氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析制痂酊中揮發(fā)性成分

陸靜金，夏泉，2

級(jí)實(shí)驗(yàn)室，安徽合肥230022

制痂酊為安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院制劑，由黃柏、黃芩、兒茶和冰片四味中藥，經(jīng)乙醇浸提制成的中藥復(fù)方酊劑，具有清熱燥濕、斂瘡、收斂止痛、抗菌等之功效。臨床用于Ⅰ度、Ⅱ度燒傷、燙傷等，使創(chuàng)面形成藥痂，保持干燥，防止細(xì)菌污染和焦痂溶解，其臨床效果確切而收錄入安徽省醫(yī)院制劑規(guī)范。該院內(nèi)制劑的前期研究主要集中在以主成分龍腦和異龍腦的質(zhì)量控制上，此復(fù)方中黃柏、黃芩和兒茶也含有揮發(fā)性成分。關(guān)于這些中藥材的揮發(fā)性成分已有一些報(bào)道，但各中藥材在制痂酊中組方后其揮發(fā)性成分的研究卻鮮見報(bào)道。故本研究自2019年3-9月采用GC–MS方法分析制痂酊中揮發(fā)性成分的組成，并用面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量，為其質(zhì)量控制提供充分依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 美國(guó)Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀。

1.2 材料 制痂酊（批次180625）由安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室提供；環(huán)己烷等試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油的制備 制痂酊搖勻，精密量取4 mL于10 mL容量瓶，加入環(huán)己烷定容至10 mL，充分混勻后放置，待分層后取上層環(huán)己烷液，即得供試樣品。

2.2 GC條件 色譜柱：石英毛細(xì)管柱HP-5MS（30 mm×0.25 mm×0.25μm）；柱溫：起始溫度為40℃，程序升溫，升溫速率3℃/min，升溫至80℃，再5℃/min的升溫速率，升溫至280℃，保持20 min；柱流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度250℃；柱前壓100 kPa；分流比為5∶1；載氣為高純He；進(jìn)樣量2μL。

2.3 MS條件 采用EI電離模式；電子轟擊能量為70 eV；接口溫度250℃；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；質(zhì)量掃描范圍m/z 35～500 amU；采用wiley7n.1和NIST98.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行計(jì)算機(jī)檢索定性。

2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 按照2.2色譜實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行分析測(cè)定，得到揮發(fā)性成分的總離子流的色圖譜，對(duì)總離子流圖中的各峰一級(jí)質(zhì)譜圖經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索以并結(jié)合wiley7n.1和NIST98.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)數(shù)據(jù)系統(tǒng)進(jìn)行匹配，同時(shí)查閱文獻(xiàn)數(shù)據(jù)鑒定，采用峰面積歸一化法得到各揮發(fā)性成分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。

表1 制痂酊揮發(fā)性成分的主要成分鑒定結(jié)果

從制痂酊中共得到17個(gè)峰，鑒定出13種化合物，占其揮發(fā)性成分總量的99.59%。制痂酊中揮發(fā)性成分由單帖類、酸類、酯類組成，主要成分為龍腦（55.18%）、異龍腦（40.99%）、1，3，3-三甲基-二環(huán)［2.2.1］庚烷-2-醇（1.01%）和外型-1，7，7-三甲基-二環(huán)［2.2.1］庚-2-醇（1.01%）。其中，龍腦和異龍腦的相對(duì)百分含量之和達(dá)到96.17%。

3 討論

本研究采用GC-MS法對(duì)制痂酊的揮發(fā)性成分進(jìn)行測(cè)定，研究結(jié)果表明制痂酊主要的揮發(fā)性成分為異龍腦和龍腦。異龍腦和龍腦是組方冰片（合成龍腦）的主要成分，而天然冰片主要含右旋龍腦。由于資源的限制，天然冰片（右旋龍腦）現(xiàn)較少使用。GC–MS靈敏，操作簡(jiǎn)便，可以有效區(qū)分冰片（合成龍腦）與天然冰片（右旋龍腦）。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為冰片有開竅醒神、清熱止痛、生肌之效，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明冰片有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌等功效。這與制痂酊臨床治療燒傷、燙傷的功效密切相關(guān)。

通過文獻(xiàn)檢索分析，雷華平等采用超臨界二氧化碳萃取合并GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)川黃柏中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，鑒定其含有庚醇、棕櫚酸和十八烯酸甲酯；黃芩揮發(fā)性成分的GC-MS分析結(jié)果表明黃芩中檢測(cè)出庚酮、棕櫚酸和（Z，Z）-9，12-十八碳二烯酸等成分?？赏茰y(cè)本實(shí)驗(yàn)中編號(hào)2、3、9、10、11及13可能是制痂酊中黃柏的揮發(fā)性成分。而編號(hào)4、10、11和12則可能為制痂酊中黃芩的成分。但關(guān)于兒茶揮發(fā)油成分的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較少，故實(shí)驗(yàn)結(jié)果中莰烯、外甲基茨尼醇并不能確定是否為兒茶揮發(fā)性成分或是制劑產(chǎn)物，有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。