常思思
微生物檢驗(yàn)是評價水質(zhì)變化的一個重要方法。水質(zhì)被污染的情況下會產(chǎn)生不同有機(jī)物質(zhì),增加水中各類微生物的數(shù)量與種類,如常見的大腸埃希菌、糞大腸菌群、腸球菌、綠膿假單胞菌等,如果不能及時檢出其中的相關(guān)菌落,可使人體出現(xiàn)不同的健康問題。對此,注重生活飲用水的水質(zhì)檢驗(yàn)具有重要意義。那么水質(zhì)檢驗(yàn)中對細(xì)菌菌落有何要求?可以選擇哪些方法進(jìn)行水中細(xì)菌微生物的檢驗(yàn)?zāi)??本文將對上述有關(guān)問題予以分析。
1細(xì)菌總數(shù)檢測分析
細(xì)菌總數(shù)是評價水質(zhì)的一項(xiàng)重要指標(biāo)。細(xì)菌總數(shù)是指選取1 ml水樣,通過營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在37℃條件下培養(yǎng)24 h后得到的細(xì)菌菌落總數(shù)量。細(xì)菌總數(shù)檢測結(jié)果中如果整體數(shù)值偏高,說明水質(zhì)受到了污染,但是并不能得到污染的具體來源。對水污染來源以及安全程度方面分析,一般還需要進(jìn)行總大腸菌群的檢測。
結(jié)合我國生活飲用水細(xì)菌衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求,1 ml飲水中的≤100個細(xì)菌總數(shù),1 L飲水中≤3個大腸菌群。細(xì)菌總數(shù)檢測方面常用的是平板菌落計(jì)數(shù)法,即制作培養(yǎng)基平板,然后定量在培養(yǎng)基中接種水樣,37℃條件下培養(yǎng)24 h,培養(yǎng)完成后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。需要注意的是,在接種過程中需要注重?zé)o菌操作,同時需要設(shè)置平行對照實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)完成后可通過眼睛直觀或者通過放大鏡檢查等明確菌落數(shù),根據(jù)細(xì)菌總數(shù)結(jié)果與水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)要求,初步判斷水質(zhì)是否出現(xiàn)污染。
2總大腸菌群檢測分析
總大腸菌群也是評價水質(zhì)的重要性指標(biāo)。豬牛羊等較多動物腸道以及人體腸道內(nèi)都存在大腸菌群,可反映出水質(zhì)是否受到糞便污染,通過對耐熱大腸菌群與大腸埃希氏菌的檢測,能夠進(jìn)一步確定出水中的總大腸菌群污染來自人還是動物糞便,或來源于自然環(huán)境??偞竽c菌群指的是在37℃培養(yǎng)24 h和48 h后,可發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,檢測結(jié)果反映出的是具有共同特性的一組細(xì)菌。對總大腸菌群檢測可評估水質(zhì)污染情況??偞竽c菌群可采用的檢測方法有以下幾種:
2.1 多管發(fā)酵法檢驗(yàn)
選擇10 ml待檢測水樣,并將其接種到雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10 ml中;1 ml水樣加入10 ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,將1 ml水樣添加到0.9%的氯化鈉注射液9 ml中,充分混合,培養(yǎng)并在接種后進(jìn)行不同稀釋處理;針對水質(zhì)污染嚴(yán)重的情況,水樣需要合理稀釋。不足1 ml的水樣稀釋10倍,并從稀釋液中選擇1 ml接種培養(yǎng)。接種后,37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,無產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象,即為陰性大腸菌群。
如果有產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象,需要進(jìn)行如下操作:將培養(yǎng)菌轉(zhuǎn)接種到伊紅美藍(lán)瓊脂板上培養(yǎng)24 h,觀察菌落形態(tài),對無金屬光澤紫黑色或淡紫紅色,中間顏色較深的金屬光澤菌落染色并鏡檢。需要注意的是,如果為革蘭氏陰性無芽孢桿,鏡檢后需要放入乳糖蛋白胨中培養(yǎng)培養(yǎng)24 h,有產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象,則為陽性大腸菌群。
2.2 酶底物法檢驗(yàn)
需準(zhǔn)備好酶底物法檢測試劑、滅菌稀釋水等。選擇待測水樣100 ml,如果水質(zhì)污染嚴(yán)重,可選擇10 ml水樣,加入90 ml滅菌稀釋水稀釋,得到100 ml稀釋后的水樣。100 ml水樣加入專用培養(yǎng)基中,使其充分溶解,在(36±1)℃條件下培養(yǎng)24 h,觀察培養(yǎng)結(jié)果,不變色則為陰性,變?yōu)辄S色則為陽性總大腸菌群。在定性分析的基礎(chǔ)上還可以定量分析,綜合評估水中總大腸菌群。
3生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法的選擇
生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法中需要結(jié)合具體的試驗(yàn)條件合理選擇檢測方法,同時還需要考慮檢測結(jié)果的可靠性,如平皿計(jì)數(shù)法在生活飲用水微生物檢驗(yàn)中,該操作復(fù)雜、繁瑣,對操作人員的技術(shù)素養(yǎng)要求較高;管發(fā)酵法能夠可得到水中微生物的含量水平,兼顧定性與定量,但是多管發(fā)酵法實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,耗時也較多,不過其能夠滿足專業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳钣盟⑸餀z驗(yàn);酶底物法檢驗(yàn)操作簡單,耗時短,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高,對操作人員的要求也不高,同樣可兼顧定性分析與定量分析,具有較高的推廣與應(yīng)用價值。B2058848-B186-4C66-B092-D1E39510021D