不同方法檢測(cè)人絨毛膜促性腺激素分析

張明杰，崔貴虎，蘇東越，崔鳳姬，姜波，竇迎春

（赤峰市婦產(chǎn)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

0 引言

人絨毛膜促性腺激素是一種糖蛋白激素，主要由妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生。與促甲狀腺激素、垂體分泌的卵泡刺激素、黃體生成素等結(jié)構(gòu)類似，因此易發(fā)生交叉反應(yīng)，這些激素含有相同的α亞單位，但因β亞單位不同而賦予其各自具有免疫學(xué)和生物學(xué)特異性。β-HCG與β-LH間有相同的幾段肽序列，但β-HCG與β-LH自身具有特定的羧基末端。當(dāng)受精卵著床于子宮內(nèi)膜后，很快滋養(yǎng)層就開始產(chǎn)生HCG，利于雌激素與黃體酮分泌使子宮脫模形成，胎盤生長(zhǎng)成熟[1]。妊娠前六周HCG中間每1.5-3天約翻倍，在孕早期其水平持續(xù)升高，孕中晚期逐漸下降[2]，分娩后，HCG濃度恢復(fù)至＜5 mIU/mL（IU/L）[3]。HCG是妊娠的一種極好的標(biāo)志物，對(duì)于女性診斷早期妊娠意義頗深，另外對(duì)女性宮外孕、妊娠期間其他疾病的診斷有著重要意義[4]。本文同時(shí)應(yīng)用膠體金試紙法和化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)1000例標(biāo)本進(jìn)行HCG檢測(cè)，結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2020年1月至2020年7月我院婦科、產(chǎn)科、生殖科需要檢測(cè)血HCG的1000例患者血液標(biāo)本，均無溶血和乳糜血現(xiàn)象。

1.2 儀器與試劑。化學(xué)發(fā)光免疫法用BECKMAN COULTER UniCel DxI全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀監(jiān)測(cè)儀器，試劑為原裝配套試劑。線性范圍為0～1312 mIU/mL，非孕期婦女正常值為0～5 mIU/mL；膠體金試紙條生產(chǎn)廠家為藍(lán)十字生物藥業(yè)（北京）有限公司生產(chǎn)的人絨毛膜促性腺激素檢測(cè)試紙簡(jiǎn)稱早孕檢測(cè)試紙。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 膠體金試紙法：待測(cè)血清、檢測(cè)試紙均在室溫控制于10℃～30℃左右病人平衡將其從中取出，再血清標(biāo)本中將測(cè)試紙有箭頭的一端插入其中，測(cè)試紙條上端有MAX標(biāo)志線，插入時(shí)注意深度不能超過此標(biāo)志線，約5 s左右將其取出平放，觀察顯示結(jié)果在5分鐘之內(nèi)完成。結(jié)果判定為：①弱陽(yáng)性：在檢測(cè)線T的位置與對(duì)照線C的位置處均有一條紅色線，檢測(cè)線比對(duì)照線顏色淺；②陽(yáng)性：在檢測(cè)線T的位置與對(duì)照線C的位置處均有一條紅色線，顏色深淺一致或檢測(cè)線比對(duì)照線顏色深；③陰性：只有對(duì)照線T的位置有一條紅色線；④無效：紅色反應(yīng)線均未出現(xiàn)，或紅色反應(yīng)線出現(xiàn)于檢測(cè)線T的位置。

1.3.2 化學(xué)發(fā)光免疫分析法：檢測(cè)原理是連續(xù)的兩步酶免疫法（夾心法），在枸櫞酸鹽緩沖液的反應(yīng)管里把樣本加入其中，經(jīng)初步孵育后，繼續(xù)向管內(nèi)添加兔抗βHCG-堿性磷酸酶結(jié)合物，包被山羊抗小鼠IgG-小鼠單克隆抗βHCG復(fù)合物的順磁性微粒。HCG與固相上固定的單克隆抗-βHCG結(jié)合，同時(shí)，兔抗βHCG-堿性磷酸酶結(jié)合物與HCG上的抗原位點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)。在反應(yīng)管孵育后，磁場(chǎng)內(nèi)固相上結(jié)合的物質(zhì)將保持，而未結(jié)合的物質(zhì)將被沖洗掉。然后，向反應(yīng)管內(nèi)加入化學(xué)發(fā)光底物，并使用光度計(jì)測(cè)量反應(yīng)產(chǎn)生的光，其中產(chǎn)生光的量與樣本中總βHCG的濃度兩者成為正比例。根據(jù)系統(tǒng)保存的多點(diǎn)校準(zhǔn)曲線來確定樣本中的分析物量。如果膠體金試紙初篩是陰性或者弱陽(yáng)性，用BECKMAN COULTER UniCel DxI 800 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀儀器編碼273檢測(cè)，陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性用儀器編碼274檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)（n%）代表率，χ2檢驗(yàn)；計(jì)量（±s），t檢驗(yàn)。文中所生成的數(shù)據(jù)均借用SPSS 21.0數(shù)據(jù)包處理，P＜0.05 顯現(xiàn)檢驗(yàn)結(jié)果有意義。

2 結(jié)果

通過此次研究數(shù)據(jù)顯示，1000例婦科患者采取不同檢測(cè)方式后，其中陽(yáng)性472例，陰性528例，有6例膠體金試紙法檢測(cè)為弱陽(yáng)性，后用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)為陰性。6例婦科患者均未使用藥物。膠體金試紙法陽(yáng)性478例、522則為陰性；化學(xué)發(fā)光免疫法陽(yáng)性472例、528則為陰性，統(tǒng)計(jì)學(xué)P＜0.05詳細(xì)數(shù)據(jù)見表1、表2。

表1 對(duì)比兩組婦科患者不同檢測(cè)方式對(duì)HCG檢測(cè)結(jié)果

表2 對(duì)比兩組婦科患者不同檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果

3 討論

人絨毛膜促性腺激素是檢測(cè)女性是否懷孕的檢測(cè)方法，主要是由胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞分泌，只要妊娠后絨毛生成，在血液循環(huán)中能夠檢測(cè)的人絨毛膜促性腺激素。HCG與早期妊娠，葡萄胎，絨毛膜上皮細(xì)胞癌，精原細(xì)胞瘤，畸胎瘤，流產(chǎn)等疾病密切相關(guān)。因此快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)HCG并及時(shí)發(fā)出報(bào)告對(duì)臨床醫(yī)生診斷治療至關(guān)重要[4]。膠體金試紙法和化學(xué)發(fā)光免疫方法用于HCG的檢測(cè)，膠體金試紙方法、化學(xué)發(fā)光免疫方法方法優(yōu)點(diǎn)較多同時(shí)也有缺點(diǎn)。

化學(xué)發(fā)光免疫法的優(yōu)點(diǎn)為靈敏度較高、精密度高和特異性高，本文采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀其特點(diǎn)為：特異性、靈敏性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性較高、檢測(cè)速度比較快，對(duì)于婦科患者臨床疾病的診斷效果顯佳?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法也有缺點(diǎn)其線性范圍較窄，其價(jià)格較高，患者進(jìn)行重復(fù)測(cè)量花銷較多，患者取報(bào)告的時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)于婦科患者異位妊娠狀況，快速明確診斷中提供臨床數(shù)據(jù)方面其準(zhǔn)確性差，因此臨床醫(yī)生于正確的決策上有差異性[5]。膠體金試紙法是采用膠體金免疫層析技術(shù)，此方法操作簡(jiǎn)單、快速，僅需要商品試劑，不需要任何儀器設(shè)備，數(shù)分鐘即可檢測(cè)出結(jié)果。實(shí)驗(yàn)重復(fù)性比較好其特異性較高，對(duì)于溶血和乳糜血的干擾不受限制，但存在一定的假陽(yáng)性。通過此次研究數(shù)據(jù)顯示，1000例婦科患者采取不同檢測(cè)方式后，其中陽(yáng)性472例，陰性528例，有6例膠體金試紙法檢測(cè)為弱陽(yáng)性，后用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)為陰性。6例婦科患者均未使用藥物?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)＞1312 mIU/mL，超出檢測(cè)上限，儀器自動(dòng)稀釋得出稀釋后結(jié)果，如此，出結(jié)果的時(shí)間延長(zhǎng)且耗費(fèi)成本。造成該現(xiàn)象的原因可能是存在交叉反應(yīng)、試紙條本身質(zhì)量問題、或者因其他因素檢測(cè)到其他無活性的HCG分子從而造成了假陽(yáng)性情況[6-7]。

本研究1000例標(biāo)本兩種方法檢測(cè)對(duì)比結(jié)果雖然只有6例不符，但檢驗(yàn)數(shù)據(jù)關(guān)乎到病人生命，不容小覷，化學(xué)發(fā)光免疫法的特點(diǎn)為：特異性較高、安全性好、結(jié)果穩(wěn)定、誤差小其檢測(cè)速度比較快，能夠適應(yīng)臨床診斷的相關(guān)需求。因此，建議膠體金試紙發(fā)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行初篩后，再進(jìn)行化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)，兩種方法聯(lián)合檢測(cè)，不僅可以監(jiān)測(cè)結(jié)果，還大大降低了實(shí)驗(yàn)試劑的成本，并能一次性通過實(shí)驗(yàn)，為臨床快速、準(zhǔn)確的發(fā)出報(bào)告。