì)的植物性蛋白質(zhì)補充飼料，具有飼料資源開發(fā)潛力。當前，對檸條、沙柳研究大多集中于對其營養(yǎng)成分的測定，加上灌木類植物中單寧含量較高，當家畜過量采食這些植物后，會引起不良反應(yīng)甚至中毒[1-2]。因此，檸條等副產(chǎn)物的加工利用方式主要有揉絲、粉碎、青貯等[3-5]，在提高檸條等副產(chǎn)物利用率方面發(fā)揮了重要作用。而對檸條、沙柳進行制粒處理的研究報道比較少。鑒于此，本研究結(jié)合實際，將檸條、沙柳制成顆粒飼料，替代玉米秸稈顆粒飼料飼喂小尾寒羊，探索飼喂檸條、沙柳顆粒飼料對小尾寒羊血清中生化、免疫和抗氧化指標的影響，為其在養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 檸條、沙柳和玉米秸稈顆粒飼料的制備

1.1.1 檸條、沙柳和玉米秸稈的收割

采用大型灌木平茬收割機、玉米收割機進行檸條、沙柳和玉米秸稈的平茬和收割。再將收割后的檸條、沙柳和玉米秸稈用專用的揉絲粉碎機揉絲粉碎為2～4 cm 的絲段，為加工顆粒飼料做準備。

1.1.2 檸條、沙柳和玉米秸稈制粒

經(jīng)過揉絲粉碎后，根據(jù)飼喂動物的營養(yǎng)需求量，添加不同比例的精飼料、微量元素、礦物質(zhì)、粘合劑等，通過制粒機壓制成直徑為0.5～1.5 cm 的顆粒。

1.2 試驗羊的選擇與分組

選擇健康、體重相近(31.33 ± 2.28 kg)、生長狀況良好的5 月齡小尾寒羊90 只，隨機分為3 組(保證各組體重之間無顯著性差異)，即對照組(飼喂玉米秸稈顆粒料)、檸條組(飼喂檸條顆粒料)和沙柳組(飼喂沙柳顆粒料)，每組30 頭，分圈飼養(yǎng)。

1.3 飼養(yǎng)管理

預試期15 d，主要適應(yīng)環(huán)境和飼料；正試期165 d，飼喂顆粒全混合日糧，每天早晚各1 次。日常衛(wèi)生、消毒和防疫免疫工作按照既定程序進行。整個試驗持續(xù)6 個月，所有羊只自由采食及飲水。試驗期間應(yīng)觀察小尾寒羊的健康狀況，采食、飲水、糞便是否發(fā)生改變，如果發(fā)現(xiàn)改變及時處理，并做好詳細記錄。

1.4 日糧組成

參照我國《肉羊飼養(yǎng)標準》(NY/T 816-2004)[6]，設(shè)計普通精飼料配方為20%玉米、5%豆粕、3%次粉、2%噴漿玉米皮，粗飼料按照試驗設(shè)計進行搭配，精粗比例為30 ∶ 70；所有飼料均勻混合，制備成全混合型顆粒日糧進行飼喂。試驗各組日糧組成及營養(yǎng)水平如表1 所列。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平Table 1 Diet composition and nutritional level%

1.5 樣品采集與檢測

在試驗最后一天，晨飼前每組隨機選取6 只小尾寒羊進行靜脈采血，每只采血10 mL，血液37 ℃水浴靜置30 min，轉(zhuǎn)入離心機3 000 r·min-1，離心10 min，分離血清，保存到-20 ℃?zhèn)錅y?？偟鞍?、白蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、丙二醛、超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、白細胞介素1、白細胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量均由北京金?？朴缟锟萍及l(fā)展有限公司進行檢測。

1.6 統(tǒng)計分析

使用Excel 整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，通過Duncan 法進行多重比較，P＜ 0.05 作為差異顯著的判斷標準。試驗結(jié)果均用平均值 ± 標準誤(SEM)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中生化指標的影響

各組小尾寒羊血清中總蛋白、白蛋白含量差異不顯著(P＞ 0.05)，對照組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于沙柳組(P＜ 0.05)，對照組和檸條組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量差異不顯著，但從測定值上看，檸條組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量高于對照組(表2)。

表2 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中生化指標的影響Table 2 Effects of corn straw, Caragana korshinskii and Salix psammophila on biochemical indexes in the serum of Small-tailed Han sheep

2.2 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中抗氧化指標的影響

各組小尾寒羊血清中超氧化物歧化酶、丙二醛、總抗氧化能力差異顯著(P＜ 0.05)。從測定值上看，檸條組血清中丙二醛含量最低，檸條組血清中超氧化物歧化酶、總抗氧化能力最高(表3)。

表3 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中抗氧化指標的影響Table 3 Effects of corn straw, Caragana korshinskii and Salix psammophila on antioxidant indexes in serum of Small-tailed Han sheep

2.3 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中細胞免疫相關(guān)因子的影響

各組小尾寒羊血清中白細胞介素1、白細胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量差異顯著(P＜ 0.05)。從測定值上看，檸條組血清中白細胞介素1、白細胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量最低(表4)。

表4 玉米秸稈、檸條和沙柳對小尾寒羊血清中細胞免疫相關(guān)因子的影響Table 4 Effects of corn stalk, Caragana korshinskii and Salix psammophila on cellular immune related factors in serum of Small-tailed Han sheep pg·mL-1

3 討論

3.1 對小尾寒羊血清生化指標的影響

顆粒飼料經(jīng)過小尾寒羊采食后，營養(yǎng)物質(zhì)進入體內(nèi)，隨著血液將其運送到機體各處，因此血液生化相關(guān)指標能夠很好地反映小尾寒羊?qū)︻w粒飼料的影響。血清總蛋白是由白蛋白和球蛋白組成的[7]。三者的含量可反映機體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況，血清總蛋白含量高有利于促進動物的生長發(fā)育和提高飼料報酬[8]，總蛋白和白蛋白的含量高低能反映蛋白質(zhì)代謝是否旺盛，當其含量越高越能說明肝臟合成蛋白質(zhì)速度越快，蛋白體有較高沉積，有利于動物生長發(fā)育。在本研究中，對照組、檸條組和沙柳組小尾寒羊血清中總蛋白、白蛋白含量差異不顯著(P＞ 0.05)，說明檸條、沙柳與玉米秸稈相比對小尾寒羊的蛋白質(zhì)代謝和蛋白質(zhì)的吸收無明顯改變。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶是最常用于肝臟生理功能的重要指標[9]，在非必需氨基酸和蛋白質(zhì)的分解過程中，起著很重要的中介作用[10]。谷丙轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于動物線粒體中的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，活性過高說明肝臟功能有可能受損。有研究表明，飼糧中添加構(gòu)樹(Broussonetia papyrifera)葉粉，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與對照組差異不顯著，未對育肥豬的肝臟產(chǎn)生不良影響[11]。本研究中，沙柳組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著低于對照組，說明沙柳顆粒飼料有降低小尾寒羊血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的趨勢，有利于小尾寒羊的肝臟健康。

3.2 對小尾寒羊血清抗氧化指標的影響

在生理條件下，自由基類高活性分子的生成和清除維持在穩(wěn)態(tài)水平和平衡狀態(tài)[12]。當自由基的生成超過機體的清除能力時，就會發(fā)生氧化還原平衡的紊亂，檢測動物超氧化物歧化酶等抗氧化酶的變化能比較準確地反映機體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)的情況，以此來評價機體的抗氧化能力[13]?？偪寡趸芰κ呛饬繖C體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標[14]，其含量的高低是評價抗氧化能力的重要指標之一。本研究中，檸條組超氧化物歧化酶含量和總抗氧化能力顯著高于對照組，說明檸條顆粒飼料對小尾寒羊抗氧化能力的影響優(yōu)于玉米秸稈飼料。大量的自由基誘導生物膜上的多不飽和脂肪酸過氧化產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛，因此，丙二醛含量的高低直接反映著動物機體脂質(zhì)氧化的程度、自由基的代謝情況，從而間接地反映細胞的損傷程度[15]。本研究中，檸條組丙二醛的含量顯著低于對照組，說明檸條顆粒飼料比秸稈顆粒飼料對小尾寒羊細胞膜過氧化程度低，細胞膜受到的傷害輕。因此，本研究表明檸條顆粒飼料對小尾寒羊抗氧化能力的影響優(yōu)于玉米秸稈顆粒飼料，這與檸條具有抗氧化性是一致的[16]。

3.3 對小尾寒羊血清細胞免疫相關(guān)因子的影響

動物血清中細胞因子在免疫應(yīng)答等過程中發(fā)揮著重要的作用[17]，能不同程度地反映機體健康狀況，其在機體炎癥和抗炎過程中發(fā)揮重要作用[18]。白細胞介素 1 是主要由單核巨噬細胞產(chǎn)生的一種重要的細胞因子，可參加機體炎癥反應(yīng)。白細胞介素6 能夠誘導B 細胞的分化以及產(chǎn)生各種抗體，可使T 細胞活化增殖，參與機體的免疫應(yīng)答，是炎性反應(yīng)的促發(fā)劑[19]。而腫瘤壞死因子-α 是吞噬細胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，是促炎性細胞因子[20]。有研究表明，細胞因子的過度分泌會對機體產(chǎn)生負面影響[21]，可抑制動物生長，降低生產(chǎn)效率[22]。本研究中，檸條組小尾寒羊血清中白細胞介素 1、白細胞介素 6 和腫瘤壞死因子-α 的含量均顯著低于對照組，說明檸條顆粒飼料能夠抑制白細胞介素 1、白細胞介素 6 和腫瘤壞死因子-α 細胞因子的分泌，這可能與檸條具有抗炎性有關(guān)[23]。

4 結(jié)論

1)飼喂沙柳顆粒飼料與玉米秸稈顆粒飼料相比，能夠影響血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平，顯著降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，說明沙柳顆粒飼料有降低小尾寒羊血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的趨勢。因此，沙柳顆粒飼料在小尾寒羊日糧中應(yīng)用具有可行性，有利于小尾寒羊的肝臟健康。

2)飼喂檸條顆粒飼料與玉米秸稈顆粒飼料，可以提高小尾寒羊的抗氧化能力，能夠影響血清中細胞因子的水平，顯著降低血清中白細胞介素 1、白細胞介素 6 和腫瘤 壞死因子-α 的濃度。因此，檸條顆粒飼料飼喂小尾寒羊具有很高的開發(fā)潛力。