探討標本放置時間和溫度對血凝四項結(jié)果的影響

董麗俠，邱 偉，邵 華

（徐州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗科 江蘇 徐州 221003）

隨著人們生活方式與環(huán)境的變化，血栓性疾病、出血性疾病的發(fā)生率越來越高，為加強臨床醫(yī)生對這些疾病的診斷，進行血凝四項的檢測成為重要手段，血凝四項是指凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）和纖維蛋白原（FIB），對其進行檢測能夠幫助醫(yī)生判斷患者手術(shù)前凝血功能狀況、判斷患者是否有出現(xiàn)血性疾病、監(jiān)控抗凝血類藥物的使用情況等[1]。近年來，需要進行血凝四項檢測的患者越來越多，呈現(xiàn)連續(xù)增長的趨勢，但是血凝四項的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響，從而進一步影響到醫(yī)生的診斷。為此，必須明確不同因素對血凝四項PT、TT、APTT、FIB 結(jié)果的影響，并據(jù)此進行針對性的干預(yù)，從而提高血凝四項檢測結(jié)果的準確性。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2020 年5—11 月我院100 例患者的血樣（血樣凝固、量不準確、溶血等一律拒收）作為研究的基礎(chǔ)資料，患者基本信息：男60 例、女40 例，平均年齡（36.51±2.10）歲，平均BMI 指數(shù)（24.26±0.53）kg/m2所有患者均排除血液性疾病。

1.2 儀器與試劑

江西富爾康實業(yè)集團有限公司的采血針，成都瑞琦科技實業(yè)股份有限公司的藍蓋血凝檢測標本專用真空管，0.109 mol/L 的枸櫞酸鈉（1:9），LC400 低速離心機，Sysmex CA600 全自動血凝分析儀，上海太陽生物技術(shù)有限公司的血凝四項試劑。

1.3 方法

患者清晨空腹釆血，血樣保存于含有0.109 mol/L 的枸櫞酸鈉（1:9）的凝血試管內(nèi)并上下輕搖3 次；離心（3 000 r/min）10 min，將每份血樣分離出的血漿分成為A、B、C、D 四組，A 組血樣置于8 ℃條件下檢測血凝四項，B、C 兩組分別置于20 ℃、35 ℃條件下進行檢測，D 組血樣在20 ℃放置4 h、8 h 各進行一次檢測 。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2.結(jié)果

2.1 不同溫度對血凝四項檢測的影響

在8 ℃條件下血凝四項結(jié)果與20 ℃條件下血凝四項結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異（P ＞0.05）；35 ℃條件下血凝四項中FB、TT、APIT、PT的結(jié)果明顯偏高（P ＜0.05），具體見表1。

表1 不同溫度對血凝四項檢測的影響（± s）

表1 不同溫度對血凝四項檢測的影響（± s）

注：*表示與8℃條件下檢測結(jié)果相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P ＜0.05。

組別 TT/s APTT/s PT/s FIB/g/l A 組（8℃） 16.56±1.59 33.56±2.21 12.76±1.92 3.53±0.77 B 組（20℃） 16.67±1.60 33.17±2.24 12.95±1.93 3.56±0.78 C 組（35℃） 17.92±1.98* 39.35±2.40* 14.16±2.01* 4.18±0.93*

2.2 不同時間對血凝四項檢測的影響

室溫環(huán)境下（20 ℃），在0 h 下血凝四項檢測結(jié)果最能反映患者實際水平，與放置4 h 下血凝四項的結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異（P ＞0.05）；8 h 下血凝四項的結(jié)果明顯長于0 h的血凝四項結(jié)果（P ＜0.05），具體見表2。

表2 不同時間對血凝四項檢測的影響（ ± s）

表2 不同時間對血凝四項檢測的影響（ ± s）

注：#表示與0 h條件下檢測結(jié)果相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P ＜0.05。

時間 TT/s APTT/s PT/s FIB/g/l 0 h 16.56±1.59 33.56±2.21 12.76±1.92 3.53±0.77 4 h 16.62±1.81 34.60±2.40 12.95±1.86 3.36±0.58 8 h 17.90±1.87# 39.02±2.48# 14.03±1.92# 4.15±0.62#

3.討論

有研究表明，血液標本從抽取后，凝血因子會因為存放的時間和方式的不同從而導(dǎo)致檢驗結(jié)果的差異。血凝四項監(jiān)測主要用于發(fā)現(xiàn)和診斷先天性或后天性，原發(fā)性或繼發(fā)性凝血障礙疾病，另外還主要用于抗凝治療監(jiān)測、判斷溶栓治療效果等。而其中凝血酶原時間（PT）是檢查外源性凝血系統(tǒng)常用的篩選試驗，PT 的長短主要反映了血漿中凝血酶原、纖維蛋白原及因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平，同時是用于監(jiān)測口服抗凝藥物（如：華法林）的首選指標?；罨糠帜蠲笗r間（APTT）是反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)狀況的篩選試驗及臨床使用肝素治療時監(jiān)測其用量的首選指標。之前有研究報道，APTT 值隨著保存時間延長有逐漸升高上A 在凝血酶時間（TT）主要用于血漿中肝素或肝素類抗凝物質(zhì)的檢查及作為鏈激酶，尿激酶溶栓治療時的監(jiān)控指標。纖維蛋白原（FIB）是肝臟的分泌物，是纖維蛋白前體之一，也可作為凝血系統(tǒng)活化物的載體[2-4]，在多種疾病時會升高（如；血栓前狀態(tài)、腎病綜合征等）或者降低（如：DIC 晚期等）。故臨床對于血栓性疾病、出血性疾病的診斷，多采用血凝四項檢測結(jié)果，所以血凝四項檢測 結(jié)果的準確性直接影響到醫(yī)生用藥治療的判斷與相關(guān)手術(shù)活動的開展[5]。

近年來，越來越多 的研究表明在不同的時間與溫度環(huán)境下，血凝四項的檢測結(jié)果會存在一定的差異。通過此次的實驗顯示，在8 ℃條件下血凝四項的結(jié)果與20 ℃條件下血凝四項的結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異，35 ℃條件下血凝四項中FIB、TT、APTT、PT 的檢測結(jié)果明顯長于8 ℃條件下和20 ℃條件下血凝四項的檢測結(jié)果（P ＜0.05），因此血樣保存溫度環(huán)境在8 ℃到20 ℃之間為宜[6]。此次試驗還可知：室溫環(huán)境下（20 ℃），在0 h 下與4 h 下血凝四項的結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異，8 h 下血凝四項的結(jié)果明顯長于0 h 和4 h 血凝四項的結(jié)果[7]。所以，隨著血樣保存時間的延長（＞4 h），血凝四項的結(jié)果也會隨之延長，從而影響到血凝四項檢測的準確度，故在進行血凝四項檢測時應(yīng)當在4 h 內(nèi)完成，避免標本長期存放[8]，否則無法為臨床提供準確可靠的結(jié)果。

此次實驗表明，標本放置時間越長、溫度越高將導(dǎo)致血凝四項的檢測結(jié)果越長，應(yīng)當在8 ℃到20 ℃的溫度下存放標本且在4 h 之內(nèi)完成檢測，才能保證結(jié)果的準確性。對于一些異常的檢驗結(jié)果，應(yīng)該積極主動與臨床聯(lián)系，了解詢問患者的病情，必要時考慮重新抽血復(fù)查，以確保檢驗結(jié)果的準確性，尤其是住院病人一般由夜班護士早上七點左右統(tǒng)一抽血，而八點以后才陸續(xù)開始送到檢驗科，這就要求我們檢驗人員接到標本后及時離心標本盡快檢測，標本量大時不能及時檢測的標本可以離心好暫時放在4℃冰箱保存，同時要求臨床盡快送標本，把人為因素影響降到最低，為臨床的診斷治療提高可靠的依據(jù)。