常染色體和X染色體遺傳標(biāo)記分析同父異母半同胞關(guān)系1例

劉巖，郝世誠(chéng)，張金佩，劉革新，袁麗

1.中國(guó)政法大學(xué) 證據(jù)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100088；2.司法文明協(xié)同創(chuàng)新中心，北京100088

1 案 例

1.1 簡(jiǎn)要案情

在一起遺產(chǎn)繼承糾紛案件中，趙1（女）、趙2（女）、陳某（男）、趙3（男）為全同胞的兄弟姐妹，父母已故，在案件辦理過(guò)程中查到邢某（女）可能為上述4 人同父異母的姐姐，故法院委托本中心對(duì)邢某與趙1、趙2、陳某、趙3 之間是否存在同父異母半同胞關(guān)系進(jìn)行鑒定。

1.2 檢驗(yàn)過(guò)程

采集5 人的血痕樣本，按照《法庭科學(xué)DNA 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)范》（GA/T 383—2014）中的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。采用GSTARTM25 試劑盒（北京金馬晟和科技有限公司）直接擴(kuò)增上述5 人的血樣DNA。使用Chelex-100法提取邢某、趙1、趙2 的樣本DNA，采用Goldeneye?DNA 身份鑒定系統(tǒng)17X［基點(diǎn)認(rèn)知技術(shù)（北京）有限公司］和MicroreaderTM19X ID System（北京閱微基因技術(shù)股份有限公司）擴(kuò)增模板DNA。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)3130基因分析儀（美國(guó)Applied Biosystems公司）檢測(cè)、Gene-MapperTMID-Xv1.4 軟件（美國(guó)Applied Biosystems 公司）分析，獲得各基因座的基因型。

1.3 家系重建及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

1.3.1 常染色體STR的檢驗(yàn)結(jié)果

使用GSTARTM25試劑盒檢測(cè)趙1、趙2、陳某、趙3和邢某的基因分型，并根據(jù)趙1 等4 人的基因分型推導(dǎo)出其父母的常染色體STR 分型組合，結(jié)果見(jiàn)表1。根據(jù)孟德?tīng)栠z傳定律，如果邢某與趙1 等系半同胞關(guān)系，在不發(fā)生遺傳突變的情況下，邢某的每一個(gè)常染色體STR 基因座上至少有1 個(gè)等位基因可以在上述4 人推導(dǎo)出的其父母完整等位基因中找到來(lái)源。經(jīng)比較，未發(fā)現(xiàn)可以排除邢某與趙1 等系同父異母半同胞關(guān)系的依據(jù)（表1）。采用ITO 法[1-2]計(jì)算邢某與趙1 等4 人之間的半同胞指數(shù)（half sibling index，HSI），邢某與趙1、趙2、陳某、趙3的HSI分別為5.7524、3 163.6、1 315.1、60.458，不排除邢某與趙1、趙2、陳某、趙3 之間存在半同胞關(guān)系。

表1 由趙1等4人推導(dǎo)出其父母常染色體STR分型組合以及與邢某的比較結(jié)果Tab.1 The parental autosomal STR typing combination deduced from Zhao 1 and others and compared with Xing

1.3.2 X染色體STR的檢驗(yàn)結(jié)果

使用Goldeneye?DNA 身份鑒定系統(tǒng)17X、MicroreaderTM19X ID System 檢測(cè)邢 某、趙1 和趙2 的X 染色體STR（X chromosome STR，X-STR）基因分型，并根據(jù)趙1 和趙2 的基因型推導(dǎo)出兩人生物學(xué)父親的X-STR 基因分型，結(jié)果見(jiàn)表2。在被檢測(cè)的每個(gè)XSTR 基因座上，邢某的分型結(jié)果與由趙1、趙2 推導(dǎo)的生物學(xué)父親的基因型表現(xiàn)為符合遺傳規(guī)律。按照《法醫(yī)物證鑒定X-STR 檢驗(yàn)規(guī)范》（SF/Z JD0105006—2018）中同父異母半同胞姐妹關(guān)系指數(shù)的計(jì)算方法，計(jì)算上述X-STR 基因座的似然率（likelihood ratio，LR）。X-STR 有4 個(gè)連鎖群，本例涉及的連鎖群有連鎖群1（DXS10135/DXS8378）、連鎖群2（DXS7132/DXS10079）和連鎖群4（DXS10134/DXS7423），在計(jì)算X-STR 的半同胞似然率時(shí)，連鎖群需采用連鎖基因座間的單倍型頻率進(jìn)行計(jì)算。結(jié)合趙1、趙2 和刑某的X-STR分型結(jié)果，按照DXS10135/DXS8378（19/10）、DXS7132/DXS10079（15/20）和DXS10134/DXS7423（38/14）的單倍型頻率分別計(jì)算趙1、趙2 與邢某之間的半同胞姐妹似然率。對(duì)所有基因座進(jìn)行綜合分析，邢某與趙1、趙2 的同父異母半同胞姐妹似然率分別為1.264 0×106、1.580 0×105，不排除邢某與趙1、趙2 之間存在半同胞關(guān)系。

表2 由趙1和趙2推導(dǎo)出其父親的X-STR等位基因分型以及與邢某的比較結(jié)果Tab.2 X-STR typing of the father deduced from Zhao 1 and Zhao 2 and compared with Xing

2 討論

半同胞關(guān)系鑒定通常是在父母一方或雙方缺失的情況下，由于認(rèn)親、移民及財(cái)產(chǎn)繼承等需要而進(jìn)行的復(fù)雜親緣關(guān)系鑒定，如果僅采用ITO 法計(jì)算兩個(gè)體之間的HSI，即使大量增加常染色體STR 基因座檢測(cè)數(shù)，有時(shí)也不能提高HSI[3-4]，從而無(wú)法給出明確意見(jiàn)。反之，如果詳細(xì)了解親屬情況，增加更多親屬參與鑒定，在聯(lián)合常染色體和X 染色體遺傳標(biāo)記分析的基礎(chǔ)上，某些情況下還是有較大機(jī)會(huì)給出明確意見(jiàn)的。

分析本例的家庭情況，雙方父母都已去世，不能參與鑒定，故要求趙1 等姐弟4 人參與鑒定，結(jié)合常染色體和X 染色體遺傳標(biāo)記利用家系重建法[5-7]、ITO 法和X-STR的半同胞姐妹似然率計(jì)算來(lái)完成委托任務(wù)。

通過(guò)分析趙1 等姐弟4 人的常染色體STR 分型結(jié)果，可以獲得其父母的等位基因，如果邢某與趙1 等系半同胞關(guān)系，則在不發(fā)生遺傳突變的情況下，邢某在每一個(gè)常染色體STR 基因座上至少有1 個(gè)等位基因可以在推導(dǎo)出的父母完整等位基因中找到來(lái)源，否則可以提供排除的依據(jù)。

X 染色體的遺傳特征是，女兒的X 染色體中，一條來(lái)自其生物學(xué)父親，一條來(lái)自其生物學(xué)母親，如果遺傳過(guò)程中不發(fā)生基因突變，則在每一個(gè)X-STR 基因座上，同父異母半同胞的姐妹之間會(huì)表現(xiàn)為至少有1 個(gè)相同的等位基因。根據(jù)趙1 和趙2 的X-STR 分型結(jié)果，推導(dǎo)出其生物學(xué)父親的X-STR 分型，與邢某進(jìn)行比較，未發(fā)現(xiàn)排除父女關(guān)系的依據(jù)。

X-STR 有4 個(gè)連鎖群，本例檢驗(yàn)涉及的連鎖群有連鎖群1（DXS10135/DXS8378）、連鎖群2（DXS7132/DXS10079）和連鎖群4（DXS10134/DXS7423），在計(jì)算X-STR 的半同胞似然率時(shí)，連鎖群需采用連鎖基因座間的單倍型頻率進(jìn)行計(jì)算。

綜上所述，在半同胞關(guān)系鑒定中，應(yīng)讓盡量多的相關(guān)人員參與鑒定，采用多類型的遺傳標(biāo)記進(jìn)行檢驗(yàn)，通過(guò)家系重建的方法，提供有效的認(rèn)定或排除信息，如果未發(fā)現(xiàn)排除信息，可結(jié)合常染色體和X-STR基因座檢驗(yàn)結(jié)果，根據(jù)ITO 法和《法醫(yī)物證鑒定XSTR 檢驗(yàn)規(guī)范》（SF/Z JD0105006—2018）技術(shù)規(guī)范計(jì)算似然率，并出具鑒定意見(jiàn)。