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    堿法提取刺梨果渣可溶性膳食纖維工藝研究

    2021-06-11 01:29:00王麗張想李全力李立郎王瑜葛麗娟楊娟楊小生
    中國(guó)調(diào)味品 2021年6期
    關(guān)鍵詞:梨果堿液可溶性

    王麗,張想,李全力,李立郎,王瑜,葛麗娟,楊娟,楊小生*

    (1.貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴陽 550014;2.貴州大學(xué) 釀酒與食品工程學(xué)院,貴陽 550025;3.桐梓縣官倉鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,貴州 遵義 563200)

    膳食纖維(dietary fiber,DF)被稱為“第七營(yíng)養(yǎng)素”[1],是一種不能被人體消化吸收的碳水化合物,被分為可溶性膳食纖維(soluble dieary fiber,SDF)和不溶性膳食纖維(insoluble dietary fiber, IDF)兩大類[2],其中水溶性膳食纖維具有降低人體膽固醇水平、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化等生理功效,被廣泛應(yīng)用于烘焙食品、飲料、湯料、調(diào)味品及果凍制品的生產(chǎn)中[3]。

    刺梨(RosaroxburghiiTratt.)又名茨梨、木梨子,為薔薇科多年生落葉叢生灌木繅絲花的果實(shí)[4]。刺梨果渣作為刺梨果生產(chǎn)加工所得的副產(chǎn)物,是一種很好的再利用原料,果渣中富含VC、粗蛋白、纖維素、黃酮等活性物質(zhì)[5],是優(yōu)質(zhì)膳食纖維的良好來源。高膳食纖維產(chǎn)品是指SDF含量占比高于10%的產(chǎn)品,而刺梨果渣中SDF含量一般在2%左右,無法達(dá)到膳食平衡[6]。因此,需要對(duì)膳食纖維進(jìn)行提取處理,提高SDF含量,目前應(yīng)用于膳食纖維提取的方法主要有物理法、化學(xué)法和生物法3種[7]?;瘜W(xué)法因提取工藝簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)多應(yīng)用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)[8]。

    本試驗(yàn)以刺梨果渣為原料,利用前期篩選出來的平菇作為發(fā)酵菌種,針對(duì)發(fā)酵后刺梨果渣進(jìn)行二次提取,利用堿液提取,控制氫氧化鈉濃度、溫度、時(shí)間和料液比4個(gè)因素,使連接膳食纖維的大分子物質(zhì)糖苷鍵斷裂,形成新的還原末端,致使部分IDF向SDF轉(zhuǎn)變[9],提高SDF含量和生理活性。通過單因素試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化提取刺梨果渣中SDF的最佳工藝條件,為刺梨果渣后續(xù)深加工和高效開發(fā)利用提供了參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    試驗(yàn)原料為經(jīng)食用菌平菇發(fā)酵后的刺梨果渣(貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供);花生油:市售;鹽酸、氫氧化鈉、硫酸、無水乙醇、醛等試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FA2004N 分析天平 上海菁海儀器有限公司;101-2A 烘箱 天津市泰斯特儀器有限公司;BZF-50 真空干燥箱 常州諾基儀器有限公司;LDZV-75KBS 不銹鋼壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠;SW-CJ-2F 雙人雙面凈化工作臺(tái) 蘇州凈化設(shè)備有限公司。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 工藝流程

    經(jīng)發(fā)酵后的刺梨果渣滅菌、烘干、去籽、粉碎、過篩(60目),準(zhǔn)確稱取1.0 g果渣加入一定濃度的氫氧化鈉溶液為提取試劑,在一定的溫度和料液比條件下提取一定時(shí)間后過濾,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至4.5以去除可溶性多糖等雜質(zhì)后抽濾。濾渣水洗至中性,烘干(60 ℃)至恒重,得到堿處理后刺梨果渣不溶性膳食纖維(IDF);調(diào)節(jié)濾液pH至中性,濾液使用真空旋蒸(60 ℃,真空度為0.08 MPa)濃縮至原體積的1/5左右,醇沉(4倍體積95%乙醇溶液)過夜,6000 r/min離心20 min后棄掉上清液,沉淀烘干(60 ℃)至恒重,即提取后刺梨果渣可溶性膳食纖維(SDF)。

    1.3.2 單因素試驗(yàn)

    1.3.2.1 料液比對(duì)提取效果的影響

    選取料液比分別為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40,堿液濃度為10 g/mL,反應(yīng)溫度為60 ℃,處理時(shí)間為70 min,以可溶性膳食纖維得率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察堿液質(zhì)量濃度處理發(fā)酵刺梨果渣后對(duì)SDF得率的影響,每個(gè)水平重復(fù)試驗(yàn)3次。

    1.3.2.2 堿液濃度對(duì)提取效果的影響

    選取堿液濃度分別為6,8,10,12,14 g/L,料液比為1∶30,反應(yīng)溫度為60 ℃,處理時(shí)間為70 min,以可溶性膳食纖維得率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察堿液質(zhì)量濃度處理發(fā)酵刺梨果渣后對(duì)SDF得率的影響,每個(gè)水平重復(fù)試驗(yàn)3次。

    1.3.2.3 反應(yīng)溫度對(duì)提取效果的影響

    選取反應(yīng)溫度分別為50,60,70,80,90 ℃,料液比為1∶30,堿液濃度為10 g/L,處理時(shí)間為70 min,以可溶性膳食纖維得率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察反應(yīng)溫度發(fā)酵刺梨果渣后對(duì)SDF得率的影響,每個(gè)水平重復(fù)試驗(yàn)3次。

    1.3.2.4 處理時(shí)間對(duì)提取效果的影響

    選取處理時(shí)間分別為50,60,70,80,90 min,料液比為1∶30,堿液濃度為10 g/L,反應(yīng)溫度為60 ℃,以可溶性膳食纖維得率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察處理時(shí)間發(fā)酵刺梨果渣后對(duì)SDF得率的影響,每個(gè)水平重復(fù)試驗(yàn)3次。

    1.3.3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以料液比、堿液濃度、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間為4個(gè)因素,采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn),因素水平表見表1。

    表1 正交試驗(yàn)因素與水平

    1.3.4 SDF得率的計(jì)算

    SDF 得率/%= 刺梨果渣 SDF干重(g)/刺梨果渣干重(g)×100。

    1.3.5 刺梨果渣膳食纖維膨脹率(SC)、持水性(WHC)、持油性(OHC)測(cè)定[10-11]

    稱取1.000 g(m1)膳食纖維置于20 mL量筒中記錄體積(V1),加入10.00 mL蒸餾水使樣品完全浸潤(rùn),24 h后記錄膳食纖維膨脹增長(zhǎng)后的體積(V2)。

    將水合后膳食纖維轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi),于10000 r/min 轉(zhuǎn)速下離心20 min,移去上清液后稱量含果渣質(zhì)量,記為m2。將以上步驟中蒸餾水換為食用油即可計(jì)算持油性。刺梨果渣各項(xiàng)功能指標(biāo)計(jì)算公式如下:

    膨脹力/(mL/g)=(V2-V1)/m1。

    持水性/持油性/(g/g)=(m2-m1)/m1。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)以X±SD表示,應(yīng)用SPSS 21.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析,p<0.05 或p<0.01 為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,采用Origin 9.0軟件作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)

    2.1.1 料液比對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響

    在氫氧化鈉濃度為10 g/L,反應(yīng)溫度為60 ℃,處理時(shí)間為70 min固定的條件下,料液比分別為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40 (g/mL)時(shí)SDF得率的變化趨勢(shì)見圖1。

    圖1 料液比對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響的影響

    由圖1可知,隨著料液比的比例逐漸增大,SDF得率先增大后減小,SDF得率在料液比為1∶30時(shí)達(dá)到最大值16.85%。原因可能是當(dāng)料液比較高時(shí)物料黏度大,導(dǎo)致過濾困難,增加了殘留物質(zhì)量且增加了能耗;當(dāng)料液比較低時(shí)果渣得不到充分反應(yīng),不利于膳食纖維的溶出。因此,選用料液比為1∶30時(shí)最為合適,選擇1∶25、1∶30、1∶35為正交試驗(yàn)水平。

    2.1.2 氫氧化鈉濃度對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響

    選取不同的氫氧化鈉濃度6,8,10,12,14 g/L,固定料液比為1∶30 (g/mL)、反應(yīng)溫度為60 ℃、處理時(shí)間為70 min,考察堿液質(zhì)量濃度處理刺梨果渣后對(duì)SDF得率的影響,結(jié)果見圖2。

    圖2 氫氧化鈉濃度對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響的影響

    由圖2可知,隨著堿液濃度的增加,SDF得率呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。當(dāng)堿液濃度為6~10 g/L時(shí),反應(yīng)程度不是很劇烈,致使膳食纖維的提取反應(yīng)較緩慢;當(dāng)堿液濃度達(dá)到10 g/L時(shí)SDF得率為峰值;隨著堿液濃度繼續(xù)升高,反應(yīng)發(fā)生劇烈,強(qiáng)堿條件會(huì)破壞膳食纖維結(jié)構(gòu)[12],導(dǎo)致SDF得率降低。因此堿液濃度在10 g/L時(shí)是提取刺梨果渣的最佳條件,綜合考慮,選擇8,10,12 g/L為正交試驗(yàn)水平。

    2.1.3 提取溫度對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響

    在堿液濃度為10 g/L,料液比為1∶30 (g/mL),處理時(shí)間為70 min固定的條件下,反應(yīng)溫度分別為40,50,60,70,80 ℃時(shí)SDF得率的變化趨勢(shì)。由圖3可知,隨著反應(yīng)溫度的升高,分子熱運(yùn)動(dòng)可以加速膳食纖維分子的溶出[13],刺梨果渣SDF得率緩慢增加,在60 ℃時(shí)SDF得率達(dá)到最大值,當(dāng)繼續(xù)升高溫度時(shí),其得率反而下降,推測(cè)可能為SDF分子的耐熱性能比較差,提取溫度過高使得部分被降解損失,故SDF得率降低,因此最適提取溫度不宜超過60 ℃,選擇反應(yīng)溫度分別為50,60,70 ℃作為正交試驗(yàn)水平。

    圖3 提取溫度對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響的影響

    2.1.4 提取時(shí)間對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響

    選取不同的處理時(shí)間分別為50,60,70,80,90 min,固定料液比為1∶30,反應(yīng)溫度為60 ℃,堿液濃度為10 g/L,考察不同的處理時(shí)間對(duì)刺梨果渣SDF得率影響,結(jié)果見圖4。

    圖4 提取時(shí)間對(duì)刺梨果渣SDF得率的影響的影響

    由圖4可知,在設(shè)置的反應(yīng)時(shí)間范圍內(nèi),刺梨果渣SDF得率隨著反應(yīng)溫度的增加呈現(xiàn)逐步提高又逐漸下降的趨勢(shì),在70 ℃時(shí)SDF得率達(dá)到最大值。造成這一現(xiàn)象可能是因?yàn)榻輹r(shí)間過長(zhǎng),膳食纖維發(fā)生水解使得醇沉不完全,得率降低[14]。所以最佳處理時(shí)間為70 min,選取60,70,80 min作為正交試驗(yàn)水平。

    2.2 正交試驗(yàn)

    影響化學(xué)法提取刺梨果渣可溶性膳食纖維效果的主要因素是pH、料液比、反應(yīng)時(shí)間與溫度等。因此,本試驗(yàn)由單因素試驗(yàn)確定選擇范圍,確定各因素水平條件,以提取處理后可溶性膳食纖維的得率為考察指標(biāo),選擇各因素3個(gè)較優(yōu)水平條件設(shè)計(jì)正交優(yōu)化試驗(yàn),具體設(shè)計(jì)見表1,以此得出最佳提取工藝條件。試驗(yàn)結(jié)果及直觀分析見表2。

    表2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析表

    由表2極差分析可知,影響刺梨果渣可溶性膳食纖維得率的主次順序?yàn)?B堿液濃度>C反應(yīng)溫度>A料液比>D處理時(shí)間;并得出制備刺梨果渣可溶性膳食纖維的最適工藝條件為A1B2C2D2,即料液比為1∶25,氫氧化鈉濃度為10 g/L,提取溫度為70 ℃,提取時(shí)間為70 min。

    2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

    根據(jù)正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)工藝條件進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),刺梨果渣可溶性膳食纖維的平均得率可達(dá)到17.36%±0.74%,可溶性膳食纖維產(chǎn)品呈光亮黃褐色,無特殊異味。

    2.4 刺梨果渣可溶性膳食纖維的膨脹力、持水力和持油力

    膳食纖維的膨脹力、持水力和持油力是衡量其保健功能的重要參考指標(biāo)[15],膳食纖維的持水力高,則進(jìn)食后其排出物體積大、質(zhì)地軟,有利于防止便秘和結(jié)腸癌的發(fā)生[16]。

    由表3可知,刺梨果渣可溶性膳食纖維的持水力高于果渣組(p<0.05),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    表3 刺梨果渣處理前后特性分析

    3 結(jié)果與討論

    在本研究中,以單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得到堿法化學(xué)提取刺梨果渣可溶性膳食纖維的最優(yōu)工藝條件為:料液比1∶25 (g/L)、氫氧化鈉濃度10 g/L、提取溫度70 ℃、提取時(shí)間70 min。該條件下可溶性膳食纖維得率為可達(dá)到17.36%±0.74%,膨脹力為(10.58±0.46) mL/g,持水力為(12.32±0.41) g/g,持油力為(4.18±0.24) g/g。膳食纖維在食品、飲料、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑以及生物醫(yī)學(xué)方面具有潛在的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值。膳食纖維在保健食品和食品添加劑等方面得到了廣泛的應(yīng)用和認(rèn)可。同時(shí)刺梨果渣也是一種經(jīng)濟(jì)、來源方便的食品原料, 該提取方法操作簡(jiǎn)單、成本較低,為刺梨果渣的綜合利用提供了新的途徑,對(duì)其開發(fā)和綜合利用提供了理論參考。

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