王金輝 徐勇軍 蘇玉萍 陳祖湘
廈門市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建廈門 361006
呼吸道感染是兒科最常見的疾病之一,其中病毒是引起兒童呼吸道疾病常見的病原體。呼吸道病毒主要包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADA)、流感A型病毒(FA)、流感B型病毒(FB)、副流感Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒(PIV1、2、3)[1]。兒童上呼吸道感染如果不及時(shí)治療,可發(fā)展為氣管炎、支氣管炎等下呼吸道感染,并伴有嚴(yán)重的并發(fā)癥[2]。不同的呼吸道病毒可以引起相似的臨床癥狀,但所引起的疾病和預(yù)后是不同的,因此呼吸道病毒感染初期應(yīng)得到廣泛重視[3]。病毒抗原侵入呼吸道上皮細(xì)胞后復(fù)制增殖,在疾病的早期通過(guò)抗原的檢測(cè)可以對(duì)呼吸道脫落上皮細(xì)胞進(jìn)行抗原檢測(cè),確定病毒種類,為臨床的早期診斷提供依據(jù)[4]。本研究就我院2019年3月至2020年2月呼吸道病毒感染病原構(gòu)成和流行病學(xué)進(jìn)行分析,現(xiàn)報(bào)道如下。
收集2019年3月至2020年2月來(lái)我院就診的呼吸道感染患兒的咽拭子標(biāo)本12 394例,其中男7365例(59.4%),女5029例(40.6%)。按年齡段數(shù)據(jù)分成以下組別:嬰兒組(0~<1歲)、幼兒組(1~<3歲)、學(xué)齡前組(3~<7歲)、學(xué)齡組(7~14歲)。
1.2.1 試劑與儀器 七項(xiàng)呼吸道病毒檢測(cè)試劑盒(D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screening &ID kit)購(gòu)自美國(guó)Diagnostic Hybrids公司;熒光顯微鏡(萊卡公司);渦旋振蕩器。
1.2.2 樣本采集和處理 采集患兒鼻咽分泌物,采集后放置于病毒采集管中。渦旋后吹打成黏液,2000 r離心5 min,加入2 ml磷酸鹽緩沖液洗滌,混合均勻后離心,棄上清,溶于0.5 ml PBS中,制成懸液。
1.2.3 直接免疫熒光法 分別吸取25 μl細(xì)胞懸液,滴入8孔板中,干燥后固定。按照試劑盒說(shuō)明書計(jì)入TITC標(biāo)記的熒光抗體,放置20 min后封片待檢。
1.2.4 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 使用熒光顯微鏡觀察,顯示綠色熒光為抗原陽(yáng)性細(xì)胞,紅色熒光為抗原陰性細(xì)胞。通常細(xì)胞內(nèi)熒光信號(hào)≥2個(gè)判斷為陽(yáng)性,否則為陰性。
使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示,采用χ2檢驗(yàn);P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
本實(shí)驗(yàn)共分析12 394例患兒的咽拭子,其中2161例陽(yáng)性標(biāo)本,標(biāo)本陽(yáng)性率為17.4%,包含2389次陽(yáng)性結(jié)果。單項(xiàng)病毒感染檢出1962例,混合病毒感染檢出199例,其中185例標(biāo)本檢出兩種病毒混合感染,14例標(biāo)本報(bào)告三種及以上病毒感染。RSV感染的比例最高,占44.87%;其次是ADA,占30.81%;其他五項(xiàng)感染的比例低。ADA和RSV組與其他組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。不同種類病毒檢出情況見表1。
表1 七項(xiàng)病毒感染陽(yáng)性率檢出情況
按照基本資料中的年齡段進(jìn)行分組,其中幼兒組RSV的檢出率最高,占80.41%;學(xué)齡前組ADA的檢出率最高,占39.27%;已檢出病毒陽(yáng)性患兒的年齡分布比例中,幼兒期檢出陽(yáng)性率最高(67.48%),與其他組別比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。七種病毒檢出的情況見表2。
表2 不同年齡段患兒呼吸道病毒感染檢出情況[n(%)]
2019年3月至2020年2月,6—8月ADA的比例最高,占總檢出率的64.97%,與其他組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而其他時(shí)間段感染均以RSV為主,尤其秋冬春季。不同季節(jié)病毒檢出的情況見表3。
表3 2019年3月至2020年2月病毒檢出情況[n(%)]
呼吸道感染是兒科最常見的疾病之一,病毒是引起兒童呼吸道感染最常見的病原體[5]。本研究回顧2019年3月至2020年2月我院患兒呼吸道病毒檢出的情況。這一期間的標(biāo)本病毒檢出率是17.4%,共有2389次陽(yáng)性結(jié)果。本研究中選擇使用直接熒光免疫抗原檢測(cè)方法,也是目前國(guó)內(nèi)外兒科病毒診斷的首選方法[6]。通過(guò)單克隆熒光抗體標(biāo)記呼吸道脫落細(xì)胞內(nèi)的病毒抗原相結(jié)合,其敏感性達(dá)到98%,特異性達(dá)到86%,是穩(wěn)定可靠的方法,符合臨床需求[7]。本研究中病毒陽(yáng)性率略低于國(guó)內(nèi)其他文獻(xiàn)的報(bào)道[8],這應(yīng)該與地域氣溫偏高有關(guān)系。廈門緯度低,同期氣溫高于大部分地區(qū),因此呼吸道病毒的發(fā)生率略低于國(guó)內(nèi)平均水平。
在2389例陽(yáng)性病毒感染例數(shù)中,RSV和ADA的檢出比例最高,占總陽(yáng)性數(shù)的45.16%和31.00%。在嬰幼兒時(shí)期,RSV的檢出比例均明顯高于其他種類病毒,這與國(guó)外的報(bào)道相一致[9]。RSV的感染率很高,大多數(shù)的幼兒至少經(jīng)歷過(guò)一次感染,這與嬰幼兒期呼吸道發(fā)育不完善和免疫功能低有關(guān)[10]。嬰兒期由于接觸外界機(jī)會(huì)少,隨著生長(zhǎng)發(fā)育至幼兒期,活動(dòng)范圍和接觸外界機(jī)會(huì)增多,但此時(shí)的免疫系統(tǒng)還不完善,因此幼兒期檢出病毒感染的比例最高。隨著年齡的增長(zhǎng),呼吸系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)都得到提高,各種病毒感染的比例也發(fā)生了變化[11-12]。
據(jù)本研究結(jié)果分析,呼吸道病原呈現(xiàn)隨季節(jié)變化的流行趨勢(shì)。秋冬季氣溫較低,冷熱變化交替,RSV發(fā)生率高,占75.14%;夏季ADA感染多見,占64.97%。RSV感染可表現(xiàn)為嚴(yán)重的肺部炎癥和介導(dǎo)氣道重構(gòu),因此,準(zhǔn)確識(shí)別感染病原的種類,有助于臨床醫(yī)生制訂正確的診斷和治療方案[13]。
兒童呼吸道病毒感染的臨床表現(xiàn)多樣,從輕微的、自限的上呼吸道感染到嚴(yán)重的甚至致死性的下呼吸道感染[14]。通過(guò)呼吸道病毒檢測(cè)可以及時(shí)有效地對(duì)病毒的種類及流行趨勢(shì)進(jìn)行監(jiān)測(cè),觀察病情,指導(dǎo)用藥,尤其對(duì)嬰幼兒急性呼吸道感染的治療提供依據(jù)。兒童呼吸道感染的流行季節(jié)性明顯,往往會(huì)在一段時(shí)間造成區(qū)域流行[15]。因此準(zhǔn)確識(shí)別感染源,制訂恰當(dāng)?shù)闹委煼桨负蛻?yīng)對(duì)突發(fā)的流行趨勢(shì),是兒科醫(yī)務(wù)工作者急需關(guān)注的實(shí)際問(wèn)題。
綜上所述,兒童呼吸道感染以呼吸道合胞病毒和腺病毒感染常見;掌握病毒感染的年齡特點(diǎn)和季節(jié)特點(diǎn)為臨床早期診斷、合理用藥及預(yù)防并發(fā)癥有重要意義。