聚多巴胺納米纖維膜固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)淡水魚(yú)中四環(huán)素類和氟喹諾酮類藥物殘留

梁思慧, 戴海蓉, 張鏵尹, 李 建, 張秋萍, 許 茜,3*, 王春民*

(1. 東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系, 江蘇 南京 210009; 2. 蘇州市疾病預(yù)防控制中心, 江蘇 蘇州 215100; 3. 東南大學(xué)環(huán)境與醫(yī)學(xué)工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 江蘇 南京 210009)

水產(chǎn)品是優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、多種不飽和脂肪酸等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要食物來(lái)源,為滿足人們的食用需求,多采用集約化養(yǎng)殖,這種高密度養(yǎng)殖也給防疫帶來(lái)了壓力[1,2]。四環(huán)素類和氟喹諾酮類藥物是常用的抗菌類藥物,在水產(chǎn)品中的殘留檢出率也較高,對(duì)消費(fèi)者的健康有潛在風(fēng)險(xiǎn)[3]。因此,許多國(guó)家和組織,包括美國(guó)、中國(guó)、日本、歐盟(EU)等均建立了水產(chǎn)品等動(dòng)物源性食品中藥物的最大殘留限量(MRL)[4-8],作為食品安全監(jiān)測(cè)工作的依據(jù)。

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)是動(dòng)物源性食品中藥物殘留檢測(cè)的主要方法,但由于藥物殘留水平較低(μg/mL或μg/L),且實(shí)際樣品中脂肪、蛋白質(zhì)等常嚴(yán)重抑制質(zhì)譜的電離效率,進(jìn)而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度[9,10],因此,UPLC-MS/MS檢測(cè)前必須進(jìn)行樣品預(yù)處理,以去除雜質(zhì)、富集目標(biāo)物。在我國(guó)檢測(cè)水產(chǎn)品中獸藥殘留的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[11-13]和相關(guān)的研究報(bào)道[14-16]中,固相萃取(SPE)是最常采用的樣品前處理方法。SPE技術(shù)主要基于萃取介質(zhì)對(duì)目標(biāo)物的吸附作用,因此新型吸附介質(zhì)的開(kāi)發(fā)應(yīng)用成為其重要的發(fā)展方向之一[17-20]。納米纖維(nanofibers, NFs)是最典型的納米材料之一,靜電紡絲法(electrospinning,簡(jiǎn)稱電紡)作為制備N(xiāo)Fs的通用方法,為制得納米纖維膜(NFsM)提供了技術(shù)支持[21]。根據(jù)目標(biāo)物性質(zhì)和檢測(cè)樣品的特點(diǎn),NFsM可被功能化修飾,獲得的功能化NFsM是一種新型高效的SPE介質(zhì)[22]。筆者課題組自2008年起即開(kāi)展了基于功能化NFsM的SPE工作[23-30],研制了多種吸附和解吸附效率雙高的功能化NFsM,并在食品安全分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、生物樣本分析等方面實(shí)現(xiàn)了良好應(yīng)用。

聚多巴胺(PDA)的結(jié)構(gòu)中含有兒茶酚和胺類官能團(tuán),是由鹽酸多巴胺在弱堿性溶液(pH>7.5)中通過(guò)氧化自聚合而合成的[31]。PDA具有良好的親水性和生物相容性,可與目標(biāo)分析物形成各種相互作用,如π-π堆積、靜電作用、疏水作用和氫鍵等[32]。因此,PDA被認(rèn)為是的一種新型吸附介質(zhì)[33,34],已應(yīng)用于SPE[35]、固相微萃取(SPME)[36]等樣品前處理方法。PDA修飾后的NFsM是一種“強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合”的高效SPE介質(zhì),其兼具豐富的吸附機(jī)制、快速的傳質(zhì)效能和高效的基質(zhì)凈化能力。多項(xiàng)研究提示[36-38], PDA功能化修飾的納米纖維有望成為一種優(yōu)越的SPE吸附介質(zhì),但將其應(yīng)用于動(dòng)物源性食品中藥物殘留檢測(cè)的研究還未見(jiàn)報(bào)道。

本文研制PDA功能化的聚苯乙烯(PS)納米纖維膜(PDA-PS NFsM),建立了基于PDA-PS NFsM的新型SPE方法,聯(lián)合UPLC-MS/MS,檢測(cè)在水產(chǎn)品中檢出率較高的3種四環(huán)素(四環(huán)素、土霉素、金霉素)和3種氟喹諾酮(恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星),對(duì)方法的準(zhǔn)確度和精密度等效能進(jìn)行了評(píng)價(jià),并通過(guò)對(duì)實(shí)際淡水魚(yú)樣品中6種目標(biāo)物的檢測(cè),驗(yàn)證了方法的實(shí)際應(yīng)用性。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

UPLC超高效液相色譜儀、Xevo TQD三重四極桿質(zhì)譜儀(配TQD質(zhì)量檢測(cè)器、Acquity自動(dòng)采樣器、ESI源,美國(guó)Waters公司), Quanta 200 FEG場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡(捷克FEI公司), TENSOR27傅里葉變換紅外光譜儀(日本Shimadzu公司), 24孔固相萃取裝置(美國(guó)Supelco公司), Heraeus Multifuge X1R型臺(tái)式離心機(jī)(美國(guó)Thermo公司)。

聚苯乙烯(Mr260 000)、鹽酸多巴胺(純度為98%)和Tris緩沖溶液購(gòu)于上海阿拉丁有限公司。乙腈和甲醇均為HPLC級(jí),購(gòu)自德國(guó)Merck公司。配制EDTA-McIlvaine’s緩沖液所用試劑十二水合磷酸氫二鈉、一水合檸檬酸、乙二胺四乙酸,以及十二烷基苯磺酸鈉、四氫呋喃和N,N-二甲基甲酰胺均購(gòu)自上海國(guó)藥化工公司。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):四環(huán)素(TET)、金霉素(CTC)、土霉素(OTC)、恩諾沙星(ENR)、環(huán)丙沙星(CIP)、諾氟沙星(NOR),純度均為98.0%,均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

準(zhǔn)確稱取10.0 mg各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),分別溶解于10.0 mL甲醇,配制成質(zhì)量濃度為1 000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。分別取一定體積的儲(chǔ)備溶液,混合,用甲醇稀釋得各目標(biāo)物質(zhì)量濃度均為10 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。用超純水稀釋混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,得到所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。所有的溶液均保存于4 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2 PDA-PS NFsM材料的制備

稱取0.3 g十二烷基苯磺酸鈉,溶于10 mL四氫呋喃中,再加入20 mLN,N-二甲基甲酰胺,混合均勻后,稱取6 g聚苯乙烯粉末溶于上述溶液中,在磁力攪拌器上攪拌至均一溶液。用靜電紡絲法制備納米纖維膜,電壓為19 kV,流速為1.0 mL/h,紡制時(shí)間為0.5 h,即可制得直徑約為(12±1) cm、厚度約為(100±10) μm近似圓形的PS NFsM材料。將鋁箔紙接收板在室溫干燥2 h后揭下,作為基底膜進(jìn)行聚多巴胺修飾。

稱取2 g鹽酸多巴胺,溶于200 mL Tris緩沖液(10 mmol/L, pH 8.5)中,將PS NFsM平鋪于大玻璃平皿中,用上述配制完成的鹽酸多巴胺溶液將其完全浸潤(rùn),保鮮膜密封后,于60 ℃避光水浴反應(yīng)12 h后,用超純水清洗至浸出液澄清,烘干,得到厚度約為190 μm的PDA-PS NFsM材料。

表 1 6種目標(biāo)物的質(zhì)譜參數(shù)

將如上制得的PDA-PS NFsM材料用打孔器裁剪,得到質(zhì)量為(20.0±0.1) mg、直徑為1 cm的PDA-PS NFsM圓片,然后夾在兩個(gè)篩板之間,放入內(nèi)徑為1 cm的潔凈空柱管底部,即得自制SPE小柱,如圖1所示。此SPE柱依次用0.5 mL去離子水、0.5 mL甲酸-乙酸乙酯(含20%甲醇)(1∶99, v/v)和0.5 mL去離子水活化后備用。

圖 1 自制SPE小柱示意圖Fig. 1 Diagram of handmade SPE cartridgePDA-PS NFsM: polydopamine-polystyrene nanofiber mat.

1.3 樣品前處理

在蘇州市姑蘇區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)采集淡水魚(yú)樣品共16份。每份淡水魚(yú)樣品分別取其身體兩面的背部、腹部、尾部魚(yú)肉各約5 g,混合后絞碎成肉糜,置于50 mL離心管中,密塞并準(zhǔn)確標(biāo)記樣品號(hào),于-20 ℃保存,一周內(nèi)完成檢測(cè)。

稱取(2.00±0.05) g室溫下解凍后的魚(yú)肉糜,置于15 mL具塞離心管中,加入2.00 mL提取液(乙腈-EDTA-McIlvaine’s緩沖液(1∶1, v/v)),以2 000 r/min渦旋混合5 min,于4 ℃以11 000 r/min離心5 min。取1 mL上清液,用超純水稀釋至10 mL,得到樣品溶液。將10 mL樣品溶液以3 mL/min的速率通過(guò)1.2節(jié)所述的SPE小柱,用1 mL甲酸-乙酸乙酯(含20%甲醇)(1∶99, v/v)直接洗脫,洗脫液氮吹至干,用0.1 mL 10%甲醇水溶液(含0.2%甲酸)復(fù)溶后,進(jìn)行UPLC-MS/MS檢測(cè)。

1.4 分析條件

1.4.1色譜條件

色譜柱:Acquity UPLC BEH C18柱(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm);柱溫:40 ℃;流動(dòng)相:A為甲醇,B為0.1%甲酸溶液;流速:0.2 mL/min。線性洗脫程序:0～3.0 min, 95%A; 3.0～4.8 min, 95%A～5%A; 4.8～5.0 min, 5%A～95%A; 5.0～5.5 min, 95%A。進(jìn)樣量:5 μL。

1.4.2質(zhì)譜參數(shù)

離子源:ESI源;掃描模式:正離子掃描模式;監(jiān)測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式;毛細(xì)管電壓:3.0 kV,脫溶劑溫度:350 ℃,脫溶劑氣流速:800 L/h。各目標(biāo)物的具體質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

圖 2 PS NFsM和PDA-PS NFsM的傅里葉紅外光譜圖Fig. 2 FT-IR spectra of PS NFsM and PDA-PS NFsM

圖 3 (a)PS NFsM和(b)PDA-PS NFsM的場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡圖Fig. 3 Field emission-SEM images of (a) PS NFsM and (b) PDA-PS NFsM

2 結(jié)果與討論

2.1 PDA-PS NFsM材料的表征

對(duì)制得的PS NFsM和PDA-PS NFsM材料進(jìn)行了傅里葉紅外光譜和場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡表征。如圖2所示,在1 287、1 488、1 615和3 200 cm-1處出現(xiàn)了強(qiáng)的吸收峰,分別對(duì)應(yīng)氨基上N-H的振動(dòng)吸收峰、芳香環(huán)的特征峰、C=C的特征峰和鄰苯二酚上-OH的吸收峰,說(shuō)明PDA-PS NFsM材料制備成功。PS NFsM表面光滑,平均直徑為700～900 nm(見(jiàn)圖3a)。PDA包覆于PS NFsM形成了核-殼形貌的PDA-PS NFsM(見(jiàn)圖3b),其表面較PS NFsM明顯粗糙,纖維直徑增大,內(nèi)部呈蜂窩狀多孔結(jié)構(gòu)。

2.2 SPE影響因素的考察及條件優(yōu)化

PDA-PS NFsM材料的用量、離子強(qiáng)度、樣品溶液的流速和洗脫液等,都會(huì)對(duì)萃取效率產(chǎn)生影響。以所有目標(biāo)物均未檢出的淡水魚(yú)樣品作為空白樣品,按1.3節(jié)進(jìn)行預(yù)處理,得到空白樣品溶液,在其中加入一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,以回收率為指標(biāo),采用樣品基質(zhì)匹配的加標(biāo)溶液進(jìn)行SPE影響因素的考察及條件優(yōu)化。

2.2.1吸附劑的使用量

考察自制SPE小柱中PDA-PS NFsM材料的質(zhì)量對(duì)6種目標(biāo)化合物萃取效率的影響。在對(duì)基底膜進(jìn)行PDA修飾時(shí),改變60 ℃避光水浴的反應(yīng)時(shí)間(3、6、9、12和15 h),即可得到厚度約為130、150、170、190、210 μm的PDA-PS NFsM材料,然后使用內(nèi)徑為1 cm的打孔器獲得質(zhì)量分別為(5.0±0.1)、(15.0±0.1)、(20.0±0.1)和(25.0±0.1) mg的PDA-PS NFsM圓片。從圖4a可以看出,采用5～20 mg PDA-PS NFsM材料時(shí),回收率呈上升趨勢(shì),采用20～25 mg時(shí),回收率趨于平穩(wěn),說(shuō)明20 mg 的PDA-PS NFsM材料足夠用于吸附目標(biāo)分析物。

圖 4 (a)吸附劑的使用量、(b)離子強(qiáng)度、(c)樣品溶液的流速和(d)洗脫液對(duì)6種目標(biāo)化合物萃取效率的影響(n=4)Fig. 4 Effects of (a) mass of adsorbent, (b) ionic strength, (c) flow rates, and (d) eluents on the extraction efficiencies of the six target compounds (n=4)

2.2.2離子強(qiáng)度

用含有0～1.5 g NaCl的樣品溶液考察離子強(qiáng)度對(duì)SPE萃取效率的影響。在10 mL的樣品溶液中分別加入0、0.5、1.0、1.5 g NaCl,然后進(jìn)行固相萃取,檢測(cè)洗脫液中6種目標(biāo)物的含量。從圖4b可以看出,當(dāng)NaCl的添加量由0 g增加至0.5 g時(shí),6種目標(biāo)物的回收率均下降;當(dāng)NaCl的添加量為0.5～1.0 g時(shí),TET和OTC的回收率仍下降,而其他4種目標(biāo)物的回收率小幅回升,這可能是由于各目標(biāo)物對(duì)離子強(qiáng)度的敏感性不同;當(dāng)NaCl的添加量為1.0～1.5 g時(shí),6種目標(biāo)物的回收率均小幅上升,但仍低于NaCl添加量為0 g時(shí)。因此不需要在樣品溶液中添加NaCl。

2.2.3樣品溶液的流速

在保證回收率的前提下,提高流速可以縮短前處理的時(shí)間。樣品溶液分別以1～7 mL/min的流速通過(guò)裝填有20 mg PDA-PS NFsM材料的SPE小柱,考察流速對(duì)6種目標(biāo)物回收率的影響。如圖4c所示,當(dāng)流速?gòu)? mL/min增加至3 mL/min時(shí),6種目標(biāo)物的回收率雖有所下降,但基本處于90%以上;當(dāng)流速大于3 mL/min時(shí),6種目標(biāo)物的回收率均大幅度下降。當(dāng)流速?gòu)? mL/min增加至3 mL/min,上樣時(shí)間可從10 min縮短至3.3 min。因此經(jīng)過(guò)綜合考慮,選擇3 mL/min作為樣品溶液的流速。

2.2.4洗脫液組成

選擇洗脫液的標(biāo)準(zhǔn)是能夠盡可能多地將吸附于PDA-PS NFsM材料的目標(biāo)分析物解吸。研究了弱極性溶劑乙酸乙酯,強(qiáng)極性溶劑甲醇、甲醇-乙酸乙酯(8∶2, v/v)和甲酸-乙酸乙酯(含20%甲醇)(1∶99, v/v)對(duì)6種目標(biāo)物的洗脫能力。結(jié)果表明,氟喹諾酮類藥物對(duì)pH值敏感,在酸性條件下的加標(biāo)回收率顯著提高。綜合考慮后,當(dāng)使用甲酸-乙酸乙酯(含20%甲醇)(1∶99, v/v)時(shí),6種目標(biāo)物的回收率最好(見(jiàn)圖4d)。

2.3 突破體積的考察

在固相萃取時(shí),隨樣品溶液的加入,吸附介質(zhì)對(duì)目標(biāo)物吸附逐漸達(dá)到飽和,當(dāng)目標(biāo)物不再被吸附時(shí)所能流過(guò)的最大樣品溶液體積即為穿透體積。當(dāng)樣品溶液體積超過(guò)突破體積時(shí),萃取效率會(huì)顯著降低。因此,本文對(duì)突破體積進(jìn)行了考察,結(jié)果如圖5所示，當(dāng)樣品溶液體積為10～50 mL時(shí),各目標(biāo)物回收率均>93%,當(dāng)樣品溶液體積增大至60～70 mL時(shí),回收率有明顯的下降。因此樣品的突破體積約為50 mL。本文采用10 mL的樣品溶液,并未超過(guò)突破體積,不會(huì)影響萃取效率。

圖 5 突破體積對(duì)6種目標(biāo)化合物萃取效率的影響(n=6)Fig. 5 Effect of breakthrough volumes on the extraction efficiencies of the six target compounds (n=6)

2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

2.4.1線性范圍、檢出限和定量限

各目標(biāo)物的LOD和LOQ分別以3倍和10倍信噪比(S/N)時(shí)的加標(biāo)水平計(jì)。結(jié)果表明,6種目標(biāo)分析物的LOD和LOQ分別為0.3～1.5 μg/kg和1.0～5.0 μg/kg, LOD低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[12,13](氟喹諾酮類LOD: 20 μg/kg,四環(huán)素類LOD: 50 μg/kg)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[11](四環(huán)素類LOD: 50～100 μg/kg),提示本文方法檢測(cè)靈敏度更優(yōu)。

空白樣品按1.3節(jié)進(jìn)行前處理,得到空白樣品溶液,加入不同體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,得到系列濃度的基質(zhì)匹配工作溶液,按1.4節(jié)進(jìn)行UPLC-MS/MS分析。以測(cè)得的目標(biāo)物峰面積為縱坐標(biāo)、對(duì)應(yīng)的加標(biāo)水平為橫坐標(biāo),分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。各目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為其各自的LOQ～1 000 μg/kg(約為所有目標(biāo)物MRL的1.5～10倍),線性關(guān)系良好,決定系數(shù)(R2)均大于0.999(見(jiàn)表2)。

表 2 6種目標(biāo)物的線性范圍、線性方程、R2、LOD和LOQ

2.4.2準(zhǔn)確度和精密度

為了評(píng)估方法的準(zhǔn)確度和精密度,在空白樣品中加入不同體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別得到低、中、高(LOQ、200和1 000 μg/kg)3個(gè)加標(biāo)水平的模擬樣品,每個(gè)加標(biāo)水平制備6個(gè)平行樣(n=6)。各加標(biāo)模擬樣品按1.3節(jié)和1.4節(jié)進(jìn)行前處理和分析。同時(shí)以1 d內(nèi)和連續(xù)4 d低、中、高3個(gè)加標(biāo)水平下各目標(biāo)物含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)計(jì)日內(nèi)和日間精密度。結(jié)果如表3所示,各目標(biāo)物的相對(duì)回收率為94.37～102.82%,日內(nèi)及日間RSD均小于10%。本文方法準(zhǔn)確度結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[12,13]和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[11]相比更優(yōu),精密度結(jié)果相當(dāng)。

2.4.3基質(zhì)效應(yīng)

為了評(píng)價(jià)PDA-PS NFsM材料對(duì)魚(yú)肉基質(zhì)的凈化能力,比較了固相萃取前后加標(biāo)淡水魚(yú)樣品中各目標(biāo)物的提取離子流色譜圖(見(jiàn)圖6)?？梢?jiàn),在未經(jīng)PDA-PS NFs SPE小柱凈化濃縮前,色譜圖中可見(jiàn)雜質(zhì)峰存在,且響應(yīng)值較低;經(jīng)過(guò)固相萃取后,雜質(zhì)峰明顯降低,目標(biāo)物響應(yīng)值明顯升高,顯示了PDA-PS NFsM材料良好的基質(zhì)凈化能力和目標(biāo)物富集能力。

圖 6 6種目標(biāo)物的提取離子流色譜圖Fig. 6 Extract ion current chromatograms of the six target compounds a. spiked fish sample without SPE (50 μg/kg); b. spiked fish sample after SPE (50 μg/kg); c. standard solution (50 μg/L).

表 3 淡水魚(yú)中6種目標(biāo)物的回收率和RSD

基質(zhì)效應(yīng)=(基質(zhì)匹配工作溶液中各目標(biāo)物的峰面積-標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各目標(biāo)物的峰面積)/標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中各目標(biāo)物的峰面積。空白樣品經(jīng)提取和固相萃取,可得加標(biāo)(200 μg/L)基質(zhì)匹配工作溶液,將其與同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別行UPLC-MS/MS分析,計(jì)算固相萃取后的基質(zhì)效應(yīng)。同理對(duì)空白樣品進(jìn)行提取,但不固相萃取,可計(jì)算得到固相萃取前的基質(zhì)效應(yīng)。

結(jié)果表明,固相萃取前的基質(zhì)效應(yīng)為-12.98%～-38.68%,而在基于PDA-PS NFsM的固相萃取后,每個(gè)目標(biāo)分析物的基質(zhì)效應(yīng)顯著降低至-2.15%～-7.36%,表明基于PDA-PS NFsM的固相萃取有效凈化了樣品基質(zhì)。

2.5 與其他方法比較

將本方法與文獻(xiàn)[39-42]方法進(jìn)行了比較(文獻(xiàn)檢索策略:關(guān)鍵詞為水產(chǎn)品、四環(huán)素類或氟喹諾酮類藥物殘留、固相萃取和質(zhì)譜檢測(cè);檢索年份為2010～2020;檢索數(shù)據(jù)庫(kù)為知網(wǎng)、Web of Science)。結(jié)果如表4所示,基于PDA-PS NFsM材料的優(yōu)越性能,本文吸附劑PDA-PS NFsM用量只及文獻(xiàn)方法的4%～40%。各目標(biāo)物的工作曲線線性范圍更寬,LOD相當(dāng),回收率更高而RSD較低,表明本文方法具有良好的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度,具有較好的實(shí)際應(yīng)用潛力。

表 4 本方法與其他方法的比較

2.6 實(shí)際樣品檢測(cè)

16份淡水魚(yú)樣品按1.3節(jié)和1.4節(jié)進(jìn)行前處理和分析,每份樣品做3個(gè)平行。結(jié)果表明,3份樣品中檢出了藥物殘留,其中1份樣品檢測(cè)到ENR和CIP,殘留量分別為60.22 μg/kg和31.90 μg/kg,另2份樣品中檢出了TET,殘留量分別為19.41 μg/kg和26.32 μg/kg。采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[12,13]對(duì)16份樣品進(jìn)行了檢測(cè),得到的檢出情況及測(cè)得水平與上述結(jié)果一致,表明了本文方法實(shí)際應(yīng)用可行。

3 結(jié)論

本文將PDA與NFsM的優(yōu)勢(shì)相結(jié)合,研制了PDA-PS NFsM材料作為SPE介質(zhì),PDA-PS NFsM材料不僅可同時(shí)提取四環(huán)素類和氟喹諾酮類藥物殘留,且對(duì)復(fù)雜的樣品基質(zhì)具有良好的凈化能力。建立了基于PDA-PS NFsM材料的SPE技術(shù),結(jié)合UPLC-MS/MS,研發(fā)了同時(shí)測(cè)定淡水魚(yú)中四環(huán)素、金霉素、土霉素、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星的檢測(cè)新方法。方法學(xué)考察的結(jié)果表明,本文方法靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或文獻(xiàn)方法相當(dāng)或更優(yōu),能滿足實(shí)際樣品檢測(cè)的要求。