全自動固相微萃取-氣相色譜串聯(lián)質譜法檢測水中土臭素和2-甲基異莰醇

周廣安，陳漪潔，潘慧慧，王曉芳

(1. 青島市水務事業(yè)發(fā)展服務中心，山東青島 266000；2. 青島市海潤自來水集團有限公司，山東青島 266000)

近年來，隨著人民對高品質飲用水的需求提升，飲用水的嗅味問題愈來愈受到重視。研究表明，我國最常見的飲用水異味類型是土霉味，而土霉味一般是由土臭素(GSM)和2-甲基異莰醇(2-MIB)這2種化合物引起的[1]。GSM和2-MIB的主要來源是天然水源中藍藻和放線菌等的代謝和降解產(chǎn)物，這2種致嗅物質在水中的含量一般較低，對人體無明顯的健康危害，但它們的嗅閾值很低(2-MIB為5～10 ng/L、GSM為1～10 ng/L)。由于嗅閾值極低，當生活飲用水中含有痕量2-GSM和2-MIB時，用戶就會發(fā)現(xiàn)水的嗅味異常，引起用戶反感和投訴[2]。

我國《生活飲用水衛(wèi)生標準》(GB 5749—2006) 附錄A規(guī)定2-MIB和GSM的限值為10 ng/L[3]。由于這2種致嗅物質的國標限值較低，給準確定量水中痕量目標化合物帶來很大挑戰(zhàn)。目前，國家和行業(yè)標準中涉及這2種物質檢測方法的有《生活飲用水臭味物質 土臭素和2-甲基異莰醇檢驗方法》(GB/T 32470—2016)和《城鎮(zhèn)供水水質標準檢驗方法》(CJ/T 141—2018)。前者采用手動固相微萃取-氣相色譜質譜法進行檢測，方法測定下限：GSM為3.8 ng/L、2-MIB為2.2 ng/L；后者運用手動/自動固相微萃取-氣相色譜質譜法進行檢測，方法測定下限：GSM為6.8 ng/L、2-MIB為4.8 ng/L(自動固相微萃取時)[4-5]。此外文獻中使用吹掃捕集-氣相色譜質譜法、固相萃取-氣相色譜質譜法、液液微萃取-氣相色譜質譜法等檢測這2種致嗅物質[2, 6-8]。呂建霞等[2]使用吹掃捕集-氣相色譜質譜法檢測2-MIB和GSM時，2種物質的檢出限分別為3.0 ng/L和1.0 ng/L。宋帥帥等[8]用固相萃取-氣相色譜質譜法檢測時，2-MIB和GSM的檢出限均為1.0 ng/L。馬曉雁等[6]使用液液微萃取-氣相色譜質譜法檢測時，2-MIB和GSM的檢出限分別為5.0 ng/L和1.0 ng/L。GSM和2-MIB的嗅閾值極低，例如對于敏感人群來說GSM的嗅閾值可低至1 ng/L[2]，因此，尋找測定下限更低、靈敏度更高的致嗅物質定量檢測方法非常必要。近年來，氣相色譜串聯(lián)質譜技術在水質檢測領域的應用逐漸成熟，由于其具有非常強的抗干擾能力，可有效提高檢測方法靈敏度。使用該技術檢測水中嗅味物質的報道不少，但相關文獻較少。余沛芝等[9]用固相微萃取-氣相色譜串聯(lián)質譜法檢測2-MIB和GSM時，這2種致嗅物質的檢出限分別為0.52 ng/L和0.43 ng/L。本文采用全自動固相微萃取-氣相色譜串聯(lián)質譜法嘗試檢測GSM和2-MIB，優(yōu)化固相微萃取條件和氣相色譜串聯(lián)質譜條件，得到更低的檢出限和測定下限，可有效應用于水中痕量致嗅物質的檢測。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

安捷倫7890B/7000C型氣相色譜串聯(lián)質譜儀；安捷倫GC-Sampler 80型自動固相微萃取裝置；色譜柱：DB-5MS(30 m×250 μm×0.25 μm)；固相萃取纖維頭：SUPELCO 50/30 μm DVB/CAR/PDMS；密理博Milli-Q Integral 5型純水機。

2-MIB和GSM標準物質為AccuStandard生產(chǎn)的貨號為ODOR-JDWOS的標準溶液；2-異丁基-3-甲氧基吡嗪(IBMP)內(nèi)標標準物質為O2Si生產(chǎn)的貨號為012502-03-1ML的標準溶液。另外所使用的硫代硫酸鈉和氯化鈉均為優(yōu)級純，甲醇為色譜純。

1.2 試驗步驟

1.2.1 固相微萃取條件

取10 ml樣品加入20 mL頂空瓶中，樣品中加入氯化鈉固體2.5 g，振蕩使其溶解，用頂空固相微萃取法對其進行前處理。萃取頭老化溫度為250 ℃，老化時間為5 min，樣品預加熱時間為5 min，預加熱溫度為65 ℃，頂空固相微萃取時間為25 min，進樣口解吸，解吸時間為3 min。

1.2.2 GC/MS分析條件

氣相色譜條件：進樣口溫度為250 ℃，不分流進樣，柱流量為1.0 mL/min，柱溫程序升溫：初始溫度為50 ℃，保持1 min，以8 ℃/min升溫至180 ℃，傳輸線溫度為250 ℃。

質譜條件：離子源為EI源，離子源溫度為230 ℃，四極桿溫度為150 ℃，溶劑延遲7 min，全掃描(Scan)離子掃描為45～350 m/z。

1.2.3 優(yōu)化參數(shù)確定串聯(lián)質譜條件

采用全掃描(Scan)方式，參考NIST標準質譜譜庫進行定性，確認保留時間。通過全掃描圖譜選擇2-甲基異莰醇、土臭素及內(nèi)標物3個化合物的最大豐度離子作為二級質譜(MRM模式)的母離子，進行產(chǎn)物離子掃描，再選擇豐度較大的產(chǎn)物離子作為分析方法的定量和定性離子。確定定量和定性離子后，設置一系列不同的碰撞能，根據(jù)各產(chǎn)物離子的豐度大小選擇最佳碰撞能。

1.2.4 方法的工作曲線、準確度和精密度

使用已確認的固相微萃取方法和氣相色譜串聯(lián)質譜方法，進行工作曲線的繪制，確定方法的檢出限和測定下限，并向純水、生活飲用水和水源水中加入標準物質，進行加標回收檢測，以加標回收試驗的相對標準偏差評價方法的精密度，以加標回收試驗的回收率評價方法的準確度。

2 試驗結果與分析

2.1 串聯(lián)質譜條件優(yōu)化

2.1.1 確定串聯(lián)質譜(MRM)模式母離子

首先對2-MIB、GSM、IBMP這3種物質的標準樣品進行一級質譜全掃描，發(fā)現(xiàn)2-MIB的最大豐度質量數(shù)為95.0，GSM的最大豐度質量數(shù)為112.0，IBMP的最大豐度質量數(shù)為124.0，與NIST譜庫中的參考圖譜一致，以這3個最大豐度離子分別作為3種物質二級質譜母離子。另外通過全掃描確認2-MIB的保留時間為10.639 min，GSM的保留時間為14.551 min，IBMP內(nèi)標的保留時間為10.288 min。

2.1.2 MRM模式產(chǎn)物離子確定

對2-MIB、GSM和IBMP這3種化合物進行產(chǎn)物離子掃描，掃描結果如圖1所示。由圖1可知，2-MIB、GSM和IBMP的較大豐度產(chǎn)物離子分別為67.0、55.1，97.0、83.0，94.1、81.1，分別選擇產(chǎn)物離子中豐度最大的67.0、97.0、94.1作為3種化合物的定量離子，產(chǎn)物離子中豐度次之的55.1、83.0、81.1作為3種化合物的定性離子。

圖1 2-MIB(a)，GSM(b)和IBMP(c)產(chǎn)物離子掃描譜圖Fig.1 Spectrum of 2-MIB(a), GSM(b) and IBMP(c) in Product Ion Scanning Mode

2.1.3 最佳碰撞能的確定

確認各化合物的產(chǎn)物離子后，對各母離子/子離子對設置一系列不同的碰撞能(5、10、15、20、25、30 V)，使用相同濃度的標準樣品進行對比試驗，通過比較不同碰撞能試驗條件下相應產(chǎn)物離子的豐度(響應)大小，選擇定量和定性離子對(共6對)的最佳碰撞能。試驗確定的最佳碰撞能如表1所示。

表1 2-MIB、GSM和IBMP的MRM條件參數(shù)Tab.1 Parameters of 2-MIB, GSM and IBMP in MRM Mode

2.2 校準曲線

根據(jù)已確定的各物質固相微萃取-氣相色譜串聯(lián)質譜檢測條件，以IBMP為內(nèi)標，配制2-MIB和GSM濃度依次為0、1、2、5、10、20、40、60、80、100 ng/L，IBMP內(nèi)標濃度均為40 ng/L的標準溶液系列進行檢測。繪制校準曲線時，以目標化合物和內(nèi)標物的相對濃度為橫坐標，以目標化合物和內(nèi)標物的相對響應為縱坐標，2-MIB和GSM的校準曲線分別如圖2和圖3所示。線性擬合方程分別為2-MIB：y=0.407x+ 0.012 1 (R2=0.997)，GSM：y=1.64x- 0.002 69 (R2=0.998)。由此可知，2種致嗅物質在10個濃度梯度范圍內(nèi)得到的線性相關系數(shù)均大于0.990，表明在0～100 ng/L的濃度內(nèi)，方法的線性相關性良好。

圖2 2-MIB的校準曲線Fig.2 Calibration Curve of 2-MIB

圖3 GSM的校準曲線Fig.3 Calibration Curve of GSM

2.3 方法準確度和精密度

使用純水配制2-MIB和GSM濃度梯度為50、100 ng/L的標準溶液， 每個濃度梯度平行配制6份進行分別檢測，檢測結果如表2所示。由表2可知，檢測結果的相對誤差均小于5%，說明方法的準確度較高；另外檢測數(shù)據(jù)的相對標準偏差均在1.4%～2.1%，說明方法的精密度高、重現(xiàn)性好。

表2 方法準確度和精密度試驗數(shù)據(jù)Tab.2 Experimental Accuracy and Precision Data of Method

2.4 方法的檢出限和測定下限

根據(jù)環(huán)境保護部《環(huán)境監(jiān)測 分析方法標準制修訂技術導則》(HJ 168—2010)中的檢出限的確定方法[10]，配制2-MIB和GSM濃度均為2.0 ng/L的標準溶液，平行檢測7次。計算得出2-MIB和GSM的標準偏差S分別為0.129 ng/L和0.075 6 ng/L，根據(jù)MDL=t×S(n=6時，t=3.143)，計算得出2-MIB和GSM的方法檢出限分別為0.41 ng/L和0.24 ng/L。以4倍檢出限作為方法的測定下限，2-MIB和GSM這2種致嗅物質的方法測定下限分別為1.6 ng/L和1.0 ng/L，均遠低于GB 5749—2006附錄A中2種物質的限值要求(10 ng/L)，滿足實際檢測需求。

2.5 方法的實際水樣加標回收率

選取青島市生活飲用水和水源地表水進行加標回收試驗，其中，生活飲用水需用硫代硫酸鈉脫氯處理。生活飲用水加標濃度分別為5、50 ng/L和100 ng/L，水源水加標濃度分別為5、50 ng/L和90 ng/L，每個加標回收試驗重復6次，加標回收率和檢測結果相對標準偏差如表3、表4所示。由表3、表4可知，生活飲用水的加標回收率在88.2%～132%，水源水的加標回收率在96.3%～114%，2種水樣基質加標回收試驗的RSD均在5.7%以內(nèi)，說明該方法的準確性、重現(xiàn)性均較好，滿足分析檢測要求。

表3 生活飲用水加標回收試驗數(shù)據(jù)Tab.3 Experimental Data of Drinking Water Standard Recovery Test

表4 水源水加標回收試驗數(shù)據(jù)Tab.4 Experimental Data of Raw Water Standard Recovery Test

3 結論

(1)試驗證明，以2-異丁基-3-甲氧基吡嗪為內(nèi)標物，使用固相微萃取-氣相色譜串聯(lián)質譜法檢測水中2-甲基異莰醇和土臭素，方法操作簡便，且準確度高、精密度好、靈敏度高。近年來，氣相色譜串聯(lián)質譜儀應用日益廣泛，許多實驗室已配備這種儀器，且該方法使用的主要耗材僅固相微萃取纖維頭，無需使用有機溶劑，可以批量處理水樣。因此，本方法檢測效率高、環(huán)境友好、經(jīng)濟性強，具有應用前景。

(2)對生活飲用水和水源水進行不同濃度的加標回收試驗時，生活飲用水的加標回收率在88.2%～132%，水源水的加標回收率在96.3%～114%，試驗相對標準偏差均在6%以內(nèi)，符合檢測要求。

(3)使用該方法時，2-甲基異莰醇和土臭素的方法檢出限分別為0.41 ng/L 和0.24 ng/L，測定下限分別為1.6 ng/L和1.0 ng/L，低于已發(fā)布的標準方法，且遠低于國標限值，靈敏度較高。使用該方法時應注意，對生活飲用水進行檢測時應使用硫代硫酸鈉進行脫氯處理。

(4)2-甲基異莰醇和土臭素是引起生活飲用水土霉味的主要來源，在供水生產(chǎn)中應密切關注并控制水源水藻類生長，從源頭上控制致嗅物質生成，此外凈水廠實施臭氧活性炭深度處理工藝可以有效去除這2種致嗅物質。