餌料強化劑對牙鲆苗種繁育期存活及生長的影響

趙春暖 任利群 于濤 蔡忠強 鄭言鑫 王喜文 陳洋

摘要 以裂壺藻為餌料強化劑，設(shè)置不同的裂壺藻強化劑使用量及強化時間，研究其對繁育期牙鲆苗種生長發(fā)育的影響。結(jié)果表明，輪蟲強化密度為450個/mL，鹵幼強化密度為150個/mL。當(dāng)輪蟲強化劑使用量為0.09 g/L，強化時間12 h，鹵幼餌料強化劑使用量為0.10 g/L、強化時間20 h時，牙鲆苗種的發(fā)育、馴化情況最好，存活率最高，生長速度最快。通過對強化持續(xù)期的對比發(fā)現(xiàn)，強化餌料投喂20 d時牙鲆苗種變態(tài)存活率趨于穩(wěn)定，無白化、病害發(fā)生，個體生長均勻、生長速度快。

關(guān)鍵詞 牙鲆;輪蟲;鹵蟲;強化劑使用量

中圖分類號 S961文獻標(biāo)識碼 A

文章編號 0517-6611（2021）10-0089-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.10.024

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Effects of Diet Enhancer on the Survival and Growth of Paralichthys olivaceus Seedlings during the Breeding Period

ZHAO Chun-nuan，REN Li-qun，YU Tao et al （Changdao Multiplication Experimental Station，Chinese Academy of Fishery Sciences，Yantai，Shandong 265800）

Abstract Taking Schizochytrium sp. as bait enhancer，different enhancer dose and intensification time were set up to study their effects on the growth of Paralichthys olivaceus seedlings during the breeding period.The enhanced density of rotifer was 450 ind./mL，and the density of artemia was 150 ind./mL.When the enhanced dose of rotifer was 0.09 g/L，the intensification time was 12 h，the enhanced dose of artemia was 0.10 g/L，the intensification time was 20 h，the development and domestication of P.olivaceus seedlings were the best，the survival rate was the highest，and the growth rate was the fastest.Through the comparison of the strengthening duration，it was found that the metamorphic survival rate of P.olivaceus seedlings tended to be stable after P.olivaceus seedlings were fed with the bait enhancer 20 days，no albinism or disease occurred，the individual grew evenly and the growth rate was fast.

Key words Paralichthys olivaceus;Rotifers;Artemia;Enhanced dose

在牙鲆苗種繁育過程中，餌料強化劑發(fā)揮著重要作用，影響牙鲆苗種的正常發(fā)育，是餌料馴化過程中必不可少的重要材料。筆者立足牙鲆海水魚類的餌料營養(yǎng)強化，開展牙鲆繁育各個階段的開口餌料營養(yǎng)強化劑使用量、營養(yǎng)強化持續(xù)期研究，以期為海水魚類繁育工作提供有效參考，豐富牙鲆健康繁育技術(shù)，提高牙鲆存活率、生長速度，有效增強增殖放流海水魚苗種的放流品質(zhì)和放流成效。研究表明，投喂未經(jīng)營養(yǎng)強化的輪蟲、鹵蟲無節(jié)幼體不利于苗種的成活、生長以及抗病、抗逆能力[1-3]。雷霽霖院士是工廠化育苗與養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化的主要奠基人和學(xué)科帶頭人。研究發(fā)現(xiàn)，海水仔稚魚對脂類營養(yǎng)具有一定的需求[4]。裂壺藻粉是由裂殖壺菌的紫外誘變菌株經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、干燥發(fā)酵液得到的藻粉。大量研究表明，二十二碳六烯酸（DHA）對動物機體的很多功能都具有促進作用[5-8]。用裂殖壺藻粉作為輪蟲和鹵蟲的營養(yǎng)強化劑，提高輪蟲和鹵蟲體內(nèi)的DHA含量，再利用輪蟲、鹵蟲到幼魚的食物鏈提高幼魚的DHA含量，從而提高幼魚的成活率和抗病害能力，能有效防止 “白化病”，可確保魚苗等的存活率和抗應(yīng)激能力。 近年來，國內(nèi)外報道主要集中在強化輪蟲、鹵蟲二十碳五烯酸（EPA）、DHA的含量及配比研究[9-10]。開口餌料強化劑中含有高度

不飽和脂肪酸，而海水魚類所必需的脂肪酸對其生長發(fā)育具有重要的影響[11-18]。裂壺藻不僅多不飽和脂肪酸含量高，而且作為海洋微藻，其干粉制品實用、無污染，與魚油及其他營養(yǎng)強化劑相比更易于被餌料生物吸收利用[19]。其中，高度不飽和脂肪酸的數(shù)量及種類直接影響魚類的存活率、生長速度等[20-21]。為探究裂壺藻強化餌料生物時間及其培育期間強化時間對牙鲆苗種存活、生長發(fā)育、變態(tài)體色及抗病、抗逆能力的影響，筆者開展了牙鲆的車間苗種繁育試驗，以期在正常生產(chǎn)培育、降本增效的基礎(chǔ)上，獲得不同餌料的最佳裂壺藻強化劑使用量以及最適宜的餌料生物強化持續(xù)期，研究在適宜條件下牙鲆苗種的生長情況。

1 材料與方法

1.1 親本采集 試驗所選親本為全雌牙鲆種魚，經(jīng)控溫調(diào)光自然采卵，優(yōu)質(zhì)牙鲆卵選自中國水產(chǎn)科學(xué)研究院北戴河增殖實驗站。

1.2 育苗前期準(zhǔn)備 清洗、消毒育苗池晾曬待用，每池布設(shè)氣石8個，均勻分布，頂層圍繞育苗池布設(shè)電線（掛燈調(diào)光），車間透明玻璃安裝防曬窗簾，避免強光照射車間邊緣育苗池致魚死亡，制作吸底裝備，清除底池污物;合理安放餌料孵化桶，用于后期輪蟲、鹵蟲無節(jié)幼體的培養(yǎng)、孵化及營養(yǎng)強化，同時準(zhǔn)備20、40、60、80目網(wǎng)箱用于日常換水;制作120、200目網(wǎng)袋用于富集輪蟲、鹵蟲無節(jié)幼體，鹵蟲孵化桶上方布設(shè)燈泡及加熱棒，以便于鹵蟲的孵化和營養(yǎng)強化，同時做好育苗工作的其他前期準(zhǔn)備，檢查水電設(shè)備是否正常運轉(zhuǎn)。

1.3 日常管理 牙鲆卵入池孵化，育苗池水起始溫度18 ℃，每天控制升溫0.5～1.0 ℃，逐漸升溫至20 ℃。仔魚變態(tài)伏底前期，育苗池每天吸底除污，用網(wǎng)箱水管虹吸換水（圖1）。網(wǎng)目隨魚體生長逐漸更換（試用不漏魚苗后使用），日換水量逐漸加大，保持育苗池水質(zhì)良好;調(diào)節(jié)氣石，保證育苗池的溶氧量，隨魚體生長逐漸加大充氣量。

育苗期間仔細(xì)觀察魚體的生長情況，監(jiān)測育苗池餌料密度，控制輪蟲、鹵蟲無節(jié)幼體及后期配合飼料的投喂密度，及時補充育苗池餌料，根據(jù)實際情況調(diào)節(jié)投喂量，育苗池潑灑一定量的小球藻。試驗期間，冰凍鹵蟲卵孵化后，采用80目+120目網(wǎng)袋收集鹵蟲無節(jié)幼體（圖1），將孵化不良或未孵化的鹵蟲殼過濾在外。

1.4 試驗方法

1.4.1 輪蟲強化劑使用量試驗。輪蟲經(jīng)運輸至培育池，潑灑小球藻投喂暫養(yǎng)，用裂壺藻粉作為營養(yǎng)強化劑，經(jīng)富集待強化的輪蟲密度控制在450個/mL，設(shè)計5種裂壺藻強化劑使用量，分別為0.05、0.07、0.09、0.11、0.13 g/L，在牙鲆卵入池孵化2 d左右，待牙鲆卵開口攝食餌料時，通過投喂5種不同強化劑使用量的輪蟲，培育投喂9 d后攝食投喂鹵蟲無節(jié)幼體前，比較各組牙鲆苗種攝食輪蟲后的存活率及生長情況，探索強化輪蟲的裂壺藻適宜強化劑使用量。試驗后，選擇此使用量投喂新一批牙鲆卵，進行后期試驗。

1.4.2 鹵蟲無節(jié)幼體強化劑使用量試驗。選擇冰凍鹵蟲卵進行試驗，冷庫取冰凍卵解凍，經(jīng)淡水浸泡1 h，倒入孵化桶孵化，調(diào)溫30 ℃，開燈孵化24 h后，遮陽收集鹵蟲無節(jié)幼體，設(shè)計5個不同強化劑使用量試驗組，裂壺藻強化劑使用量分別為0.08、0.09、0.10、0.11、0.12 g/L，待牙鲆苗種攝食輪蟲9 d后，投喂5組強化鹵蟲無節(jié)幼體10 d，比較不同強化劑使用量下牙鲆苗種攝食鹵蟲無節(jié)幼體的存活率及生長情況，探索強化鹵蟲無節(jié)幼體的最佳裂壺藻粉使用量，選擇最佳強化劑使用量下的牙鲆苗種繼續(xù)下一步的車間培育。

1.4.3 鹵蟲無節(jié)幼體強化持續(xù)期試驗。

輪蟲、鹵蟲已被廣泛用作海水魚類的開口餌料，但其缺乏不飽和脂肪酸，因此在投喂牙鲆苗種攝食前需要進行餌料強化。該試驗采用優(yōu)質(zhì)裂壺藻粉作為餌料強化劑，設(shè)計不同強化持續(xù)期（持續(xù)期內(nèi)完成餌料馴化），分別為14、16、18、20、22 d，定期記錄數(shù)據(jù)，待孵化40 d后比較不同強化持續(xù)期的牙鲆苗種生長情況，探索最佳的鹵蟲強化持續(xù)期。

2 結(jié)果與分析

2.1 輪蟲強化劑使用量對牙鲆苗種存活及生長的影響 孵化后投喂強化輪蟲9 d后，不同強化劑使用量培育下牙鲆苗種存活及生長情況如表1所示。由表1可知，當(dāng)強化輪蟲的裂壺藻強化劑使用量為0.05 g/L時，牙鲆苗種的存活率為73.82%，平均體長為7.95 mm。當(dāng)強化劑使用量為0.09 g/L時，牙鲆苗種的存活率最高（76.25%），體長也最大（8.16 mm）。

2.2 鹵蟲無節(jié)幼體強化劑使用量對牙鲆苗種存活及生長的影響 孵化投喂0.09 g/L強化輪蟲9 d后開始投喂強化鹵蟲，孵化25 d后不同強化劑使用量下牙鲆苗種的存活及生長情況如表2所示。由表2可知，牙鲆苗種存活率、體長均隨著鹵蟲無節(jié)幼體強化劑使用量的升高而增加，當(dāng)強化劑使用量為0.10 g/L時，牙鲆苗種存活率和體長均達到最大值，存活率達55.33%，體長達12.13 cm。隨著強化劑使用量的增加，牙鲆苗種存活率及體長呈現(xiàn)先增加后趨于穩(wěn)定的變化趨勢。

2.3 鹵蟲無節(jié)幼體強化持續(xù)期分析

牙鲆苗種入池孵化2 d后逐漸開口攝食，用0.09 g/L的強化輪蟲投喂9 d后，投喂0.10 g/L 強化鹵蟲無節(jié)幼體，不同強化培育時間下孵化40 d后苗種的生長情況見表3。

由表3可知，不同鹵蟲強化持續(xù)期牙鲆苗種生長指標(biāo)表現(xiàn)出一定的差異。鹵蟲強化劑使用持續(xù)20 d 時，存活率為43.51%，變態(tài)率為84.82%，平均體長達15.53 mm，無白化發(fā)生。由此可見，鹵蟲強化劑的最佳持續(xù)期為20 d。

2.4 適宜條件下牙鲆苗種的生長情況

孵化30 d后牙鲆仔稚魚餌料馴化完成，前期輪蟲強化劑使用量為0.05 g/L，強化9 d后投喂強化劑使用量0.1 g/L的鹵蟲無節(jié)幼體，強化培育20 d，后期馴化用配合飼料正常投喂。

經(jīng)過75 d的車間培育，牙鲆苗種無白化及其他病害發(fā)生，生長良好，平均體長達到5.15 cm，平均體重達到2.05 g/尾，共出池牙鲆苗種90余萬尾。孵化2 d時牙鲆體長在1 mm 以下;孵化11 d時，牙鲆體長為7～9 mm;孵化40 d時，牙鲆體長為15～16 mm;孵化75 d時，牙鲆體長為75～80 mm。

3 討論

3.1 各時期餌料的最適強化劑使用量

牙鲆苗種繁育過程中，破卵孵化后開口餌料為輪蟲，隨著苗種的生長，魚體口裂增大，能夠攝食鹵蟲無節(jié)幼體時，適時開始冰凍鹵蟲的孵化和投喂，輪蟲、鹵蟲攝食前的強化對于苗種繁育工作至關(guān)重要。該研究表明投喂輪蟲期輪蟲的強化劑（該試驗使用裂壺藻）使用量為0.09 g/L時，牙鲆苗種的存活率和體長均達到最大值，當(dāng)強化劑使用量達到0.09 g/L后，牙鲆苗種生長指標(biāo)趨于穩(wěn)定。當(dāng)鹵蟲無節(jié)幼體強化劑使用量為0.10 g/L時，牙鲆苗種表現(xiàn)出最佳成活率和體長，后期持續(xù)加大使用量對牙鲆苗種生長指標(biāo)沒有明顯影響。該試驗結(jié)果表明，當(dāng)強化輪蟲密度為450個/mL、強化鹵蟲密度為150個/mL時，輪蟲強化劑使用量0.09 g/L，鹵蟲強化劑使用量0.10 g/L，即可在節(jié)約成本的基礎(chǔ)上，獲得良好的牙鲆苗種生長。

3.2 餌料馴化前強化持續(xù)期比較

牙鲆苗種繁育需經(jīng)過輪蟲、鹵蟲到配合飼料的轉(zhuǎn)化，投喂不同強化持續(xù)期的鹵蟲對于牙鲆苗種馴化、后期生長及白化的出現(xiàn)具有重要影響。該試驗在餌料馴化完成前，進行了鹵蟲營養(yǎng)強化持續(xù)期研究，結(jié)果表明在鹵蟲強化14～22 d，牙鲆苗種的存活率、變態(tài)率、體長及白化現(xiàn)象均有不同，在持續(xù)投喂強化鹵蟲20 d即餌料馴化，經(jīng)孵化40 d后牙鲆苗種白化現(xiàn)象得到顯著遏制，而在持續(xù)投喂鹵蟲22 d試驗組牙鲆苗種各項生長指標(biāo)沒有顯著變化。由此可見，鹵蟲強化持續(xù)期達到20 d即可有效防止牙鲆白化，同時能夠獲得良好的苗種存活率、變態(tài)率及體長等生長指標(biāo)。

49卷10期趙春暖等 餌料強化劑對牙鲆苗種繁育期存活及生長的影響

3.3 牙鲆苗種白化的誘因及裂壺藻粉育苗實效

該試驗采用裂壺藻粉作為強化輪蟲、鹵蟲的營養(yǎng)強化劑，其營養(yǎng)全面且對水質(zhì)無污染，能夠較好地保持育苗池干凈的水環(huán)境。該試驗在不同育苗條件下牙鲆出現(xiàn)一部分白化，究其原因，應(yīng)該是前期鹵蟲強化持續(xù)期對牙鲆后期生長產(chǎn)生了一定的影響，輪蟲、鹵蟲強化劑使用量也可能導(dǎo)致后期牙鲆白化現(xiàn)象的發(fā)生，而苗種繁育過程中溫度、光照、鹽度等可能對牙鲆白化苗種的發(fā)生也具有一定的影響。在整個牙鲆苗種繁育過程中，裂壺藻粉作為輪蟲、鹵蟲營養(yǎng)強化劑，表現(xiàn)出良好的實用價值，對于苗種的存活、生長等各項生理指標(biāo)都表現(xiàn)出較好的促進作用。裂壺藻粉是一種牙鲆苗種繁育的優(yōu)良營養(yǎng)強化劑，具有十分突出的實用性，效果顯著。

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