舒芬太尼丙泊酚靜脈復(fù)合麻醉對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療創(chuàng)傷性腦損傷大鼠的影響

武 婕，陳 燕，杜曉宣*

(1.廣東省深圳市龍華區(qū)人民醫(yī)院麻醉科，廣東 深圳 518109；2.新疆烏魯木齊市新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院麻醉科，新疆 烏魯木齊 830002)

顱腦損傷[1-2](traumatic brain injury,TBI)是發(fā)生于頭皮、顱骨和腦部的一種常見外傷，具有較高的病死率，臨床表現(xiàn)為意識(shí)障礙、頭昏嘔吐，重型顱腦損傷常伴隨患者代謝及生命體征紊亂、腦性水腫等癥狀，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量，現(xiàn)階段治療常以顱內(nèi)壓監(jiān)護(hù)、亞低溫治療、脫水治療等非手術(shù)治療手段為主，仍缺乏特效的臨床解決方案。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells)是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞[3-4]。近年來(lái)隨著干細(xì)胞移植治療研究的發(fā)展，越來(lái)越多的證據(jù)表明干細(xì)胞治療組在一定條件下能夠改善創(chuàng)傷性腦組織的結(jié)構(gòu)與功能[5]，但對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)受損區(qū)域的穩(wěn)定修復(fù)效果受繼發(fā)性出血、缺血性細(xì)胞壞死及自由基作用的影響仍有待提升。另一方面，前期研究表明舒芬太尼[6]及丙泊酚[7-8]分別對(duì)TBI模型大鼠神經(jīng)元再生、大腦缺血缺氧損傷及神經(jīng)功能的發(fā)揮具有重要作用，同時(shí)，臨床工作經(jīng)驗(yàn)也表明，舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷具有保護(hù)作用。本研究旨在觀察舒芬太尼丙泊酚靜脈復(fù)合麻醉對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療創(chuàng)傷性腦損傷大鼠行為學(xué)及病理學(xué)變化的影響，探究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植、舒芬太尼丙泊酚靜脈復(fù)合麻醉治療TBI大鼠的作用機(jī)制。

1 材 料 與 方 法

1.1材料 舒芬太尼(人福醫(yī)藥)；丙泊酚(四川國(guó)瑞藥業(yè))；水合氯醛(成都科龍化工試劑廠)；PBS、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、DMEM高糖培養(yǎng)基、胰酶等購(gòu)自Hyclone；多聚甲醛、DAB顯色試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司；電子顱腦損傷儀(Custom Design&Fabrication, Inc)；電感耦合等離子發(fā)射光譜儀(上海宏達(dá)公司)；原位缺口粒端標(biāo)記(TUNEL)法試劑盒、S100β ELISA試劑盒(Roche)；鬼比環(huán)肽(QIAGEN)；RIPA裂解液、BCA蛋白定量試劑盒均購(gòu)自生工；山羊抗兔IgG、白細(xì)胞介素6(interleukin 6,IL-6)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(interleukin-1β，IL-1β)、Bcl2-Associated X的蛋白質(zhì)(Bax)、B淋巴細(xì)胞瘤2(B-cell lymphoma 2，Bcl-2)、細(xì)胞色素C(cytochrome C,Cytc)的抗體均購(gòu)自Abm；TRIzol、反轉(zhuǎn)錄試劑盒及熒光定量PCR試劑盒購(gòu)自天根生物；PCR引物委托生工生物工程有限公司設(shè)計(jì)合成，引物序列見表1。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組治療

1.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 干細(xì)胞治療組供體動(dòng)物：無(wú)特定病原體(specific pathogens free, SPF)級(jí)幼年雄性Wistar大鼠5只，2～4周齡，體重(100±10) g；干細(xì)胞治療組受體動(dòng)物：SPF級(jí)成年雄性Wistar大鼠45只，體重(200±20)g，均購(gòu)自新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。大鼠于25～27 ℃恒溫，50%～70%恒濕，每12 h晝夜戒律交替條件下分籠飼養(yǎng)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)條例，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后正式開始實(shí)驗(yàn)。

表1 引物序列Table 1 Primer sequence

1.2.2骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(干細(xì)胞治療組)的分離及培養(yǎng) 參照文獻(xiàn)報(bào)道方法，分離大鼠股骨和脛骨，暴露骨髓腔。生理鹽水沖洗并收集骨髓腔沖洗液，1 000 r/min 4 ℃低速離心10 min，用含質(zhì)量分?jǐn)?shù)10% FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基1 mL重懸下層細(xì)胞沉淀并轉(zhuǎn)移培養(yǎng)至T25培養(yǎng)瓶中，全程無(wú)菌操作[9]。常規(guī)培養(yǎng)并觀察干細(xì)胞治療組細(xì)胞生長(zhǎng)情況，穩(wěn)定傳代3次后可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。

1.2.3動(dòng)物分組造模及治療方法 受試大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、干細(xì)胞治療組及聯(lián)合治療組3組，每組15只。各組大鼠于造模干細(xì)胞治療組前12 h禁水禁食，以0.7 mL/kg比例給予大鼠腹腔注射5%水合氯醛麻醉，行俯臥位固定大鼠于立體定向支架上。剃毛暴露術(shù)區(qū)，75%乙醇消毒后沿頭正中線切開頭皮，剝離右側(cè)頂骨后以前囟為原點(diǎn)，用磨鉆磨開直徑約5 mm骨窗使完整硬腦膜完全暴露。使用電子顱腦損傷儀(electric cortical contusion impactor,eCCI)構(gòu)建重度TBI模型大鼠，eCCI打擊參數(shù)設(shè)置參照文獻(xiàn)報(bào)道方法[10]。造模完成后縫合切口并再次消毒，將大鼠放回籠中飼養(yǎng)。首次造模3 h后，經(jīng)尾靜脈給予聯(lián)合治療組1×105/mL干細(xì)胞治療組懸液0.5 mL、舒芬太尼0.5 g/kg和丙泊酚2.0 mg/kg，復(fù)合麻醉劑量選擇參照李文亮等[11]方法；干細(xì)胞治療組給予尾靜脈注射干細(xì)胞治療組懸液0.5 mL；對(duì)照組尾靜脈給予等體積生理鹽水。3組每日同一時(shí)間給予上述處理1次，共治療3周。

1.3大鼠神經(jīng)功能評(píng)定 每組各抽取6只大鼠，依據(jù)改良的神經(jīng)功能缺陷評(píng)分量表(modified neurological severity scales,mNSS)[12]對(duì)大鼠治療后3 d、7 d、14 d及21 d各階段神經(jīng)功能進(jìn)行打分評(píng)定，0～18分，分?jǐn)?shù)越高代表神經(jīng)系統(tǒng)功能損害越嚴(yán)重，重復(fù)測(cè)定3次比較均值。

1.4HE染色檢測(cè)大鼠腦組織形態(tài)學(xué) 治療結(jié)束后大鼠常規(guī)脫頸處死，斷頭分離腦組織，取視交叉位置后1 mm及6 mm處冠狀切割修整組織塊，制備海馬組織石蠟切片，經(jīng)HE染色、裝片后于光學(xué)倒置顯微鏡下觀察并記錄3組腦組織形態(tài)學(xué)變化。

1.5干濕比重法測(cè)定大鼠腦組織水含量 取腦損傷區(qū)域30 mg皮層組織置于-80 ℃快速降溫凍存，提取RNA。剩余部分吸干表面水分后立即置于分析天平中稱量腦組織濕重；轉(zhuǎn)移至干燥玻璃培養(yǎng)皿中60 ℃烘干48 h稱量腦組織干重。參照Elliott公式計(jì)算各組大鼠腦組織水含量，取均值比較。

1.6大鼠腦組織總鈣含量與血清S100β含量測(cè)定

1.6.1大鼠腦組織總鈣含量 取部分大鼠腦組織置于4 mL混合酸(高氯酸∶硝酸=1∶4)中，超純水定容至7 mL，混勻，參照文獻(xiàn)采用電感耦合等離子發(fā)射光譜儀掃描測(cè)定大鼠腦組織總鈣含量[13]。

1.6.2大鼠血清S100β含量測(cè)定 取治療結(jié)束后活體大鼠頸靜脈血1～2 mL，室溫靜置30 min后4 000 r/min低速離心10 min，取上層血清，參照S100β酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒說明書操作測(cè)定S100β含量。

1.7大鼠腦組織細(xì)胞凋亡檢測(cè)

1.7.1TUNEL法檢測(cè)各組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)(apoptotic index,AI) 參照TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒說明書對(duì)大鼠腦組織石蠟切片行抗體檢測(cè)，TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞熒光顯微鏡下發(fā)散紅色熒光，鬼比環(huán)肽標(biāo)記細(xì)胞骨架呈綠色熒光定位細(xì)胞質(zhì)，隨機(jī)取5個(gè)視野拍照并記錄細(xì)胞總數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，取均值計(jì)算AI=(陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù))×100%。

1.7.2Western Blot檢測(cè)大鼠腦組織凋亡相關(guān)蛋白表達(dá) 取各組大鼠腦組織50 mg勻漿裂解組織蛋白30 min，裂解產(chǎn)物于4 ℃ 12 000 r/min低速離心15 min，收集上清。經(jīng)BCA蛋白定量試劑盒定量檢測(cè)蛋白含量后各取50 g蛋白，加入等量含1 mmol/L DTT的1×SDS上樣緩沖液煮沸變性蛋白。行10%SDS-PAGE凝膠電泳，電泳結(jié)束后將上述蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜，常規(guī)抗體孵育后顯色曝光以GAPDH為內(nèi)參，檢測(cè)目的蛋白表達(dá)，所得結(jié)果為比值。

1.8大鼠腦組織炎癥因子表達(dá)檢測(cè)

1.8.1免疫組織化學(xué)檢測(cè)大鼠腦組織IL-6、TNF-α、IL-1β表達(dá)分布 對(duì)大鼠腦組織石蠟切片行免疫組織化學(xué)抗體檢測(cè)，DAB顯色液顯色反應(yīng)5～10 min，顯微鏡下觀察并用PBS沖洗終止顯色。常規(guī)裝片后于放大200倍的光鏡下隨機(jī)取5個(gè)視野觀察并采集圖像，觀察IL-6、TNF-α、IL-1β在各組大鼠腦組織中的表達(dá)分布差異。

1.8.2qRT-PCR檢測(cè)大鼠腦組織中相關(guān)炎性因子mRNA表達(dá) 取凍存的腦組織20 mg，充分剪碎研磨參照TRIzol試劑說明書提取大鼠腦組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNAs，參照qRT-PCR試劑盒說明書定量檢測(cè)IL-6、TNF-α、IL-1β相關(guān)mRNA表達(dá)變化。設(shè)置反應(yīng)條件如下：95 ℃預(yù)變性5 min，隨后按95 ℃變性1 min、55 ℃退火2 min、72 ℃延伸1 min的程序設(shè)置40次循環(huán)。循環(huán)結(jié)束后在95 ℃ 15 s，60 ℃ 1 min，95 ℃ 15 s條件下做溶解曲線。以GAPDH為內(nèi)參，每個(gè)樣品均配3個(gè)副孔，同時(shí)做陰性對(duì)照組排除PCR污染及引物二聚體干擾。以采集到的熒光信號(hào)值(Ct值)，計(jì)算2-△△Ct值分析腦水腫相關(guān)炎性因子mRNA在各組大鼠腦組織中表達(dá)水平的變化。

1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1干細(xì)胞治療組細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 干細(xì)胞治療組新鮮提取的原代細(xì)胞貼壁后呈均勻的梭形，核居中，個(gè)別細(xì)胞呈現(xiàn)星形或扁平狀多邊形態(tài)，細(xì)胞以分散的單克隆聚集方式增殖，細(xì)胞液中漂浮有懸浮細(xì)胞，見圖1A。干細(xì)胞治療組純化及傳代培養(yǎng)1周后，非貼壁細(xì)胞逐漸減少，貼壁的細(xì)胞融合至密度為95%，見圖1B。1∶2傳代后細(xì)胞呈放射狀或旋渦狀集落生長(zhǎng)趨勢(shì)，細(xì)胞形態(tài)隨傳代次數(shù)增加逐漸穩(wěn)定均一，最終穩(wěn)定生長(zhǎng)為梭形成纖維細(xì)胞樣。

圖1 干細(xì)胞治療組鏡下觀察的細(xì)胞形態(tài)(HE ×200 )

2.23組mNSS比較 TBI造模結(jié)束后治療3 d內(nèi)，3組mNSS評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療7 d后，聯(lián)合治療組mNSS評(píng)分顯著低于對(duì)照組；治療14 d、21 d后干細(xì)胞治療組及聯(lián)合治療組評(píng)分均顯著低于對(duì)照組，聯(lián)合治療組低于干細(xì)胞治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3HE染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)改變 HE染色結(jié)果顯示，TBI后對(duì)照組神經(jīng)元細(xì)胞胞體出現(xiàn)形狀改變，細(xì)胞核呈現(xiàn)固縮、深染，細(xì)胞間間隙異常增大；神經(jīng)元細(xì)胞可見排列松散，并伴有大量壞死。干細(xì)胞治療組與聯(lián)合治療組海馬組織較對(duì)照組病理學(xué)變化顯著改善，且聯(lián)合治療組腦組織神經(jīng)細(xì)胞密度顯著恢復(fù)，海馬區(qū)細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞核完整且著色較淺，較干細(xì)胞治療組治療效果更佳。見圖2。

表2 造模后不同時(shí)間段內(nèi)3組大鼠mNSS評(píng)分比較Table 2 Comparison of mNSS Score in different time periods after modeling among three groups

圖2 HE染色觀察大鼠海馬組織病理變化( ×200)

2.43組腦組織含水量、總鈣含量及血清S100β含量比較 干細(xì)胞治療組及聯(lián)合治療組腦組織水含量、總鈣含量及血清S100β含量均低于對(duì)照組，聯(lián)合治療組低于干細(xì)胞治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.53組腦組織細(xì)胞凋亡比較 干細(xì)胞治療組、聯(lián)合治療組腦組織細(xì)胞凋亡數(shù)目及Caspase-3、Bax、Cytc蛋白表達(dá)量低于對(duì)照組，聯(lián)合治療組低于干細(xì)胞治療組，干細(xì)胞治療組、聯(lián)合治療組Bcl-2蛋白表達(dá)高于對(duì)照組，聯(lián)合治療組高于干細(xì)胞治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4，圖3。

2.63組腦組織中相關(guān)炎性因子表達(dá)比較 3組腦組織切片IL-6、IL-1β陽(yáng)性產(chǎn)物呈棕褐色深染，于對(duì)照組大鼠腦部海馬組織中密集表達(dá)分布，干細(xì)胞治療組及聯(lián)合治療組大鼠中可見表達(dá)減少，IL-6、IL-1β陽(yáng)性反應(yīng)減弱；TNF-α陽(yáng)性產(chǎn)物呈藍(lán)紫色深染，同樣在對(duì)照組組中顯示出高表達(dá)彌散分布，于治療組中表達(dá)減少，見圖4。干細(xì)胞治療組、聯(lián)合治療組IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)水平均低于對(duì)照組，聯(lián)合治療組低于干細(xì)胞治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

表3 3組大鼠腦組織水含量、總鈣含量和血清S100β含量比較Table 3 Comparison of brain water content, total calcium content and serum S100 β content among three groups

圖3 3組大鼠腦組織TUNEL染色及凋亡蛋白表達(dá)

表4 3組大鼠腦組織細(xì)胞凋亡指數(shù)及凋亡蛋白相對(duì)表達(dá)水平比較Table 4 Comparison of apoptosis rate and relative protein expression levels in three groups

圖4 3組大鼠腦組織炎性因子表達(dá)及分布(免疫組織化學(xué) ×200)

表5 3組大鼠腦組織IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)比較Table 5 Relative IL-6,IL-1β,TNF-α mRNA expression levels in three groups

3 討 論

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植已經(jīng)成為顱腦損傷治療的研究熱點(diǎn)，其顱內(nèi)移植途徑主要包括側(cè)腦移植、靜脈移植、腹腔移植、動(dòng)脈移植以及鼻腔內(nèi)移植[14]，其中靜脈移植和經(jīng)腹腔移植方法以簡(jiǎn)單、不良反應(yīng)小、對(duì)宿主傷害弱受到廣泛應(yīng)用。大量研究表明，移植至損傷腦組織區(qū)的干細(xì)胞治療組可通過細(xì)胞分化替代宿主細(xì)胞、分泌神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor, NGF)等神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、促進(jìn)CXC等趨化因子分泌促進(jìn)干細(xì)胞歸巢、調(diào)控細(xì)胞因子表達(dá)及新生血管形成等途徑對(duì)TBI發(fā)揮治療作用[15]，但真正將干細(xì)胞治療組移植應(yīng)用于TBI的臨床治療，干細(xì)胞治療組的具體作用機(jī)制及移植治療的安全性等問題仍有待探索。與此同時(shí)，舒芬太尼與丙泊酚作為臨床經(jīng)典麻醉藥已被廣泛應(yīng)用于TBI患者的臨床手術(shù)麻醉及康復(fù)治療，其中舒芬太尼是一種新型阿片受體激動(dòng)劑，能夠有效抑制細(xì)胞凋亡和炎性反應(yīng)過度表達(dá)對(duì)缺血后大腦損傷發(fā)揮保護(hù)作用；丙泊酚是一種γ-氨基丁酸受體激動(dòng)劑，能通過調(diào)控Ca2+電壓門控通道及抗氧化活性機(jī)制對(duì)受損神經(jīng)起到治療作用。本研究結(jié)果顯示，干細(xì)胞治療組移植治療與舒芬太尼、丙泊酚等藥物治療相結(jié)合對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷大鼠的綜合治療效果顯著，為此，筆者對(duì)3者的聯(lián)合作用機(jī)制進(jìn)行了深入探究。

治療期間由mNSS評(píng)分可知，治療14 d后，聯(lián)合治療組較干細(xì)胞治療組對(duì)大鼠神經(jīng)功能缺陷恢復(fù)的治療效果顯著增強(qiáng)，舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚在干細(xì)胞治療組單一治療的基礎(chǔ)上促進(jìn)TBI大鼠腦損傷修復(fù)，同時(shí)HE染色可見創(chuàng)傷性大鼠腦部海馬區(qū)病理變化得到顯著改善。查閱相關(guān)文獻(xiàn)可知，創(chuàng)傷性腦損傷機(jī)制及病理組織形態(tài)學(xué)的變化與腦水腫、細(xì)胞內(nèi)鈣荷載及血清S100β等顯著相關(guān)，因此通過檢測(cè)腦組織水含量可知聯(lián)合治療組大鼠腦組織水含量及總鈣含量顯著低于干細(xì)胞治療組與單一治療組，提示舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚對(duì)降低腦水腫、抑制鈣超載的作用更強(qiáng)，促進(jìn)創(chuàng)傷性腦損傷修復(fù)；同時(shí)治療組腦組織總鈣含量的減少表明創(chuàng)傷性損傷與組織細(xì)胞鈣超載有關(guān)，聯(lián)用舒芬太尼與丙泊酚可有效減輕腦組織總鈣含量、逆轉(zhuǎn)TBI腦損傷。另一方面，S100β作為神經(jīng)組織蛋白之一在體內(nèi)發(fā)揮營(yíng)養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞、促進(jìn)神經(jīng)元生長(zhǎng)的作用，可通過與游離的Ca2+結(jié)合形成穩(wěn)定結(jié)合鈣，誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，本研究結(jié)果可知，聯(lián)合治療組治療較干細(xì)胞治療組顯著抑制大鼠體內(nèi)S100β含量，這提示干細(xì)胞治療組聯(lián)合舒芬太尼與丙泊酚治療TBI大鼠腦損傷可能與抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡、促進(jìn)腦部炎癥損傷修復(fù)相關(guān)。因此進(jìn)一步檢測(cè)腦組織細(xì)胞凋亡及炎性因子表達(dá)變化，結(jié)果顯示聯(lián)合治療組較干細(xì)胞治療組大鼠腦部海馬組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡率顯著降低，細(xì)胞內(nèi)促凋亡關(guān)鍵因子Caspase-3、Bax、Cytc蛋白表達(dá)較干細(xì)胞治療組顯著降低，且舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚對(duì)Cytc蛋白表達(dá)抑制更為顯著，提示聯(lián)合治療組可能通過抑制線粒體凋亡途徑抑制受損神經(jīng)細(xì)胞凋亡，同時(shí)促進(jìn)抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)，進(jìn)而影響神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)穩(wěn)定及神經(jīng)元生長(zhǎng)實(shí)現(xiàn)對(duì)TBI大鼠的治療作用，進(jìn)而推測(cè)舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚對(duì)干細(xì)胞治療組治療TBI大鼠可能受到PI3K/Akt/GSK3β信號(hào)通路級(jí)聯(lián)反應(yīng)的調(diào)控。另外，丙泊酚同時(shí)參與Ca2+門控通道的調(diào)節(jié)，其與舒芬太尼聯(lián)用能阻斷神經(jīng)元神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)、改善損傷區(qū)域炎癥微環(huán)境，免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示聯(lián)合治療組大鼠治療后腦部IL-6、IL-1β、TNF-α分布較干細(xì)胞治療組顯著減少，同時(shí)qPCR結(jié)果顯示腦組織中IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)水平與組織炎性因子分布呈正相關(guān)，為改善TBI后大鼠顱內(nèi)炎癥反應(yīng)、組織水腫提供可能。

綜上所述，舒芬太尼丙泊酚靜脈復(fù)合麻醉對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷大鼠神經(jīng)修復(fù)具有保護(hù)作用，舒芬太尼聯(lián)合丙泊酚在干細(xì)胞治療組移植治療中可緩解腦水腫、細(xì)胞鈣超載及循環(huán)S100β的積聚，促進(jìn)血液循環(huán)和微環(huán)境調(diào)節(jié)，抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡和炎性介質(zhì)的表達(dá)，促進(jìn)神經(jīng)元的再生及修復(fù)，改善腦組織病理變化及受損神經(jīng)功能缺陷，為臨床康復(fù)采用干細(xì)胞治療組移植治療腦損傷提供了新的思路和方法。