抗氧化基因在糖缺失誘導(dǎo)細(xì)胞死亡中的作用

王心雪，毛　穎，姜現(xiàn)瑞，孫連坤，康勁松(吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系，吉林長(zhǎng)春130012)

抗氧化基因在糖缺失誘導(dǎo)細(xì)胞死亡中的作用

王心雪，毛穎，姜現(xiàn)瑞，孫連坤，康勁松
(吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系，吉林長(zhǎng)春130012)

目的:探討不同能量代謝途徑對(duì)細(xì)胞存活的影響以及抗氧化基因在葡萄糖缺失模型中導(dǎo)致細(xì)胞死亡的作用。方法:采用EBSS建立體外培養(yǎng)PC12細(xì)胞葡萄糖缺失模型，采用2-DG抑制糖酵解，Oligo抑制有氧氧化。MTT法檢測(cè)細(xì)胞生存率;倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞死亡方式; Hoechst 33342染色觀察細(xì)胞核形態(tài); Western blot和real-time PCR檢測(cè)凋亡及抗氧化相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組相比，EBSS(E)組、E +2-DG組、E + Oligo組以及E +2-DG + Oligo組PC12細(xì)胞的生存率均明顯下降，以2-DG組下降最顯著。進(jìn)一步證明細(xì)胞凋亡率及壞死率亦明顯增加是生存率下降的主要因素，以凋亡率增加更為明顯。抗氧化基因SOD2、HO-1和NQO-1在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平上均明顯降低。在加入外源性抗氧化劑NAC后，PC12細(xì)胞的生存率明顯升高。結(jié)論: PC12細(xì)胞在糖缺失時(shí)主要依靠糖酵解來(lái)維持細(xì)胞存活。干擾糖酵解和有氧氧化通過(guò)降低抗氧化基因的表達(dá)，降低PC12細(xì)胞抗氧化能力，促進(jìn)PC12細(xì)胞凋亡。

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