云南省楚雄州仔豬腹瀉病毒性病因分析

段天才 朱玲云 張海玲

摘要：[目的] 為了了解云南省楚雄州哺乳仔豬腹瀉病毒性病因分析。[方法] 對(duì)來(lái)自楚雄州5個(gè)地區(qū)6個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的253份出現(xiàn)腹瀉癥狀的仔豬糞便樣品進(jìn)行RT-PCR分子生物學(xué)鑒定。[結(jié)果] 結(jié)果顯示，此次試驗(yàn)共檢出131份豬圓環(huán)病毒，陽(yáng)性率51.78%;豬輪狀病毒15份，陽(yáng)性率5.93%;豬流行性腹瀉病毒15份，陽(yáng)性率5.93%;檢測(cè)結(jié)果表明，豬圓環(huán)病毒是引起當(dāng)?shù)夭溉樽胸i腹瀉的主要病因，部分豬場(chǎng)還存在兩種或多種病原的混合感染。[結(jié)論] 本次檢測(cè)從病毒性病因的角度對(duì)致哺乳仔豬腹瀉綜合癥的病因進(jìn)行了初步的分析，為哺乳1仔豬腹瀉病的病毒性病因的控制和預(yù)防提供更合理、更切合實(shí)際情況的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：仔豬腹瀉;病毒性病因;RT-PCR

哺乳仔豬的腹瀉問(wèn)題在養(yǎng)豬業(yè)的生產(chǎn)中很常見(jiàn)，在近幾年里哺乳仔豬的腹瀉性疾病在全國(guó)很多地方的養(yǎng)殖場(chǎng)暴發(fā)，給養(yǎng)殖場(chǎng)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。哺乳仔豬發(fā)生腹瀉后因其個(gè)體小，抗病率低 ，常導(dǎo)致豬場(chǎng)大面積的死亡 ，嚴(yán)重影響了仔豬的生產(chǎn)，給生豬生產(chǎn)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的一種急性、高接觸性腸道傳染病。臨診上以發(fā)熱、嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、脫水、排泄物腥臭為主要特征。豬輪狀病毒?。≧otavirus）是由輪狀病毒（PoRV）感染引起仔豬爆發(fā)性消化道功能性紊亂的一種急性腸道性傳染病。該病毒于1969年首先由Mebus在腹瀉的犢牛糞中分離出來(lái)。在我國(guó)，龐其方等于1979年首次從兒童腹瀉糞便中檢測(cè)出輪狀病毒 [5]。輪狀病毒感染主要發(fā)生在寒冷的晚秋、冬春以及早春季節(jié)。PoRV均可感染各種年齡和性別的豬只，但只有仔豬有發(fā)病癥狀，感染率和死亡率均有所提高，成年的豬只多呈隱形感染。豬圓環(huán)病毒感染（Porcine circovirus infection）是由豬圓環(huán)病毒（PCV）引起豬的一種新的傳染病（斷奶仔豬多系統(tǒng)衰弱綜合征）。1998年，Ellis等首次分離到該病的病原，引起了人們對(duì)該病毒的重視。圓環(huán)病毒可以從已經(jīng)感染的豬只的鼻液、糞便等廢物中排出病毒，感染的途徑為消化道、呼吸道，對(duì)已感染的懷孕母豬，PCV可以經(jīng)胎盤(pán)垂直傳染給腹中的仔豬。PCV的主要宿主是豬只，各種年齡段的均較易感，但仔豬感染后發(fā)病嚴(yán)重。胚胎期或生后早期感染的豬，往往在受到較為強(qiáng)烈的刺激后才會(huì)發(fā)病，本病還可導(dǎo)致豬群產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫抑制，從而導(dǎo)致繼發(fā)或并發(fā)感染[9]。

據(jù)資料調(diào)查顯示哺乳仔豬腹瀉發(fā)病率為54.83%，死亡率為16.27%。生豬的健康養(yǎng)殖對(duì)畜牧業(yè)的良性發(fā)展有著極其重要的作用。目前的調(diào)查數(shù)據(jù)表明，腹瀉已成為影響楚雄州部分豬場(chǎng)仔豬存活率的主要因素。因此，非常迫切需要查明引起腹瀉的各種可能因素，從而為有效防治提供可行依據(jù)。本研究通過(guò)PCR和RT-PCR方法檢測(cè)腹瀉癥狀的豬的糞便，從病毒性病原的角度對(duì)致哺乳仔豬腹瀉綜合征的病因進(jìn)行了初步的分析，為當(dāng)?shù)刎i場(chǎng)發(fā)生仔豬腹瀉綜合征的病因和臨床治療提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本來(lái)源 采集自楚雄州6個(gè)出現(xiàn)腹瀉癥狀的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)的仔豬糞便253份。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 Takara RNAiso Plus Total RNA、DNA快速提取試劑盒、RI?Enzyme?Mix、2×ES?Reaction?Mix、2×Trans?Taq?HiFiPCR?Super?Mix、異丙醇、75%乙醇、氯仿等均由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物傳染病實(shí)驗(yàn)室提供。

2.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備 PCR儀 [MJ Research，型號(hào)：PTC-150]、低溫冷凍離心機(jī)[Thermo Electron Corporation INC，型號(hào)：D-37520]、超凈工作臺(tái)[蘇州凈化設(shè)備有限公司產(chǎn)品，型號(hào)：SW-CJ-1FD]、高壓蒸汽消毒器[上海醫(yī)用核子儀器廠，型號(hào)：YH00L-71]等儀器均由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物傳染病實(shí)驗(yàn)室提供。

2. 結(jié)果與分析

本次實(shí)驗(yàn)共調(diào)查分析了楚雄州5個(gè)地區(qū)的6個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)，樣本量共253份。其中，共檢出131份豬圓環(huán)病毒2型，陽(yáng)性率為51.78%;此外，本次樣品采自楚雄州不同地區(qū)，具有一定的代表性，降低了因個(gè)別豬場(chǎng)陽(yáng)性率偏高所帶來(lái)的誤差。不同豬場(chǎng)致哺乳仔豬腹瀉病毒性病因統(tǒng)計(jì)結(jié)果及混合感染統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表;

3 結(jié)論與討論

隨著養(yǎng)豬業(yè)集約化的發(fā)展，利用有限的空間進(jìn)行高密度的飼養(yǎng)，給各種疾病，尤其是消化道及呼吸道疾病的感染創(chuàng)造了有利的條件。當(dāng)前世界各國(guó)因仔豬腹瀉造成的損失相當(dāng)巨大，嚴(yán)重的影響?zhàn)B豬行業(yè)的發(fā)展。腹瀉的病源很多，有相關(guān)的病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)等病原體，但依據(jù)多國(guó)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)資料表明哺乳期的仔豬腹瀉多數(shù)是由病毒所致[8-9]。

豬圓環(huán)病毒感染通常是一種慢性的感染過(guò)程，可以引起細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致機(jī)體免疫抑制，為其他病原的入侵提供了便利。這也是圓環(huán)病毒檢出率如此之高及仔豬腹瀉難以根除的重要原因?，F(xiàn)有腹瀉的活疫苗和滅活疫苗的臨床使用效果不佳。流行毒株發(fā)生較大的基因變異，在不同位點(diǎn)發(fā)生氨基酸的突變和缺失，是導(dǎo)致經(jīng)典的疫苗毒株臨床免疫保護(hù)率下降和病毒性腹瀉病因一直無(wú)法根除的重要原因。

本研究從病毒性病因的角度對(duì)致哺乳仔豬腹瀉綜合征的病因進(jìn)行了初步的分析，對(duì)發(fā)病豬場(chǎng)的病毒性病因進(jìn)行分析，為當(dāng)?shù)刎i場(chǎng)及散養(yǎng)戶發(fā)生仔豬腹瀉綜合征的病因和臨床治療提供一定的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1] 林初文，莊金秋，謝印乾，等. 我國(guó)主要豬病毒性腹瀉疾病的特點(diǎn)及其防治對(duì)策[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2007，34（5）：121-123

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