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    注射用腺苷鈷胺配制后顏色異常原因分析*

    2021-05-29 10:17:34江小四方先駿
    中國藥業(yè) 2021年10期
    關鍵詞:鈷胺腺苷病區(qū)

    江小四,方先駿,程 鋼

    (安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院藥劑科·國家中醫(yī)藥管理局中藥化學三級實驗室,安徽 合肥 230022)

    腺苷鈷胺又稱腺苷輔酶維生素B12,是維生素B12的活性輔酶形式之一,臨床主要用于治療多發(fā)性神經(jīng)炎、三叉神經(jīng)痛、神經(jīng)麻痹等[1],也常與其他藥物聯(lián)用,治療糖尿病周圍神經(jīng)病變、帶狀皰疹、多發(fā)性神經(jīng)炎、老年性聾等疾?。?-5]。腺苷鈷胺的化學性質(zhì)不穩(wěn)定,對光敏感,對酸、堿、熱和氧亦不穩(wěn)定[6],易分解產(chǎn)生腺苷、羥鈷胺素等雜質(zhì)[7-8]。因此,注射用腺苷鈷胺溶解后須立即使用,同時注意避光。其一般選用注射用水或0.9%氯化鈉注射液,肌肉注射或靜脈注射給藥。2019年7月9日,某三甲醫(yī)院內(nèi)分泌病區(qū)護士配制注射用腺苷鈷胺時常規(guī)抽取維生素B1注射液2 mL溶解,溶解后溶液呈無色透明,與此前得到的紅色澄清液不符,且同時配制的其他腺苷鈷胺溶液的顏色也均為紅色澄清液體,懷疑該支藥品質(zhì)量存在問題。藥學人員依據(jù)生產(chǎn)企業(yè)提供的質(zhì)量標準,首先抽樣檢驗該批次其他藥品,再從光照、pH、溶劑及與其他藥品配伍等因素入手,考察注射用腺苷鈷胺溶解后顏色異常的原因,為臨床安全用藥提供參考。現(xiàn)報道如下。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    1200型高效液相色譜儀,包括G1310A四元泵、G1314BVWD型紫外檢測器、手動進樣器、色譜工作站、DT-230A型柱溫箱(美國Agilent公司);TU-1810型紫外-可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);PHS-3E型酸度計(上海儀電科學儀器股份有限公司);BT25S型電子天平(賽多利斯科學儀器<北京>有限公司,精度為0.01 mg);BiosaferSB-3200 DT-6L型超聲清洗機(南京賽飛生物科技有限公司)。

    1.2 試藥

    腺苷鈷胺對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號為14658-201803,規(guī)格為每瓶100 mg,含量為99.0%);注射用腺苷鈷胺(哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)股份有限公司,批號為1903171P2122,規(guī)格為每支1 mg);維生素B1注射液(石藥銀湖制藥有限公司,批號為3719061910,規(guī)格為每瓶2 mL∶100 mg);維生素C注射液(山東新華制藥股份有限公司,批號為1901151,規(guī)格為每瓶5 mL∶0.1 g);維生素B6注射液(山東方明藥業(yè)集團股份有限公司,批號為19071242,規(guī)格為每瓶2 mL∶0.1 g);硫辛酸注射液(亞寶藥業(yè)集團股份有限公司,批號為190604,規(guī)格為每瓶6 mL∶0.15 g);10%氯化鉀注射液(中國大冢制藥有限公司,批號為9196K5,規(guī)格為每瓶10 mL∶0.1 g);50%葡萄糖注射液(中國大冢制藥股份有限公司,批號為9I80J1,規(guī)格為每瓶20 mL∶10 g);滅菌注射用水(四川科倫藥業(yè)股份有限公司,批號為M19031905-2,規(guī)格為每瓶500 mL);0.9%氯化鈉注射液(安徽豐原藥業(yè)股份有限公司,批號為118030606,規(guī)格為每瓶500 mL);甲醇為色譜純,其他試劑均為分析純,水為純化水。

    2 方法與結果

    2.1 注射用腺苷鈷胺質(zhì)量考察

    含量測定:色譜柱為Agilent Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流動相為甲醇-水(30∶70,V/V);流速為0.8 mL/min;檢測波長為260 nm;柱溫為30℃;進樣量為10μL。取腺苷鈷胺對照品5.41 mg,精密稱定,置50 mL棕色容量瓶中,加滅菌注射用水溶解并定容,搖勻,即得質(zhì)量濃度為0.107 1 mg/mL的對照品溶液。取樣品1支,加2 mL 0.9%氯化鈉注射液溶解、搖勻,移至10 mL棕色容量瓶中,用滅菌注射用水反復洗滌西林瓶,直至瓶中無紅色液體,洗液一并置容量瓶中,加滅菌注射用水定容,搖勻,即得供試品溶液。分別取對照品溶液和供試品溶液各10μL,進樣測定(以上操作均在室溫避光條件下操作)。記錄色譜圖,按外標法以峰面積計算樣品含量,結果樣品中腺苷鈷胺的含量為標示量的105.0%,符合標準(90.0%~110.0%)[9]。色譜圖見圖1。

    圖1 高效液相色譜圖Fig.1 HPLC chromatograms

    其他項目檢查:根據(jù)藥品質(zhì)量標準[9]對樣品進行性狀、pH、羥鈷胺素測定,結果均符合要求,說明該批藥品質(zhì)量合格。

    2.2 腺苷鈷胺溶液光穩(wěn)定性考察

    取樣品14支,分別加入2 mL 0.9%氯化鈉注射液溶解,搖勻,于室溫見光條件下放置14 d內(nèi),逐日觀察溶液顏色、褪色、渾濁沉淀情況。結果溶液顏色和澄清度未見明顯變化。并取放置0,1,3,5,9,14 d的樣品,依法配制供試品溶液,分別進樣測定,色譜圖見圖2。以0 d的含量為100%計算,結果第1,3,5,9,14天的相對百分含量分別為44.0%,10.0%,8.4%,3.4%,2.9%。可見,腺苷鈷胺見光極易分解。

    2.3 配伍溶液外觀性狀考察

    取樣品8支,分別注入維生素B1注射液、維生素B6注射液、維生素C注射液、硫辛酸注射液、50%葡萄糖注射液、10%氯化鉀注射液、0.05 mol/L硫酸溶液、0.1 mol/L氫氧化鈉溶液各2 mL,搖勻,各移至5 mL燒杯中,在室溫下放置0,1,2,3,24 h時觀察,結果各配伍溶液各時點均呈紅色,均未產(chǎn)生渾濁沉淀。其中,前六種配伍藥品均為該病區(qū)當日配制過的藥品,在室溫放置24 h內(nèi)顏色無異常,說明導致病區(qū)配制液顏色異常的原因不是樣品與以上藥品配伍所致。后兩種配伍藥品屬強酸、強堿溶液,樣品與之配伍后均呈紅色澄清,故排除病區(qū)配制液顏色異常為pH變化所致。

    圖2 光穩(wěn)定性考察高效液相色譜圖Fig.2 HPLC chromatograms of the photostability test

    2.4 病區(qū)樣品與維生素B1的鑒別對比

    以移液槍精密量取病區(qū)配置樣品溶液、維生素B1注射液各0.1 mL,分別置2 mL EP塑料離心管中,加滅菌注射用水1 mL,超聲,搖勻,分別得相應供試品溶液。取2種供試品溶液各10μL,按2.1項下色譜條件進樣測定,記錄色譜圖(見圖3)并比較。

    圖3 鑒別對比高效液相色譜圖Fig.3 HPLC chromatograms of the identification and comparison

    由圖3可見,病區(qū)樣品供試品溶液與維生素B1供試品溶液色譜峰的保留時間、峰高、峰面積、色譜峰個數(shù)基本一致,說明病區(qū)樣品供試品溶液中含有維生素B1,且2種供試品溶液中維生素B1濃度一致;病區(qū)樣品供試品溶液在腺苷鈷胺的保留時間(2.90 min左右)未出現(xiàn)色譜峰,說明病區(qū)樣品中不含腺苷鈷胺。

    3 討論

    3.1 該批次藥品是否存在質(zhì)量問題

    對注射用腺苷鈷胺(批號為1903171P2122)的質(zhì)量檢驗結果表明,該批次藥品含量測定、性狀、pH、羥鈷胺素等項目均符合藥品質(zhì)量標準,質(zhì)量合格。

    3.2 樣品光穩(wěn)定性考察的目的和結果

    有文獻報道,0.5 mg/mL的腺苷鈷胺水溶液置透明容量瓶中,于(55±5)lx光照強度、25℃條件下放置,60 min后含量降至70.35%~73.48%[10-11],若在日光下放置,照射30 min含量僅剩0.73%[6]。本試驗中腺苷鈷胺配制液置藥品原包裝棕色西林瓶中,有標簽遮擋,相當于采取了一定的遮光措施,故含量下降較文獻報道慢,且在14 d時仍能檢測出腺苷鈷胺。病區(qū)注射用腺苷鈷胺配制后顏色異常事件發(fā)生于7月9日,同日反映問題后及時送至藥檢室,置冰箱冷藏避光保存,直至7月22日獲得生產(chǎn)企業(yè)提供的腺苷鈷胺對照品后開始試驗。考慮腺苷鈷胺見光極易分解,故檢測14 d室溫不避光貯存條件下腺苷鈷胺的含量變化,考察其配制液見光穩(wěn)定性。結果表明,室溫不避光放置14 d后,腺苷鈷胺配制液在2.9 min保留時間處仍能檢測到色譜峰。峰面積測定結果顯示,腺苷鈷胺相對含量為2.9%,而供試品溶液在腺苷鈷胺保留時間處未見色譜峰,說明病區(qū)樣品中不含腺苷鈷胺。

    此外,還可結合質(zhì)譜,通過檢測腺苷鈷胺主要分解產(chǎn)物腺苷、羥鈷胺素等[7-8],進一步驗證病區(qū)樣品中是否含有腺苷鈷胺,結果會更嚴謹。

    3.3 病區(qū)樣品配制液顏色異常原因分析與建議

    試驗結果顯示,病區(qū)樣品中不含腺苷鈷胺。推測原因可能有,該藥品生產(chǎn)廠家在生產(chǎn)過程中漏灌了藥液(粉),導致該支藥品為空瓶,燈檢及相關質(zhì)檢人員未能將空瓶檢出,致使該次品流入市場;藥房藥師調(diào)配及發(fā)藥時未核查到藥品最小包裝;病區(qū)護士配制前未仔細查看瓶內(nèi)是否有藥物,直接將維生素B1注射液作為溶劑注入,而維生素B1注射液為無色透明,故“配好”的藥液呈無色透明。

    建議藥品生產(chǎn)廠家加強對生產(chǎn)機件的保養(yǎng)維護,減少因灌裝瓶傾斜、移位等造成瓶口對不準灌裝口,使藥液(粉)漏出,可積極應用藥液灌裝機在線稱重系統(tǒng),有效剔除不合格裝量藥瓶,保證每支藥品劑量精準;燈檢和質(zhì)檢人員須嚴把質(zhì)量關,避免漏篩;藥師要嚴謹對待針劑調(diào)劑工作,嚴格遵循“四查十對”,認真細致地核查到藥品最小包裝,杜絕不合格藥品進入臨床。

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