王文寶,楊俊濤,毛訊,段少峰
1. 漯河醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校(漯河 462000);2. 河南大學(xué)藥學(xué)院(開封 475000)
猴頭菇是一種名貴的藥食兩用食用菌,含多糖、氨基酸和無機(jī)元素等多種生物活性物質(zhì)。猴頭菇多糖為猴頭菇的最主要活性成分,具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖血脂和肝臟保護(hù)等多種生理活性和健康作用[1-2]。口服泡騰片是一種新型固體制劑,用少量水使其發(fā)生酸堿反應(yīng),溶解形成溶液后口服,加入矯味劑和著色劑的泡騰片,無論色澤還是口感均易于被接受[3]。試驗(yàn)以猴頭菇水提取物為研究對象,以泡騰片劑型作為載體,旨在開發(fā)一種具有保健功能的猴頭菇水提取物口服泡騰片,為具有廣闊的發(fā)展前景與市場價(jià)值的同類產(chǎn)品提供參考。
Sartorius電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);DZF-6020真空干燥箱(上海賽歐試驗(yàn)設(shè)備有限公司);ZP198-17旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)(上海天峰制藥設(shè)備有限公司);78X-2型片劑四用測定儀(上海黃海藥檢儀器廠);ZB-10智能崩解儀(天津大學(xué)精密儀器廠);PHSJ-4F pH計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。
猴頭菇水提取物(西安昌岳生物科技有限公司,批號20161220);碳酸氫鈉(河北華晨藥業(yè)有限公司,批號20160128);檸檬酸(安徽豐原生物化學(xué)股份有限公司,批號20151220);PEG 6000(安徽山河藥用輔料有限公司,批號20160920);乳糖(上海華茂藥業(yè)有限公司,批號20151106);硬脂酸鎂(天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心,批號20160320);十二烷基硫酸鈉(上東浩天藥業(yè)有限公司,批號20160824);甜菊糖(上東浩天藥業(yè)有限公司)。
1.3.1 猴頭菇水提取物添加量的確定
根據(jù)文獻(xiàn)研究和市場調(diào)研,設(shè)計(jì)猴頭菇水提取物泡騰片的片重2 g,猴頭菇水提取物的添加量每片100mg,每天服用3次,每次1片。
1.3.2 猴頭菇水提取物泡騰片的質(zhì)量評價(jià)
1) pH。在20 ℃下將泡騰片溶于100 mL水中,待完全溶解后,測定溶液的pH。
2) 崩解時間。參照2015版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)崩解時限檢查法,將200 mL水加入250 mL燒杯中,水浴控制水溫在15~25℃,加入泡騰片1片。從溶液中加入泡騰片計(jì)算到無氣體逸出的時間即為泡騰片的崩解時間。
3) 發(fā)泡量。取10支內(nèi)徑約1.5 cm的25 mL具塞刻度試管,加水2 mL后置于(37±1)℃水浴中5 min,分別加入本品1片,密封20 min,觀察最大發(fā)泡體積。
4) 吸濕性。將底部盛有飽和氯化鉀溶液干燥器放置1 d,保持內(nèi)部相對濕度84%,將約0.5 g顆粒平鋪于干燥恒重的瓶底部,稱重,干燥至恒重后再精密稱重,后置于相對濕度84%干燥器中,打開稱量瓶蓋定時稱重,計(jì)算吸濕百分率。
1.3.3 猴頭菇水提取物泡騰片的制備工藝
制法1:采用酸堿分開制粒壓片法。將原輔料過孔徑0.150 mm篩,將猴頭菇多糖平分成2份,一份與酸源、稀釋劑按等量遞增法混勻,加入黏合劑制成酸顆粒;另一份與堿源、稀釋劑同法制得堿顆粒。將酸顆粒、堿顆粒混勻,潤滑劑補(bǔ)足片重,壓片,即得。
制法2:采用堿源包裹分開制粒壓片法。在60~80℃下水浴加熱熔融PEG 6000,加入堿源,邊加邊攪勻,冷卻后過80目篩。另取過孔徑0.150 mm篩的原料藥、酸源、稀釋劑等,按等量遞增法混勻,制粒,加入上述粉末,潤滑劑補(bǔ)足片重,混勻,壓片,即得。
制法3:采用粉末直接壓片法。取原料藥、酸源、堿源、稀釋劑等均過孔徑0.150 mm篩,潤滑劑不足片重,按等量遞增法混勻,壓片,即得[4-5]。
以崩解時間、外觀及放置10 d后的發(fā)泡情況作為評價(jià)指標(biāo),對不同制備方法進(jìn)行考察。
1.3.4 碳酸氫鈉包裹物制備
試驗(yàn)采用PEG 6000包裹堿源的工藝制備猴頭菇水提取物泡騰片,設(shè)計(jì)PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1%,2%,3%,4%,5%和6%,并固定其他處方不變,按制法2工藝,每組平行制備3批泡騰片,以崩解時間和發(fā)泡量為評價(jià)指標(biāo)考察PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)[6-7]。
1.3.5 猴頭菇水提取物泡騰片單因素試驗(yàn)
1.3.5.1 填充劑的考察
泡騰片在遇水泡騰后應(yīng)形成澄清溶液,其在存儲過程中經(jīng)常出現(xiàn)吸濕而導(dǎo)致失效的現(xiàn)象,因此在選擇填充劑時應(yīng)選擇水溶性、吸濕性小的輔料。選擇乳糖、可溶性淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、糊精為預(yù)選填充劑,以吸濕性和溶解情況為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行考察[8]。
1.3.5.2 崩解劑的考察
崩解劑是泡騰片處方中一種重要輔料,決定泡騰片的崩解時間,對泡騰片質(zhì)量起關(guān)鍵作用。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,崩解劑一般在泡騰片中質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%~50%,試驗(yàn)在固定其他條件不變情況下,以檸檬酸為酸源,碳酸氫鈉為堿源,設(shè)計(jì)崩解劑總量為30%,35%,40%,45%和50%,分別按制法2工藝,每組平行制備3批泡騰片,以崩解時間、發(fā)泡量和pH為評價(jià)指標(biāo),考察崩解劑總量[9]。
泡騰片中酸源檸檬酸與堿源碳酸氫鈉質(zhì)量比一般為1.37︰1~1.74︰1,且酸源量大泡騰片溶解最快,堿源量大產(chǎn)氣狀態(tài)最佳。設(shè)計(jì)檸檬酸與碳酸氫鈉質(zhì)量比分別為2.5︰1,2.0︰1,1.5︰1,1.0︰1和1.0︰1.5,并固定其他處方不變,按制法2的工藝,每組平行制備3批,以崩解時間、發(fā)泡量、pH為評價(jià)指標(biāo),考察最佳檸檬酸與碳酸氫鈉比例。
1.3.5.3 黏合劑的考察
設(shè)計(jì)PVP-水溶液、PVP-乙醇溶液、10%淀粉漿作為預(yù)選黏合劑,以崩解時間、硬度和制粒情況為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行考察[10]。
1.3.5.4 甜味劑的考察
良好的口感可以提高泡騰片使用的從性,為得到較好的口感,泡騰片處方中需加入適量的甜味劑進(jìn)行矯味。阿斯巴甜熱量低、甘甜清凉,且吸濕性低,不易導(dǎo)致齲齒,因此選擇阿斯巴甜作為甜味劑。設(shè)計(jì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.5%,1.0%,1.5%,2.0%和2.5%,同時固定其他條件不變,按制法2工藝,每組平行制備3批泡騰片,以甜味程度為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行考察[11]。
1.3.5.5 潤滑劑的考察
制備口服泡騰片應(yīng)選擇水溶性潤滑劑,選擇1.5%十二烷基硫酸鈉、PEG 6000為預(yù)選潤滑劑,以休止角、崩解時間、硬度、泡騰片外觀為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行考察[12]。
1.3.6 猴頭菇水提取物泡騰片處方的正交試驗(yàn)
根據(jù)單因素試驗(yàn)考察結(jié)果進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以崩解時間、口感(很好為4,較好為3,一般為2,差為1)、硬度(30 d)、pH作為評定指標(biāo),對泡騰劑總量(A)、泡騰劑酸堿質(zhì)量比(B)以及甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)(C)進(jìn)行優(yōu)化[13-15]。因素水平見表1。
表1 正交試驗(yàn)因素水平表
結(jié)果如表2所示,制法2所得泡騰片崩解時間較小,硬度適當(dāng),外觀較好,且PEG 6000包裹堿源制得的泡騰片在放置10 d后,仍有較強(qiáng)的發(fā)泡效果,故選擇制法2作為制備工藝。
表2 不同制備方法考察結(jié)果
結(jié)果如表3所示,PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%時,崩解時間最短,發(fā)泡量適宜,故確定PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%。
表3 不同PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)效果的比較
2.3.1 填充劑考察結(jié)果
結(jié)果如表4所示,乳糖的吸濕率最小,且泡騰片泡騰后得到澄清溶液,且本身有甜味,具有一定矯味作用,故選擇乳糖為填充劑。
表4 不同稀釋劑考察結(jié)果
2.3.2 崩解劑考察結(jié)果
結(jié)果如表5所示,泡騰劑總量小于45%時,片劑崩解時間最短,總量大于45%時,崩解時間反而延長。故選擇泡騰劑總量42.5%,45.0%和47.5%進(jìn)行正交試驗(yàn)。
表5 不同泡騰劑添加量效果的比較
不同酸堿質(zhì)量比考察結(jié)果如表6所示,最終選擇酸堿質(zhì)量比1.25︰1,1.50︰1和1.75︰1進(jìn)行正交試驗(yàn)。
表6 不同酸堿質(zhì)量比效果的比較
2.3.3 黏合劑考察結(jié)果
結(jié)果如表7所示,采用3% PVP-水溶液時的崩解時間、硬度和制得的顆粒均較好,故選用3% PVP-水溶液為猴頭菇水提取物泡騰片的黏合劑。
2.3.4 甜味劑考察結(jié)果
結(jié)果如表8所示,甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于2%時甜味過淡,大于2%時甜味太濃,故選擇阿斯巴甜質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.75%,2.00%和2.25%進(jìn)行正交試驗(yàn)。
表8 不同潤甜味劑加量效果的考察結(jié)果
2.3.5 潤滑劑考察結(jié)果
結(jié)果如表9所示,十二烷基硫酸鈉作為潤滑劑時的休止角、崩解時間、硬度及泡騰片外觀均較好,故選擇十二烷基硫酸鈉作為潤滑劑。
表9 不同潤滑劑的考察結(jié)果
2.4.1 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析
表10 按L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果
結(jié)果見表10~表14。分析結(jié)果可知,泡騰劑總量(A)對崩解時間影響顯著,結(jié)合直觀分析結(jié)果選取A1水平,B、C水平任選;甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)(C)對口感影響顯著,結(jié)合直觀分析結(jié)果選取B2水平,A、C水平任選;3個因素對泡騰片硬度均無顯著性影響,A、B、C水平任選;泡騰劑酸堿質(zhì)量比(B)對pH影響顯著,結(jié)合直觀分析結(jié)果選取B2水平,A、C水平任選。最終確定猴頭菇水提取物泡騰片的最佳工藝為A1B2C2,即泡騰劑總量42.5%、泡騰劑酸堿質(zhì)量比1.5︰1、甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。
表11 崩解時間分析結(jié)果
表12 口感分析結(jié)果
表13 30 d硬度分析結(jié)果
表14 pH分析結(jié)果
2.4.2 工藝驗(yàn)證
按照最佳工藝制備3批(1 000片/批)猴頭菇水提取物泡騰片,以崩解時間、口感、30 d硬度、pH為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果見表15。結(jié)果表明所確定的最優(yōu)工藝條件穩(wěn)定,重現(xiàn)性好。
表15 工藝的驗(yàn)證
泡騰片的組方及工藝較一般固體制劑要求更嚴(yán)格,經(jīng)常發(fā)生壓片黏沖、吸濕不穩(wěn)定和崩解遲緩等問題,由于酸、堿源制粒壓片工藝選擇不當(dāng),也易出現(xiàn)泡騰片吸濕而導(dǎo)致失效現(xiàn)象。試驗(yàn)以猴頭菇提取物為原料,采用單因素及正交試驗(yàn)確定猴頭菇水提取物泡騰片的最優(yōu)處方,配方中猴頭菇提取物質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%、填充劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)45.0%,泡騰劑總量42.5%(酸堿質(zhì)量比1.5︰1)、PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)4.0%、甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%、潤滑劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%時,制得的猴頭菇水提取物泡騰片表面光滑美觀、色澤均勻,崩解時限、pH等均符合2015版《中國藥典》的質(zhì)量要求,且泡騰后溶液澄清、口感良好,表明配方具有良好可靠性和可行性。