6種殺菌劑對(duì)膠孢炭疽菌和長(zhǎng)柄鏈格孢菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

于秀敏，彭 飛，于淑玉，高笑鐸，王秀平*

(1 河北科技師范學(xué)院 a農(nóng)學(xué)與生物科技學(xué)院，b 河北省板栗產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，河北 秦皇島, 066000；2 河北明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司)

長(zhǎng)柄鏈格孢菌(Alternarialongipes)和膠孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.& H.Schrenk)是引起板栗內(nèi)腐病的主要致病菌[1～3]。苯醚甲環(huán)唑、咪鮮胺、唑醚戊唑醇、精甲噁霉靈、嘧霉異菌脲、異菌氟啶胺是目前農(nóng)業(yè)上常用的殺菌劑，具有高效、安全、低毒、較強(qiáng)廣譜性的特點(diǎn)，本試驗(yàn)選擇上述6種殺菌劑采用菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試病原菌 長(zhǎng)柄鏈格孢菌(Alternarialongipes)和膠孢炭疽菌(GlomerellacingulataSpauld.&H.Schrenk)購于北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司，并將病菌于馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)上培養(yǎng)，用于菌絲生長(zhǎng)速率測(cè)定試驗(yàn)。

1.1.2供試藥劑 供試6種殺菌劑，藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及試驗(yàn)質(zhì)量濃度(藥劑濃度均為有效成分含量)見表1。

表1 6種殺菌劑生產(chǎn)廠家及試驗(yàn)濃度

1.2 測(cè)定方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[4]進(jìn)行毒力測(cè)定。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，將藥品配制成試驗(yàn)?zāi)敢海凑障盗邢♂尩姆椒?，通過濃度初篩試驗(yàn)確定適宜的濃度比范圍(表 1)，并以此濃度加入到熔化好的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻后將其倒入9 cm直徑的一次性培養(yǎng)皿中，制成含系列濃度藥劑的 PDA平板(以加入等量無菌水的處理作為對(duì)照)。將活化好的供試菌株在無毒PDA培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d后，在菌落邊緣取直徑為1 cm的菌餅，接種于不同處理的含藥和空白平板中央，在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中光照培養(yǎng)6 d，每個(gè)處理5皿，3次重復(fù)。采用十字交叉法，測(cè)量菌落直徑做好記錄并計(jì)算抑菌率。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=[(對(duì)照菌落直徑-菌餅直徑)-(處理菌落直徑-菌餅直徑)]/(對(duì)照直徑-菌餅直徑)×100%

用DPSv 7.05和Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)算出有效抑制中濃度EC50值，以此值來表示供試殺菌劑對(duì)兩種病菌的抑制作用強(qiáng)弱。

2 結(jié)果與分析

2.1 6種殺菌劑對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響

6種殺菌劑對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌分別表現(xiàn)出不同的抑制作用，且抑制效果差異較大。其中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作用，EC50分別為0.963 5 mg·L-1和1.599 0 mg·L-1。且25%咪鮮胺的抑菌效果最佳，是最優(yōu)的農(nóng)藥制劑選擇。其他4種殺菌劑抑菌效果由高到低依次為30%唑醚·戊唑醇、40%嘧霉·異菌脲、10%苯醚甲環(huán)唑、32%精甲·惡霉靈(表2)。

表2 6種殺菌劑對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

2.2 6種殺菌劑對(duì)膠孢炭疽菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響

6種殺菌劑對(duì)膠孢炭疽菌菌絲生長(zhǎng)均有不同的抑制作用，6種殺菌劑中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對(duì)膠孢炭疽菌的抑制效果明顯，EC50分別為0.117 5 mg·L-1和0.511 5 mg·L-1，30%唑醚·戊唑醇懸浮劑的抑制作用也較明顯，EC50值為2.328 5 mg·L-1，32%精甲·惡霉靈水分散粒劑抑菌作用最差，它們的EC50值是95.936 8 mg·L-1，表3。

表3 6種殺菌劑對(duì)膠孢炭疽菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

3 結(jié)論與討論

本次試驗(yàn)應(yīng)用 6 種殺菌劑，分別測(cè)定了不同濃度的藥劑對(duì)長(zhǎng)柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌菌絲的抑制作用。從結(jié)果可以看出：6種殺菌劑中25%咪鮮胺和40%異菌·氟啶胺對(duì)兩種病菌的抑制效果最好，30%唑醚·戊唑醇和10%苯醚甲環(huán)唑效果較好，而32%精甲·惡霉靈和40%嘧霉·異菌脲對(duì)兩種病菌效果較差。

據(jù)報(bào)道，板栗內(nèi)腐病病菌從6月中旬栗花授粉期開始侵入板栗花柱和栗苞，8月中旬以后侵入的病菌數(shù)量逐漸增多，但在近成熟期病菌才侵入種仁[5]。因此，可在板栗授粉前(5月底～6月上旬)和授粉之后(6月下旬～7月上旬)，利用以上效果較好的4種殺菌劑進(jìn)行噴霧處理，并注意輪換交替使用，可做到有效的抑制引起板栗內(nèi)腐病的長(zhǎng)柄鏈格孢菌和膠孢炭疽菌的生長(zhǎng)，起到預(yù)防板栗內(nèi)腐病的發(fā)生及延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生。在6種藥劑中，咪鮮胺通常作為果品保鮮劑，在板栗儲(chǔ)存于運(yùn)輸過程中，還可將咪鮮胺用于板栗保鮮劑，用于板栗儲(chǔ)存期間內(nèi)腐病的防治。依據(jù)本次試驗(yàn)結(jié)果，下一步可開展田間藥效試驗(yàn)，為板栗生產(chǎn)篩選有效藥劑，預(yù)防板栗內(nèi)腐病的發(fā)生。