酶聯(lián)法檢測技術(shù)對慢性乙肝患者血清TGF-β1 含量檢測

陳莉 黃文娟 艾程

（臨川區(qū)婦幼保健計劃生育服務(wù)中心檢驗科 344000）

1 前言

慢性乙肝為臨床常見傳染類疾病[1]，近年來，經(jīng)過豐富的臨床實踐發(fā)現(xiàn)，TGF-，1 指標(biāo)含量的檢測在診斷疾病與判斷疾病發(fā)展程度方面有著重要意義，但選擇合適的、特異性高、靈敏度高的檢測方法一直為臨床難題[2]。 本研究以ELISA 為探究對象，對其檢測TGF-β1 含量水平展開詳細(xì)分析。

2 資料與方法

2.1 一般資料

隨機選擇我院于 2018 年 1 月～2020 年 6 月收治的62 例慢性乙肝患者作為研究對象， 經(jīng)ELISA檢測患者血清轉(zhuǎn)化生長因子-測患（TGF-血清）含量，與化學(xué)發(fā)光免疫法檢測結(jié)果、 病理檢測結(jié)果展開對比。 本次所選研究對象中男女患者數(shù)量分別為27例、35 例，患者年齡介于21～75 歲，年齡均值為 41.37歲。 經(jīng)病理檢驗，患者病情分布情況如下：輕度患者23 例、中度患者 21 例、重度患者 18 例。

納入標(biāo)準(zhǔn)： 經(jīng) 《慢性乙型肝炎防治指南》（2005年版）及病理檢驗，確診為慢性乙肝患者；成年患者。

排除標(biāo)準(zhǔn)： 排除合并其它傳染疾病或傳染疾病患者；血液疾病患者；惡性腫瘤患者；精神疾病患者。

入組患者均與我院簽署知情同意書， 享有知情權(quán)，了解本次研究價值與目的；研究已取得我院倫理委員會批準(zhǔn)。

2.2 方法

病理檢驗如下：經(jīng)彩色超聲引導(dǎo)，采用彈射式延活檢獲肝組織，規(guī)格為1.0～1.5 cm；獲取后立即進(jìn)行固定，采用10%甲醛，經(jīng)脫水、浸蠟包埋處理后，以四醛，規(guī)格進(jìn)行連續(xù)切片；先后經(jīng)3 次染色，分別為HE 染色、MASSON 染色、網(wǎng)狀纖維染色，判斷疾病程度。

ELISA 檢驗：于早晨抽取患者空腹靜脈血，試劑盒由北京貝爾生物工程有限公司提供； 設(shè)備為天津Bell9600 電化學(xué)發(fā)光分析儀； 美國SF-2100 型酶標(biāo)儀；具體操作以及判斷標(biāo)準(zhǔn)按照試劑盒說明書進(jìn)行。

化學(xué)發(fā)光免疫法：于早晨抽取患者空腹靜脈血，試劑盒由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，詳細(xì)操作以說明書為準(zhǔn)。

2.3 觀察指標(biāo)

對比ELISA、化學(xué)發(fā)光免疫法、病理檢驗慢性乙肝程度檢驗結(jié)果；對比ELISA 與化學(xué)發(fā)光免疫法檢測TGF-光免水平結(jié)果。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS25.0 計算數(shù)據(jù)，“%” 代表計數(shù)資料，采用 χ2檢驗，“±驗”代表計量資料，采用 t 檢驗，P＜0.05 表示數(shù)據(jù)差異。

3 結(jié)果

3.1 慢性乙肝程度檢測對比

從慢性乙肝程度檢測情況來看，ELISA 與化學(xué)免疫法未見統(tǒng)計學(xué)差異，P＞0.05，且均據(jù)具有較高檢出率。 見表1 所示。

表1 慢性乙肝程度對比（n，%）

3.2 TGF-00 水平對比

不同程度TGF-00 水平檢測中，ELISA 與化學(xué)免疫法也未見統(tǒng)計學(xué)差異，P＜0.05。 見表2 所示。

表2 TGF-疫法水平對比（±s，ng/L）

表2 TGF-疫法水平對比（±s，ng/L）

疾病程度 ELISA 化學(xué)免疫法 t P輕度（n=23） 143.66 也未見統(tǒng)計學(xué)142.59 也未見統(tǒng)計學(xué) 0.1151 0.9089中度（n=21） 280.67 也未見統(tǒng)計學(xué)281.19 也未見統(tǒng)計學(xué) 0.0367 0.9709重度（n=18） 569.97±69.97 568.81±68.81 0.0666 0.9473

4 討論

目前，臨床常用生化檢測方法諸多，但缺乏高特異性、 高靈敏性檢測方法在前期快速進(jìn)行TGF-床常水平檢測，并根據(jù)具體指標(biāo)值展開疾病分析。在本次研究中，選擇ELISA 展開探究，檢測結(jié)果顯示，與病理檢驗、化學(xué)免疫法檢測結(jié)果對比，在TGF-，檢水平檢測以及疾病程度檢測上均未見統(tǒng)計學(xué)差異[3-5]。分析原因可知，ELISA 操作過程中取抗原或抗體，采用固相載體提進(jìn)行包被， 本質(zhì)上是一種固相免疫測定方法，檢測中檢測體免疫活性不會受到影響，且測定過程中固相載體通過與抗原、抗體發(fā)生反應(yīng)，再利用酶標(biāo)抗體、洗滌法進(jìn)行抗體與抗原游離，獲取酶反應(yīng)底物，對物質(zhì)顏色、吸光度展開定量與定性分析，則可快速獲取結(jié)果， 目前市場上有多種類ELISA 試劑盒， 操作方便， 嚴(yán)格的按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，檢測結(jié)果可作為金標(biāo)準(zhǔn)[7]。 本次研究結(jié)果與臨床現(xiàn)有研究報道基本一致， 在張繼東等人的研究中也確認(rèn)ELISA 可準(zhǔn)確檢測出慢性乙肝TGF-GF 指標(biāo)水平，且具有快速、操作方便等優(yōu)勢。

但也有研究報道中稱，采用ELISA 方法進(jìn)行檢測過程中，由于底物成分中含有殘留纖維蛋白原，容易導(dǎo)致結(jié)果誤差，利用現(xiàn)有技術(shù)展開該情況分析，發(fā)現(xiàn)在反應(yīng)過程中確實存在纖維蛋白原黏附在酶標(biāo)反應(yīng)孔情況，但在樣本處理、操作中采取針對性措施則可以有效解決這一問題。 具體來講，采用ELISA 法進(jìn)行慢性乙肝TGF-β1 含量檢測過程中盡量使用抗凝血標(biāo)本，提高離心分離質(zhì)量；使用標(biāo)本時盡量經(jīng)過加熱處理或靜置沉淀過夜， 以確保血液樣本收縮能力最佳， 成分中所含的非特異性活性物質(zhì)進(jìn)入完全失去活性狀態(tài)，減少檢驗過程中非特異性反應(yīng)；合理增加離心機轉(zhuǎn)數(shù)或適當(dāng)延長離心機工作時間， 保障血清樣本中纖維蛋白以及紅細(xì)胞完全沉淀， 提高離心處理的徹底性；檢測中如需增加樣本，需預(yù)先通過離心處理將纖維蛋白以及紅細(xì)胞排出。

總而言之，ELISA 檢測慢性乙肝血清TGF-乙肝精準(zhǔn)、可靠、方便，且可根據(jù)檢測結(jié)果判斷TGF-β1含量水平進(jìn)行乙肝程度鑒定，臨床診療價值顯著。