循環(huán)腫瘤細(xì)胞在原發(fā)性肝癌治療中的應(yīng)用及監(jiān)測價值

呂菁菁 李鋒 陳思奇

原發(fā)性肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)作為常見惡性腫瘤疾病,在我國惡性腫瘤致死率中高居第二位,嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量,需引起重視。肝細(xì)胞癌有極強的侵犯能力與轉(zhuǎn)移能力,容易導(dǎo)致遠(yuǎn)處血管受損或者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［1］。從過去臨床文獻(xiàn)報道［2,3］中看出,大部分患者在出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶后才會誘發(fā)異常癥狀,或者影像學(xué)檢查可見明顯轉(zhuǎn)移灶才可確診,但此時喪失最佳的手術(shù)治療時機,只能通過化療、放療、TACE 等方案治療。隨著研究增多,發(fā)現(xiàn)肝移植或肝癌切除患者術(shù)后復(fù)發(fā)可能和循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cell,CTC)也有關(guān)［4,5］,為此有學(xué)者將CTC 作為肝癌預(yù)后判斷的獨立指標(biāo),若能檢測肝癌患者體內(nèi)CTC 水平,能對臨床治療方案的調(diào)整提供依據(jù),甚至可為預(yù)后評估提供參考。本院就收治的40 例原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行了研究,報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2019 年3 月～2020 年3 月收治的40 例原發(fā)性肝癌患者,按照隨機雙盲法分為對照組和觀察組,每組20 例。對照組男14 例、女6 例；年齡33～78 歲,平均年齡(56.87±7.96)歲；單發(fā)腫瘤17 例、多發(fā)腫瘤3 例；按第六版國際抗癌聯(lián)盟原發(fā)性肝癌TNM 分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期例數(shù)分別為5、6、6、3 例。觀察組男15 例、女5 例；年齡35～75 歲,平均年齡(56.76±7.26)歲；單發(fā)腫瘤16 例、多發(fā)腫瘤4 例；TNM 分期：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期例數(shù)分別為6、6、5、3 例。兩組一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合原發(fā)性肝癌臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］,首診患者；②近期內(nèi)(3 個月內(nèi))未輸血者；③入院前均未接受過任何抗癌治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①病理確診為膽管癌、肝細(xì)胞膽管細(xì)胞混合癌者；②合并其他惡性腫瘤者；③妊娠、生殖系胚胎源性腫瘤、活動性肝病、繼發(fā)性肝癌等。此外,本研究所有患者均簽署知情同意書,且經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1TACE組 本組應(yīng)用TACE方案,選擇GE innova 4100 大型數(shù)字平板DSA 機進(jìn)行TACE 治療,術(shù)前均實施碘過敏試驗,造影劑為碘海醇(非離子型),以Seldinger 技術(shù)經(jīng)右股動脈穿刺,于腹腔干置入導(dǎo)管實施造影檢查,明確腫瘤供血的動脈及具體的腫瘤部位/大小/范圍等。用Terumo 4F/5F 超滑導(dǎo)管選擇性插管處理,插入靶血管,經(jīng)血管造影確認(rèn)后,經(jīng)導(dǎo)管注入10～20 ml 的2%利多卡因肝素液,連續(xù)緩慢注入,5～10 min 實施夾心面包法,將化療藥物與栓塞劑注入,可選擇2～3 種藥物聯(lián)合治療,比如40～60 mg 順鉑、8～10 mg 絲裂霉素、40～60 mg 表阿霉素、500～1000 mg 5-氟尿嘧啶、8～12 mg 羥基喜樹堿。具體根據(jù)患者的情況合理選擇聯(lián)合用藥。TACE 術(shù)后拔管,壓迫止血穿刺處15 min,加壓包扎,絕對臥床10～12 h。治療周期間隔1～2 個月,連續(xù)2～4 個周期。

1.2.2化療組 本組患者選擇奧沙利鉑+卡培他濱聯(lián)合化療,其中奧沙利鉑針劑135 mg/m2,靜脈滴注2 h,第1 天,卡培他濱1250 mg/m2,口服,早晚飯后0.5 h,b.i.d.,第1～14 天,每3 周重復(fù),連續(xù)進(jìn)行6 個周期化療。

1.2.3CTC 計數(shù)方法 經(jīng)肘靜脈采集晨空腹靜脈血5 ml,加紅細(xì)胞裂解液,30 min 室溫孵育,離心,去除紅細(xì)胞。加入磁珠與白細(xì)胞共同抗原抗體,混合均勻,30 min 低溫孵育,用免疫磁珠分選樣本,去除部分白細(xì)胞,得CTC 值。進(jìn)一步用濾膜過濾CTC,清除白細(xì)胞,實施免疫熒光染色,獲得CTC 計數(shù)。

1.3觀察指標(biāo) 比較兩組臨床療效；治療前3 d、治療后3 d、隨訪3 個月時的CTC 計數(shù)、CTC 陽性率與隨訪3 個月復(fù)發(fā)率。

1.4療效判定標(biāo)準(zhǔn) 原發(fā)性肝癌療效標(biāo)準(zhǔn)參考世界衛(wèi)生組織(WHO)有關(guān)實體瘤療效標(biāo)準(zhǔn)評價,包括完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)、進(jìn)展(PD),總有效率=(CR+PR+SD)/總例數(shù)×100%［7］。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組臨床療效比較 TACE 組臨床總有效率75.00%略高于化療組的65.00%,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組臨床療效比較 ［n(%)］

2.2兩組治療前3 d、治療后3 d、隨訪3 個月時的CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較 治療前3 d 兩組CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后3 d、隨訪3 個月時兩組CTC 計數(shù)及CTC 陽性率均低于治療前3 d,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。但兩組治療后組間CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組治療前3 d、治療后3 d、隨訪3 個月時CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較［,n(%)］

表2 兩組治療前3 d、治療后3 d、隨訪3 個月時CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較［,n(%)］

注：與本組治療前3 d 比較,aP<0.05

2.3兩組隨訪3 個月時復(fù)發(fā)率比較 隨訪3 個月時,用影像學(xué)評估復(fù)發(fā)情況,結(jié)果顯示,TACE 組復(fù)發(fā)率5.00%低于化療組的30.00%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組隨訪3 個月時復(fù)發(fā)率比較 ［n(%)］

3 討論

原發(fā)性肝癌在惡性腫瘤中十分常見,且惡性程度較高,未能及時診斷與治療的原發(fā)性肝癌生存期可能僅有3～6 個月。外科切除手術(shù)治療是目前原發(fā)性肝癌最為有效的方式之一,但肝臟有豐富血供,術(shù)后容易轉(zhuǎn)移,比如血行轉(zhuǎn)移。門靜脈受到癌細(xì)胞侵犯會形成癌栓,從而出現(xiàn)病灶轉(zhuǎn)移,同時癌細(xì)胞經(jīng)門靜脈進(jìn)入體循環(huán),從而導(dǎo)致肝外轉(zhuǎn)移。為了盡量減少這類轉(zhuǎn)移,有效的防治、監(jiān)測癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移十分重要。

本次研究結(jié)果顯示,TACE 組臨床總有效率高于化療組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。說明TACE 治療與化療治療原發(fā)性肝癌的療效相當(dāng)；治療后3 d、隨訪3 個月時兩組CTC 計數(shù)及CTC 陽性率均低于治療前3 d,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。兩組治療后組間CTC 計數(shù)與CTC 陽性率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。說明TACE 與化療治療原發(fā)性肝癌,在治療后CTC 計數(shù)、陽性率改善程度相當(dāng)；隨訪3 個月時,TACE 組復(fù)發(fā)率低于化療組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明TACE 治療可以明顯減少復(fù)發(fā)。檢測外周血CTC,標(biāo)本容易收集,操作難度小,基層醫(yī)院也可廣泛開展。CTC 富集主要通過細(xì)胞表面標(biāo)志物免疫磁珠法、細(xì)胞大小過濾法、密度梯度離心法等處理,本次選擇免疫磁珠法,這種方法應(yīng)用廣泛,可根據(jù)腫瘤上皮抗原分離,技術(shù)十分成熟,獲得的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度高。TACE 治療原發(fā)性肝癌可獲得不錯的價值,有研究［8］認(rèn)為是肝癌非手術(shù)療法中首選的方案,理論基礎(chǔ)來自肝臟有雙重供血特征,肝動脈提供30%血供、門靜脈提供70%血供；肝癌瘤體90%以上來自肝動脈。此外,本次還對隨訪期間復(fù)發(fā)情況進(jìn)行來分析,發(fā)現(xiàn)TACE治療患者復(fù)發(fā)率更低,說明有更高的價值。

綜上所述,TACE 與化療方案治療原發(fā)性肝癌均有一定的價值,積極做好CTC 治療前后監(jiān)測,可為臨床評估預(yù)后提供參考價值。