• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蔗糖、硼酸、Ca2+對大白杜鵑花粉萌發(fā)的影響

    2021-05-06 13:06:53王波周蘭英夏華梅
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年6期
    關(guān)鍵詞:萌發(fā)花粉培養(yǎng)基

    王波 周蘭英 夏華梅

    摘要:探究大白杜鵑花粉萌發(fā)所需的營養(yǎng)液濃度組合,為大白杜鵑的資源保存及雜交育種提供科學(xué)依據(jù)。以大白杜鵑新鮮花粉為試驗(yàn)材料,利用單因子試驗(yàn)比較固體培養(yǎng)基中不同濃度的蔗糖、硼酸、Ca2+對其萌發(fā)的影響,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗(yàn),探討大白杜鵑花粉萌發(fā)的最佳蔗糖、硼酸、Ca2+濃度組合。結(jié)果表明,在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi),蔗糖、硼酸、Ca2+對大白杜鵑花粉萌發(fā)均起到促進(jìn)作用,但是超過一定質(zhì)量濃度時則起抑制作用,最適濃度分別為10%、0005%、0.002%。蔗糖、硼酸和Ca2+這3個因素的綜合作用對大白杜鵑花粉萌發(fā)有顯著影響,大白杜鵑花粉的最適培養(yǎng)基為10%蔗糖+0.005%硼酸+0.002%Ca2+。

    關(guān)鍵詞:大白杜鵑;花粉;萌發(fā);培養(yǎng)基

    大白杜鵑(Rhododendron decorum Franch.),別稱大白花杜鵑,是杜鵑花科(Ericaceae)杜鵑花屬(Rhododendron L.)木本植物,在我國主要分布在四川、云南、貴州、西藏等地,在四川省會理縣生長于龍肘山海拔1 900~2 100 m處,種群成片分布。大白杜鵑花簇多花,形如繡球,色澤艷麗;是杜鵑花中少有的香花品種,具有很高的觀賞價值;分布廣泛、海拔較低,是香花育種的理想親本。張敬麗等研究發(fā)現(xiàn),馬纓花(Rhododendron delavayi Franch.)與大白花杜鵑進(jìn)行雜交后,雜交種能夠結(jié)出可育的種子[1]。此外,大白杜鵑還可供食用和藥用[2-3],開發(fā)利用前景廣闊。但是,人為干預(yù)使其生境遭到嚴(yán)重破壞,資源日趨受到威脅,環(huán)境干旱使野生杜鵑結(jié)實(shí)率降低[4],大白杜鵑物種資源的保存迫在眉睫。

    目前,國內(nèi)外對大白杜鵑的研究主要集中在生態(tài)分布、染色質(zhì)組成[5]、營養(yǎng)成分[2]和組織培養(yǎng)[6]等方面,有關(guān)大白杜鵑花粉的儲存及其生活力、萌發(fā)條件的研究未見報道。目前已有少數(shù)其他杜鵑種花粉的研究,如徐芬芬等對毛杜鵑(Rhododendron pulchrum)花粉離體萌發(fā)特性的研究發(fā)現(xiàn),毛杜鵑花粉萌發(fā)的最適硼酸質(zhì)量濃度為10 mg/L,培養(yǎng)7 h后花粉萌發(fā)情況穩(wěn)定[7]。李玉萍等以滿山紅、映山紅、馬銀花、錦繡杜鵑的新鮮花粉為試驗(yàn)材料,測定不同液體培養(yǎng)基和儲藏方法下的花粉萌發(fā)力,發(fā)現(xiàn)杜鵑花花粉的適宜培養(yǎng)基配方為100 g/L蔗糖+20 mg/L 硼酸+20 mg/L CaCl2[8]。目前,關(guān)于其他植物花粉萌發(fā)的研究非常多,不同植物花粉萌發(fā)要求的最適培養(yǎng)基組合和濃度不同,但適量的蔗糖、硼酸、CaCl2會提高多數(shù)植物花粉的萌發(fā)率。目前,關(guān)于大白杜鵑花粉萌發(fā)的研究未見報道,本試驗(yàn)用蔗糖、硼酸及CaCl2 3個因素組成的固體培養(yǎng)基研究大白杜鵑花粉的萌發(fā)力,旨在找出適合大白杜鵑花粉萌發(fā)的營養(yǎng)液濃度組合,為大白杜鵑的資源保存及雜交育種提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    本研究所用材料于2013年5月9日采自四川省會理縣龍肘山海拔1 900~2 100 m處。選擇20株盛花期大白杜鵑植株上即將開放的100朵花,用濕毛巾包裹后放入裝有冰塊的潔凈紙盒內(nèi)冷藏并迅速帶回實(shí)驗(yàn)室,任其花藥自然開裂,收集花粉,并將花粉充分混勻,避免個體植株花藥不同引起的花粉生活力差異。將收集的花粉裝入花粉瓶中,于 4 ℃ 低溫冷藏。

    1.2 培養(yǎng)基配方和制作方法

    單因素試驗(yàn)中各因素濃度水平[9-10]如表1所示,以同樣濃度的空白培養(yǎng)基作為對照。在進(jìn)行單因素試驗(yàn)后,總結(jié)分析各因素濃度對花粉萌發(fā)的影響,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行L16(43)正交試驗(yàn)。按濃度配方配制100 mL溶液,加入搪瓷碗中,煮沸后向其中加入1 g瓊脂粉,攪拌至充分溶解,冷卻后作為花粉接種用固體培養(yǎng)基。

    1.3 花粉培養(yǎng)觀測方法

    在雙孔凹型玻片孔內(nèi)滴1滴清水以保持濕度,在蓋玻片上滴入適量培養(yǎng)基,將花粉均勻播種在培養(yǎng)基上,再將有培養(yǎng)基的一面朝下蓋在玻片孔上,每個培養(yǎng)基設(shè)5個重復(fù)。將玻片放入25 ℃人工培養(yǎng)箱中,在黑暗條件下培養(yǎng)。每隔2 h觀測1次,發(fā)現(xiàn)花粉萌發(fā)后,每隔1 h觀測1次,最終從2次測定萌發(fā)率基本相同開始測定萌發(fā)率。大白杜鵑花粉為四合體,單?;ǚ蹫閳A球形[11-12],在統(tǒng)計花粉萌發(fā)數(shù)時,只要有1個花粉萌發(fā)即視為萌發(fā),以花粉管長度超過花粉直徑作為判斷萌發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)。每個玻片觀察5個視野,每個視野觀察的花粉數(shù)不少于30粒,記錄花粉的萌發(fā)數(shù)量,花粉萌發(fā)率的計算公式如下:

    花粉萌發(fā)率=已萌發(fā)的花粉粒數(shù)/測定的花粉??倲?shù)×100%。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,并用SPSS軟件對正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因變量多因素方差分析,若差異顯著,則在方差分析的基礎(chǔ)上用新復(fù)極差法(SSR)進(jìn)行因素水平間的多重比較。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 大白杜鵑花粉萌發(fā)的基本情況

    將大白杜鵑花粉于25 ℃黑暗條件下處理3 h后,四合體吸水膨大,極面觀為三裂球形;6 h后花粉管從寬大的萌發(fā)溝內(nèi)長出,并逐漸增長;10 h后萌發(fā)基本趨于穩(wěn)定,花粉管的長度達(dá)到最長。在按試驗(yàn)對照條件處理12 h后,花粉的萌發(fā)效果見圖1。

    2.2 單因素試驗(yàn)中不同濃度蔗糖、硼酸、CaCl2對大白杜鵑花粉萌發(fā)的影響

    2.2.1 蔗糖對大白杜鵑花粉萌發(fā)的影響 由圖2可知,不同濃度蔗糖對大白杜鵑花粉萌發(fā)有不同程度的影響。當(dāng)蔗糖濃度為0、2%、5%、10%時,花粉萌發(fā)率隨著蔗糖濃度的升高而提高,分別為688%、20.77%、54.91%、74.23%,最大萌發(fā)率為74.23%;但當(dāng)蔗糖濃度超過10%以后,花粉萌發(fā)率隨著蔗糖濃度的增加而下降。綜上,大白杜鵑花粉萌發(fā)的適宜蔗糖濃度為10%。

    2.2.2 硼酸對大白杜鵑花粉萌發(fā)的影響 由圖3可知,不同濃度硼酸對大白杜鵑花粉萌發(fā)有不同程度的影響。當(dāng)硼酸濃度為0~0.005%時,花粉萌發(fā)率隨著硼酸濃度的升高而提高,最大萌發(fā)率為5757%;但當(dāng)硼酸濃度超過0.005%以后,花粉萌發(fā)率隨著硼酸濃度的增加而下降。綜上,大白杜鵑花粉萌發(fā)的適宜硼酸濃度為0.005%。

    2.2.3 CaCl2對大白杜鵑花粉萌發(fā)的影響 由圖4可知,不同濃度CaCl2對大白杜鵑花粉萌發(fā)有不同程度的影響。當(dāng)CaCl2濃度為0~0.002%時,花粉萌發(fā)率隨著CaCl2濃度的升高而提高,最大萌發(fā)率為39.47%; 但當(dāng)CaCl2濃度超過0.002%以后, 花粉萌發(fā)率隨著CaCl2濃度的增加而下降。綜上,大白杜鵑花粉萌發(fā)的適宜CaCl2濃度為0.002%,并且高濃度的CaCl2會明顯抑制大白杜鵑的花粉萌發(fā)。

    2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果分析

    單因素試驗(yàn)結(jié)果表明,對照條件下大白杜鵑花粉有少量萌發(fā),表明外源因素不是萌發(fā)的必要因素。如表2所示,大白杜鵑花粉在10%蔗糖+0005%硼酸+0.001%CaCl2培養(yǎng)基配方下的萌發(fā)率最高,達(dá)到86.69%。極差分析結(jié)果顯示,對花粉萌發(fā)率影響的因素排序?yàn)檎崽?、硼酸、CaCl2,極差依次為167.74、135.26、58.06,相應(yīng)的較優(yōu)水平分別為A3(10%)、B3(0.005%)、C2(0.002%),由較優(yōu)水平組合而成的最佳培養(yǎng)基配方為10%蔗糖+0005%硼酸+0.002%CaCl2,與單因素試驗(yàn)得出的正交試驗(yàn)結(jié)果最高的萌發(fā)率培養(yǎng)基配方一致。正交試驗(yàn)結(jié)果表明,蔗糖、硼酸和CaCl2在一定濃度范圍內(nèi)共同作用時對大白杜鵑花粉的萌發(fā)有一定促進(jìn)作用;大白杜鵑花粉萌發(fā)的最適培養(yǎng)基配方為10%蔗糖+0.005%硼酸+0.002%CaCl2。

    3 結(jié)論與討論

    很多研究發(fā)現(xiàn),植物花粉離體萌發(fā)的影響因素很多,內(nèi)因包括供體植株基因型、發(fā)育時期、花粉生活力等,外因如培養(yǎng)基固液形態(tài)、瓊脂濃度、培養(yǎng)溫度和濕度、光照條件、培養(yǎng)基營養(yǎng)種類和濃度等[13],其中蔗糖、硼酸及一些礦質(zhì)元素如外源Ca2+等的參與是比較重要的,是誘導(dǎo)離體花粉萌發(fā)的基本條件。在本試驗(yàn)中,對照處理的花粉也具有一定的萌發(fā)率,由此或可大膽推測,花粉可能本身就含有少量蔗糖、硼酸及Ca2+。目前已知,細(xì)胞壁是植物細(xì)胞最大的鈣庫,用X射線分析鈣在花粉粒中的分布結(jié)果也顯示,多數(shù)植物花粉壁上含有少量鈣[14]。

    一般認(rèn)為,蔗糖在花粉萌發(fā)過程中的作用有2個,一是為花粉萌發(fā)和花粉管的生長提供能源和碳源,二是調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境滲透壓[15-16]。試驗(yàn)中一定濃度的蔗糖促進(jìn)大白杜鵑花粉萌發(fā),最適宜的蔗糖濃度為10%,當(dāng)蔗糖濃度過高時,花粉萌發(fā)率開始下降,這與徐芬芬等的研究結(jié)果[17]相似。這有可能是因?yàn)檫m當(dāng)濃度的蔗糖能維持花粉與培養(yǎng)基之間的滲透平衡,而過高的蔗糖濃度則會導(dǎo)致花粉管破裂產(chǎn)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象,從而造成原生質(zhì)體脫水,抑制花粉萌發(fā)生長,降低萌發(fā)率[18-19]。

    目前許多研究發(fā)現(xiàn),硼作為植物必需的微量元素,在花粉萌發(fā)和花粉管伸長中的主要作用是增加糖的吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)和代謝,以增強(qiáng)花粉管壁的可塑性[20]。在離體條件下,補(bǔ)充一定量的外源硼,可以大大提高其花粉萌發(fā)率。在本試驗(yàn)中,提高硼酸濃度顯著提高了花粉萌發(fā)率,當(dāng)硼酸濃度為0.005%時,大白杜鵑花粉的萌發(fā)率最高。

    鈣離子在生物體的電化學(xué)震蕩理論中被稱為細(xì)胞中調(diào)節(jié)的“第二信使”,鈣離子水平受到環(huán)境中鈣含量和植物自身鈣受體的影響,從而引起一系列生長發(fā)育過程。在花粉的離體培養(yǎng)過程中,Ca2+可以通過多種途徑影響花粉萌發(fā)和花粉管的生長,其中涉及細(xì)胞骨架的組裝、分泌小泡的運(yùn)輸和融合、花粉管頂端的脈沖式生長、花粉管生長方向調(diào)控等各個方面[21-24]。許多研究發(fā)現(xiàn),外源鈣對花粉萌發(fā)和花粉管生長的作用取決于細(xì)胞內(nèi)游離鈣的含量,即在細(xì)胞內(nèi)游離鈣充足或已充分吸收外源鈣時,外源鈣對花粉萌發(fā)和花粉管生長就可能起抑制作用,反之則起促進(jìn)作用。本試驗(yàn)中單因素Ca2+濃度明顯影響大白杜鵑花粉萌發(fā),表明一定程度的外源鈣能促進(jìn)大白杜鵑花粉萌發(fā)和花粉管生長,當(dāng)Ca2+濃度為0.002%時,花粉萌發(fā)率最高,而當(dāng)Ca2+濃度高于0.005%時,花粉萌發(fā)則明顯受到抑制,這與周瑞金等的研究結(jié)果[25]一致。

    通過正交試驗(yàn),得到大白杜鵑花粉萌發(fā)的最適培養(yǎng)基配方是10%蔗糖+0.005%硼酸+0.002% CaCl2,在此條件下花粉萌發(fā)率最高,且遠(yuǎn)超過單因素試驗(yàn)中的最高萌發(fā)率。另外,當(dāng)鈣離子為高水平而硼酸為低水平,或鈣離子為低水平而硼酸為高水平時,兩者表現(xiàn)出負(fù)交互作用。原因可能是單因素之間的交互作用促進(jìn)了花粉萌發(fā),如硼酸可以與蔗糖形成絡(luò)合物,從而促進(jìn)果膠物質(zhì)的合成、糖的吸收,進(jìn)而更大程度地促進(jìn)花粉萌發(fā)[15]。此外,硼還可能通過影響關(guān)鍵酶活性與Ca2+濃度梯度相關(guān)聯(lián),影響其花粉管細(xì)胞壁的構(gòu)建與生長[26]。試驗(yàn)結(jié)果顯示,蔗糖對花粉萌發(fā)影響最大,硼酸次之,Ca2+對花粉萌發(fā)有促進(jìn)作用,但影響比硼酸小。鈣離子對花粉萌發(fā)的影響較硼酸小的結(jié)論得到了其他研究者的支持,一般認(rèn)為花粉細(xì)胞內(nèi)鈣離子較多而硼素較少,因而萌發(fā)時胞外硼素的影響較胞外鈣離子的影響高[27]。

    通過花期噴施具有促進(jìn)花粉萌發(fā)和花粉管生長的物質(zhì)的方法來提高結(jié)實(shí)率和促進(jìn)種子發(fā)育、膨大是生產(chǎn)上的一項(xiàng)重要措施。本研究結(jié)果表明,大白杜鵑花粉萌發(fā)的最適培養(yǎng)基組合10%蔗糖+0005%硼酸+0.002%CaCl2可為大白杜鵑雜交育種提供技術(shù)上的參考。在花期噴灑蔗糖、硼酸、CaCl2或者其三者組合有助于大白杜鵑結(jié)實(shí),而在授粉過程中噴灑含有蔗糖、硼酸、CaCl2的花粉營養(yǎng)液的方法是輔助授粉的較好手段。但在實(shí)際生產(chǎn)中,由于營養(yǎng)液對花粉萌發(fā)的作用可能還與樹齡和溫度等其他因素有關(guān),因此營養(yǎng)液的適宜濃度應(yīng)根據(jù)環(huán)境條件經(jīng)試驗(yàn)而定。

    參考文獻(xiàn):

    [1]張敬麗,張長芹,吳之坤,等. 探討種間傳粉在杜鵑花屬自然雜交育種形成中的應(yīng)用[J]. 生物多樣性,2007,15(6):658-665.

    [2]唐丹林,張光凡,陳孝泉. 大白杜鵑尖葉杜娟的營養(yǎng)成分的研究[J]. 四川大學(xué)學(xué)報,1992,29(2):316-318.

    [3]中國科學(xué)院《中國植物志》編委會. 中國植物志:第五十七卷 第二分冊[M]. 北京:科學(xué)出版社,1994.

    [4]黃承玲,陳訓(xùn)高,貴 龍. 3種高山杜鵑對持續(xù)干旱的生理響應(yīng)及抗旱性評價[J]. 林業(yè)科學(xué),2011,47(6):48-55.

    [5]張洪淵,劉克武,楊守忠,等. 大白杜鵑染色質(zhì)組成成分的研究[J]. 廣西植物,1990,10(1):49-53.

    [6]羅 彭,莊 平,白 潔. 大白杜鵑、美容杜鵑和喇叭杜鵑的組織培養(yǎng)[J]. 植物生理學(xué)通訊,2007,43(2):326.

    [7]徐芬芬,崔 燕,謝洪云,等. 毛杜鵑花粉離體培養(yǎng)萌發(fā)特性研究[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(1):26-27.

    [8]李玉萍,王燕青,羅鳳霞,等. 測定杜鵑花花粉萌發(fā)力的液體培養(yǎng)基和儲藏方法研究[J]. 金陵科技學(xué)院學(xué)報,2012,28(3):56-60.

    [9]張超儀,耿興敏. 六種杜鵑花屬植物花粉生活力測定方法的比較研究[J]. 植物科學(xué)學(xué)報,2010,30(1):92-99.

    [10]韓金多,謝洪云,程新平,等. 鹽脅迫對毛杜鵑花粉萌發(fā)的影響[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科技,2011(21):106-107.

    [11]周蘭英,王永清,張 麗. 26種杜鵑屬植物花粉形態(tài)及分類學(xué)研究[J]. 林業(yè)科學(xué),2008,44(2):55-64.

    [12]高連明,張長芹,韋仲新,等. 杜鵑花花族花粉形態(tài)及其系統(tǒng)學(xué)意義[J]. 云南植物研究,2002,24(4):471-482.

    [13]劉雪蓮,李慶玲,秦佳梅,等. 不同培養(yǎng)基對紫丁香花粉離體萌發(fā)的影響[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2010,38(7):61-63.

    [14]龔 明,曹宗龔. 鈣和鈣調(diào)素對花粉萌發(fā)和花粉管生長的調(diào)控[J]. 植物生理學(xué)通訊,1999,31(5):321-328.

    [15]杜玉虎,綦 影,蔣錦標(biāo),等. 蔗糖、鈣和硼對榆葉梅花粉離體萌發(fā)及花粉管生長的影響[J]. 北方園藝,2008(8):106-109.

    [16]杜玉虎,張琳琳,蔣錦標(biāo),等. 蔗糖和礦質(zhì)營養(yǎng)對榛子花粉離體萌發(fā)和花粉管生長的影響[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報,2008,10(2):1-3.

    [17]滕長才,張永成. 硼酸和蔗糖對馬鈴薯花粉離體萌發(fā)的影響[J]. 種子,2009,28(2):15-16,20.

    [18]年玉欣,羅鳳霞,張 穎,等. 測定百合花粉生命力的液體培養(yǎng)基研究[J]. 園藝學(xué)報,2005,32(5):922-925.

    [19]朱展望,張改生,牛 娜. 小麥花粉的離體萌發(fā)研究[J]. 麥類作物學(xué)報,2007,27(1):12-15.

    [20]楊小冬,孫素琴,李一勤. 硼缺乏導(dǎo)致花粉管細(xì)胞壁多糖分布的改變[J]. 植物學(xué)報,1999,41(11):1169-1176.

    [21]Geitmann A,Cresti M. Ca2+ channels control the rapid expansions in pulsating growth of Petunia hybrida pollen tubes[J]. Journal of Plant Physiology,1998,152(4/5):439-447.

    [22]Malho R,Read N D,Pais M S,et al. Role of cytosolic free calcium in the reorientat ion of pollen tube growth[J]. Plant Journal,1994,5(3):331-341.

    [23]盛仙永,胡正海. Ca2+、pH在花粉及萌發(fā)花粉管生長中的作用研究進(jìn)展[J]. 西北植物學(xué)報,2005,25(1):194-199.

    [24]周建濤,姜雪婷,李 慧,等. 鈣調(diào)素及其抗血清對梨花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報,2016,32(2):437-441.

    [25]周瑞金,李桂榮,張傳來. 培養(yǎng)基成分對梨花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響[J]. 河北林果研究,2009,24(4):420-422.

    [26]田翠婷,呂洪飛,王 鋒,等. 培養(yǎng)基組分對青杄離體花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2007,29(1):47-52.

    [27]張紹鈴,陳迪新,康 瑯,等. 培養(yǎng)基組分及pH值對梨花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響[J]. 西北植物學(xué)報,2005(2):225-230.李大命,唐晟凱,劉燕山,等. 滆湖鰱、鳙種群生長特征及起捕規(guī)格[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2021,49(6):134-139.

    猜你喜歡
    萌發(fā)花粉培養(yǎng)基
    花粉的煩惱
    哈哈畫報(2022年8期)2022-11-23 06:21:20
    蜜蜂有禮讓行為
    花粉過濾器
    脅迫對不同種源構(gòu)樹種子萌發(fā)及幼苗生長的影響
    根域加溫對塑料大棚內(nèi)葡萄芽萌發(fā)及生理特性的影響
    花粉過敏
    蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
    各種培養(yǎng)基制作應(yīng)注意的幾個事項(xiàng)
    KBM581培養(yǎng)基:人T細(xì)胞誘導(dǎo)與擴(kuò)增培養(yǎng)基應(yīng)用指南
    藥劑浸種對補(bǔ)骨脂種子萌發(fā)影響初探
    自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 91aial.com中文字幕在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 伦理电影大哥的女人| h视频一区二区三区| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产精品蜜桃在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲av在线观看美女高潮| 日本欧美视频一区| 久久狼人影院| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 在线播放无遮挡| 国产精品人妻久久久久久| 国产又色又爽无遮挡免| 国产在线视频一区二区| 老司机影院毛片| 色5月婷婷丁香| www.av在线官网国产| 成人免费观看视频高清| .国产精品久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产av码专区亚洲av| 亚洲av日韩在线播放| 中文字幕人妻丝袜制服| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩人妻高清精品专区| 久久99精品国语久久久| 国产成人aa在线观看| 久久久精品区二区三区| 丝袜喷水一区| 国产精品人妻久久久久久| 色网站视频免费| 亚洲精品视频女| 日韩一本色道免费dvd| 欧美日韩成人在线一区二区| 欧美精品一区二区免费开放| 精品国产乱码久久久久久小说| 少妇丰满av| 久久久久久久久久久久大奶| 在线看a的网站| 大香蕉久久成人网| 免费观看a级毛片全部| av免费观看日本| 亚洲av.av天堂| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲内射少妇av| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲情色 制服丝袜| 毛片一级片免费看久久久久| 99久久精品国产国产毛片| 老司机亚洲免费影院| 国产黄色视频一区二区在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 99热这里只有是精品在线观看| 伊人久久国产一区二区| 午夜影院在线不卡| 久久久欧美国产精品| 99国产精品免费福利视频| 亚洲中文av在线| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产免费一级a男人的天堂| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲国产av影院在线观看| 国产精品欧美亚洲77777| 青青草视频在线视频观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美xxxx性猛交bbbb| 超碰97精品在线观看| 99久久人妻综合| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品国产av在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产精品.久久久| 欧美日韩综合久久久久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 制服丝袜香蕉在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 成人手机av| 日本色播在线视频| 我的女老师完整版在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 午夜免费鲁丝| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 在线观看www视频免费| 国产精品蜜桃在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 精品亚洲成国产av| 乱码一卡2卡4卡精品| 在线观看免费视频网站a站| 国产伦理片在线播放av一区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 3wmmmm亚洲av在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 大片电影免费在线观看免费| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 一本久久精品| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲成人一二三区av| 乱码一卡2卡4卡精品| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 2021少妇久久久久久久久久久| 老司机影院成人| 99热全是精品| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产免费又黄又爽又色| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产av一区二区精品久久| 国产成人精品福利久久| 全区人妻精品视频| 午夜日本视频在线| 少妇人妻 视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲国产色片| 欧美日韩亚洲高清精品| 精品一区二区三卡| 99re6热这里在线精品视频| 国产高清不卡午夜福利| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久久久久久久大av| 欧美性感艳星| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久久久精品性色| 国产精品一二三区在线看| 黑人猛操日本美女一级片| 久久综合国产亚洲精品| av电影中文网址| 午夜精品国产一区二区电影| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 国产成人精品一,二区| 久久久久久久久久成人| 久久99一区二区三区| 人人妻人人澡人人看| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 男人爽女人下面视频在线观看| 在线观看www视频免费| 欧美97在线视频| 国产伦理片在线播放av一区| 插逼视频在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久影院123| 久久99热这里只频精品6学生| 久久久久网色| 午夜福利视频在线观看免费| 中国美白少妇内射xxxbb| 女性生殖器流出的白浆| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 又大又黄又爽视频免费| 99久久中文字幕三级久久日本| 制服人妻中文乱码| 亚洲高清免费不卡视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产探花极品一区二区| 国产免费一级a男人的天堂| 精品国产乱码久久久久久小说| 一级a做视频免费观看| 一区二区三区四区激情视频| 五月天丁香电影| av线在线观看网站| 亚洲人成网站在线观看播放| 免费高清在线观看日韩| 大香蕉久久成人网| 久久久国产一区二区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 99九九在线精品视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产一区有黄有色的免费视频| 黄色配什么色好看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲av成人精品一二三区| 视频中文字幕在线观看| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲三级黄色毛片| 久久久a久久爽久久v久久| 成人免费观看视频高清| 国产极品天堂在线| 夫妻午夜视频| 一级毛片我不卡| 高清毛片免费看| 欧美激情国产日韩精品一区| 人成视频在线观看免费观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 成人漫画全彩无遮挡| 51国产日韩欧美| 成年女人在线观看亚洲视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 中文欧美无线码| 国产男女内射视频| 一区二区三区乱码不卡18| 中文字幕制服av| 高清视频免费观看一区二区| 男的添女的下面高潮视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 人妻人人澡人人爽人人| 国产精品蜜桃在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美精品一区二区大全| 日韩三级伦理在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲av在线观看美女高潮| videosex国产| 久久99蜜桃精品久久| 国产片内射在线| 99久国产av精品国产电影| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久久久久久久久久久免费av| 午夜av观看不卡| 亚洲精品国产色婷婷电影| 五月天丁香电影| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久国产精品大桥未久av| 久久精品国产自在天天线| 中文字幕av电影在线播放| 免费看av在线观看网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 在线看a的网站| 看非洲黑人一级黄片| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 高清不卡的av网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 少妇精品久久久久久久| 久久久精品免费免费高清| 在线播放无遮挡| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久亚洲精品成人影院| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产免费视频播放在线视频| 国产一级毛片在线| 亚洲欧美成人精品一区二区| 日韩一本色道免费dvd| 99热网站在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| a级毛片黄视频| 国产在线一区二区三区精| 看免费成人av毛片| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲情色 制服丝袜| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久毛片免费看一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产一区二区在线观看av| 最后的刺客免费高清国语| 精品亚洲成国产av| 边亲边吃奶的免费视频| 午夜久久久在线观看| 久久人人爽人人片av| 久久毛片免费看一区二区三区| 亚洲精品,欧美精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产精品人妻久久久久久| 美女大奶头黄色视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 男女高潮啪啪啪动态图| 人妻少妇偷人精品九色| 精品视频人人做人人爽| 久久热精品热| 夫妻午夜视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 视频区图区小说| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 日日啪夜夜爽| 大陆偷拍与自拍| 久久久久视频综合| 最后的刺客免费高清国语| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲高清免费不卡视频| 免费黄频网站在线观看国产| 天堂中文最新版在线下载| 2018国产大陆天天弄谢| 精品人妻熟女av久视频| 少妇的逼水好多| 亚洲av国产av综合av卡| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久精品久久久久久久性| 中国美白少妇内射xxxbb| 久久久午夜欧美精品| 搡老乐熟女国产| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲性久久影院| 中文欧美无线码| 成人无遮挡网站| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产成人精品福利久久| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 嫩草影院入口| 免费少妇av软件| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 成人毛片a级毛片在线播放| 色哟哟·www| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲国产精品999| 亚洲成人av在线免费| 精品久久久久久电影网| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产精品久久久久成人av| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 久久鲁丝午夜福利片| 久久99精品国语久久久| 欧美性感艳星| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 全区人妻精品视频| 多毛熟女@视频| 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 草草在线视频免费看| 亚洲av免费高清在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| av播播在线观看一区| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品久久久久久久久免| 午夜福利,免费看| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产成人a∨麻豆精品| 97在线人人人人妻| 满18在线观看网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 纯流量卡能插随身wifi吗| 夫妻性生交免费视频一级片| 精品久久久久久久久av| 久热久热在线精品观看| 亚洲av二区三区四区| 夫妻午夜视频| 久热久热在线精品观看| 黑丝袜美女国产一区| 多毛熟女@视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产成人精品在线电影| av免费在线看不卡| 婷婷色综合www| 少妇的逼水好多| 最新中文字幕久久久久| 亚洲欧美清纯卡通| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品久久久久久久久亚洲| 我要看黄色一级片免费的| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲国产精品一区三区| 精品亚洲成a人片在线观看| 22中文网久久字幕| av国产精品久久久久影院| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 一级毛片电影观看| 中文字幕亚洲精品专区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 久久久久人妻精品一区果冻| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 999精品在线视频| 天堂中文最新版在线下载| av天堂久久9| 九九爱精品视频在线观看| 日本黄大片高清| 搡老乐熟女国产| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产女主播在线喷水免费视频网站| 精品久久国产蜜桃| 在线观看www视频免费| 免费观看在线日韩| 伦理电影免费视频| 欧美成人午夜免费资源| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产综合精华液| 999精品在线视频| 人体艺术视频欧美日本| 欧美少妇被猛烈插入视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产成人精品无人区| 18禁在线播放成人免费| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久热精品热| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产成人freesex在线| 午夜av观看不卡| 嫩草影院入口| 久热这里只有精品99| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 欧美三级亚洲精品| 看非洲黑人一级黄片| 久久久久人妻精品一区果冻| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日本欧美视频一区| 九九在线视频观看精品| 一区二区av电影网| 国产成人免费无遮挡视频| 美女视频免费永久观看网站| 人妻一区二区av| 久久久久久久久久久久大奶| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 热99国产精品久久久久久7| 免费少妇av软件| 久久久久久久久久人人人人人人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 男女高潮啪啪啪动态图| 人妻系列 视频| 国产免费福利视频在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 中文欧美无线码| av不卡在线播放| 不卡视频在线观看欧美| 一边亲一边摸免费视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 天天操日日干夜夜撸| 在线观看免费高清a一片| 久久婷婷青草| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 简卡轻食公司| 欧美最新免费一区二区三区| 久久综合国产亚洲精品| 精品视频人人做人人爽| 亚洲美女视频黄频| 免费黄色在线免费观看| 老司机影院成人| 丰满少妇做爰视频| 亚洲久久久国产精品| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 乱人伦中国视频| 午夜av观看不卡| 简卡轻食公司| 九九在线视频观看精品| xxxhd国产人妻xxx| 午夜免费男女啪啪视频观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲精品一区蜜桃| 日本色播在线视频| 久久精品国产亚洲网站| 中文天堂在线官网| 春色校园在线视频观看| 色94色欧美一区二区| 9色porny在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 一区二区av电影网| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲成色77777| 黄片播放在线免费| 两个人免费观看高清视频| 国产精品免费大片| 久久久国产欧美日韩av| 人人妻人人澡人人看| 免费看av在线观看网站| av网站免费在线观看视频| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲中文av在线| 国精品久久久久久国模美| 中国美白少妇内射xxxbb| 男女边吃奶边做爰视频| 丁香六月天网| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产爽快片一区二区三区| 超色免费av| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久韩国三级中文字幕| 99国产精品免费福利视频| 国产精品一区二区在线不卡| 国产免费又黄又爽又色| 精品一区二区免费观看| 高清毛片免费看| 美女主播在线视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲精品视频女| 女性被躁到高潮视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 在线观看免费高清a一片| 尾随美女入室| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产成人精品一,二区| 最黄视频免费看| 性色av一级| 成人手机av| 国产69精品久久久久777片| 婷婷色麻豆天堂久久| 九色亚洲精品在线播放| 母亲3免费完整高清在线观看 | 看免费成人av毛片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲无线观看免费| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久婷婷青草| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 日本-黄色视频高清免费观看| 丝袜美足系列| 看免费成人av毛片| av国产精品久久久久影院| 人妻一区二区av| 日韩强制内射视频| 99久久精品一区二区三区| a级毛片免费高清观看在线播放| 蜜桃在线观看..| 18禁在线播放成人免费| 久久久久久久久久成人| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 黄色配什么色好看| 成人无遮挡网站| 国产精品久久久久久久电影| 最后的刺客免费高清国语| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产在视频线精品| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 亚洲人成77777在线视频| 好男人视频免费观看在线| 欧美最新免费一区二区三区| 男男h啪啪无遮挡| 国产精品.久久久| 在线观看免费高清a一片| 成年人免费黄色播放视频| 久久青草综合色| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 18禁在线播放成人免费| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 精品国产国语对白av| 岛国毛片在线播放| 国产精品久久久久久av不卡| 99精国产麻豆久久婷婷| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品少妇久久久久久888优播| 99re6热这里在线精品视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 尾随美女入室| 精品一区在线观看国产| 久久久精品免费免费高清| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久欧美国产精品| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久久久久久久久成人| 天堂8中文在线网| 伊人久久精品亚洲午夜| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲经典国产精华液单| 国产免费视频播放在线视频| videosex国产| 亚洲国产最新在线播放| 免费观看在线日韩| 精品一区二区三区视频在线| av网站免费在线观看视频| 久久久久精品性色| 交换朋友夫妻互换小说| 免费黄色在线免费观看| 在线观看免费日韩欧美大片 | 亚洲av中文av极速乱| 一边摸一边做爽爽视频免费| 在线观看免费日韩欧美大片 | av免费观看日本| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久久久伊人网av| 精品亚洲成a人片在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 色5月婷婷丁香| 亚洲色图综合在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩免费高清中文字幕av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 黄色视频在线播放观看不卡| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲av综合色区一区| 99热国产这里只有精品6| 91成人精品电影| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 在线观看美女被高潮喷水网站| 不卡视频在线观看欧美| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久久久久久久人人人人人人| 最后的刺客免费高清国语| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 日韩人妻高清精品专区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久精品国产自在天天线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 赤兔流量卡办理| 天堂8中文在线网| 国产成人精品在线电影| 国产在视频线精品| 久久99一区二区三区| 性色av一级| 日韩制服骚丝袜av| 午夜影院在线不卡| 欧美国产精品一级二级三级| 国产探花极品一区二区| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久精品区二区三区| 一区在线观看完整版| av线在线观看网站| 一级片'在线观看视频| 亚洲性久久影院| 99九九在线精品视频| 久久热精品热|