不同F(xiàn)SH處理方法對多浪羊同期發(fā)情效果的影響

呂松杰，牛志剛，丁煜恭，何志鵬，司衣提·克熱木，黨 樂，陳 軍，史洪才，*

（1.新疆石河子大學(xué)動物科技學(xué)院，新疆 石河子832000；2.新疆畜牧科學(xué)院生物技術(shù)所，烏魯木齊830000；3.新疆五征綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，新疆 麥蓋提縣844600；4.新疆喀什地區(qū)畜牧工作站，新疆 喀什844000；5.新疆維吾爾自治區(qū)畜牧總站，烏魯木齊830000）

多浪羊是新疆喀什地區(qū)主要的綿羊品種，具有體型大，生長速度快，肉產(chǎn)量高，屠宰性能良好等特點，特別是40～50 kg階段表現(xiàn)出眼肌面積大、肉色鮮紅、肌間脂肪含量高、多汁性好、嫩度理想等特性。多浪羊可以全年舍飼，能適應(yīng)新疆南疆地區(qū)的夏季干燥炎熱的環(huán)境，抗病力強，耐粗飼，能四季發(fā)情，且具有早熟性，一般公羔在6～7月齡性成熟；母羔在6～8月齡可以初次配種，多浪羊是新疆優(yōu)良的地方品種[1-3]。

促卵泡素（FSH）是一種糖蛋白激素，促性腺激素釋放激素（GnRH）由下丘腦釋放，作用于垂體，垂體前葉的嗜堿性細胞合成和分泌[4]。與促黃體素（LH）協(xié)同促進卵泡發(fā)育，誘導(dǎo)排卵并將顆粒細胞轉(zhuǎn)變?yōu)辄S體細胞[5]。在發(fā)情前注射FSH,可以使將要退化的卵泡發(fā)育成熟,增加其排卵數(shù)[6]，在綿羊生產(chǎn)上是常見的超數(shù)排卵藥物[7]。

大群體多浪羊一般一胎產(chǎn)一只羔羊，平均產(chǎn)羔率大約為107%，繁殖率較低。影響制約著規(guī)模化養(yǎng)殖場的經(jīng)濟效益，利用外源激素對多浪羊?qū)嵤┩诎l(fā)情處理和高效繁殖，從而可以提高繁殖效率，降低生產(chǎn)成本，增加養(yǎng)殖效益。孕酮+PMSG+PG的同期發(fā)情方法，可以達到很好的發(fā)情效果，F(xiàn)SH是一種超數(shù)排卵的常用藥物，較小劑量的FSH可以刺激少量卵泡同時發(fā)育排卵，產(chǎn)較多數(shù)量的羔羊。本課題組此前曾在多浪羊上注射100 IU FSH進行過試驗，產(chǎn)羔率達到178%，證明注射小劑量的FSH可以提高繁殖率，給養(yǎng)殖場帶來較好的經(jīng)濟效益，但是根據(jù)新疆喀什地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場實際經(jīng)濟效益測算情況，產(chǎn)羔率達到200%以上才有一定的盈利，因此本試驗在同期發(fā)情處理過程中將FSH注射劑量提高到150 IU，觀察不同的注射方法對發(fā)情效果的影響，為進一步提高多浪羊繁殖效率提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品和器材

羊用孕酮海綿栓，新西蘭Inter Greaulane公司生產(chǎn)、注射用促卵泡素(規(guī)格為500單位），寧波市三生藥業(yè)有限公司、孕馬血清促性腺激素（規(guī)格為1 000單位）寧波市三生藥業(yè)有限公司、氯前列烯醇（規(guī)格為5 mL）寧波市三生藥業(yè)有限公司。高錳酸鉀粉、酒精、生理鹽水、碘酒、鏈霉素、青霉素、假陰道、集精杯、開膣器、輸精槍、顯微鏡、恒溫水浴鍋等均為國產(chǎn)。

1.2 試驗羊

2020年5月在新疆喀什五征綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，母羊為2～4歲健康體貌良好的純種多浪母羊172只。種公羊為2～4歲，體型外貌良好且性欲旺盛的成年公羊;試情羊選用體力好、性欲旺盛、有配種史的公羊。

1.3 試驗羊分組與同期發(fā)情處理

本試驗采用單因素設(shè)計，選經(jīng)過B超診斷未懷孕的試驗羊，設(shè)為3個試驗組A、B、C和1個對照組D，在陰道中埋置1個孕酮海綿栓當(dāng)天記為第0 d，第9 d A、B、C組按不同的FSH注射方法進行處理。

A組上午10:00一次性注射FSH 150 IU；

B組上午10:00注射100 IU FSH，8 h后再注射50 IU FSH；

C組上午10:00注射75 IU FSH，8 h后再注射75 IU FSH；

D對照組不注射FSH。

全部4組第11 d早上10:00撤栓時，肌肉分別注射PG1 mL和PMSG 330 IU。

1.4 發(fā)情鑒定

用試情公羊進行試情。在上午08:00和下午20:00，將試情公羊放到母羊圈各試情1次，以母羊接受爬跨后站立不動為發(fā)情標(biāo)準(zhǔn)，試情3 d，將每只羊從撤栓到發(fā)情的時間間隔記錄下來。

1.5 采精和人工授精

1.5.1 假陰道法進行采精

種公羊精液采出后，先通過肉眼觀察，為乳白有“云吞”狀，使用顯微鏡進行觀察，選留活力好密度高的精液。

1.5.2精液稀釋配制

稱取檸檬酸鈉1.4 g、葡萄糖3 g，鏈霉素、青霉素各10萬IU，在100 mL高壓滅菌雙蒸水中溶解，過濾使用0.22μm的濾膜。

1.5.3 精液稀釋

將稀釋液和精液降至室溫。先將等倍稀釋液加入精液中，再根據(jù)所需輸精量，加大稀釋倍數(shù)，本試驗稀釋倍數(shù)為3倍。

1.6 人工授精

輸精時使用陰道開張器，在發(fā)情后的12 h和24 h進行兩次人工授精，將稀釋后鮮精0.1 mL輸入于子宮頸口內(nèi)0.5～1 cm處。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

應(yīng)用SPSS 20.0對發(fā)情率數(shù)據(jù)進行卡方檢驗。

2 結(jié)果與分析

統(tǒng)計4個試驗組6個時間點的發(fā)情母羊數(shù)，并計算撤栓后12～72 h總體的同期發(fā)情率。表1為統(tǒng)計結(jié)果。

表1 不同F(xiàn)SH處理方法對多浪羊同期發(fā)情的影響

由表1可知：A、B、C組注射FSH后的發(fā)情率分別為77.78%；80.65%；87.50%。D對照組發(fā)情率為80.36%，統(tǒng)計分析顯示四個組之間發(fā)情率差異不顯著（P＞0.05）；但C組發(fā)情率高于其他組。

3 討 論

FSH是一種對綿羊排卵有重要作用的激素，常用于羊的超數(shù)排卵，在綿羊超排試驗中，白云喜等在無角道塞特超數(shù)排卵試驗中，采用孕酮海綿栓+FSH+PG，遞減注射FSH的方法，注射總劑量為180～310 IU，其中：235～280 IU組發(fā)情率為91%，平均回收可用胚胎為7.8個，7～8次遞減注射法效果較好[8]。徐鵬舉等在薩福克超數(shù)排卵試驗中，采用CIDR+FSH+PG的超排方案，遞減注射FSH，人工授精時注射2.5μgA3的方法，試驗組發(fā)情率分別為100%和98.18%，可用胚胎數(shù)為6.56個和6.47個[9]。FSH對超排效果的報道主要是FSH總劑量、注射次數(shù)、季節(jié)和供體羊品種等方面，對發(fā)情率和可用胚胎數(shù)的比較分析試驗也表明這些方面對綿羊的排卵有較大的影響。

在利用FSH提高繁殖率方面，張永固[10]等利用FSH提高灘羊繁殖效率的試驗中，六個試驗組設(shè)計注射劑量在30～80 IU之間，六個實驗組發(fā)情率在85.7%～93.5%之間，且差異不顯著，其中30～55 IU的三個試驗組產(chǎn)羔率均為100%，70 IU組最高為136.4%。發(fā)情率與本試驗平均注射150 IU FSH的發(fā)情率為87.5%相近。白丁平等在春節(jié)小尾寒羊?qū)嶒炛校捎肞G+炔諾酮+FSH，F(xiàn)SH總劑量40 IU和60 IU兩次平均注射的方法下，發(fā)情率分別為96.5%和94.7%[11]。上述研究表明，F(xiàn)SH注射總劑量30～150 IU都可以誘導(dǎo)發(fā)情，并且有較高的發(fā)情率。同時FSH劑量的增加可以有效的提高排卵數(shù)。

本課題組在此前使用100 IU FSH提高繁殖性能的試驗中，產(chǎn)羔率達到了178%，但仍然不能完全達到規(guī)模舍飼養(yǎng)羊場扭虧為盈的產(chǎn)羔率期望值。因此本試驗將FSH劑量提高到150 IU，并且按照不同的注射方法，觀察不同組別的繁殖性能。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，A組（150 IU）發(fā)情率為77.78%，B組（100 IU+50 IU）發(fā)情率為80.65%，C組（75 IU+75 IU）發(fā)情率為87.50%，對照D組發(fā)情率為80.36%，統(tǒng)計分析顯示四個組之間的發(fā)情率差異不顯著，此結(jié)果與上述兩個團隊的結(jié)果相同，說明不同劑量的FSH對發(fā)情率影響較小，在本實驗中，C組上下午各注射75 IU的發(fā)情率最高。

4 結(jié) 論

綜上所述，注射FSH后，統(tǒng)計分析顯示不同注射方法對發(fā)情率沒有較大的影響，本研究顯示150 IU分等量兩次注射后的發(fā)情率略高于其他組，后續(xù)在繼續(xù)觀察受胎率及產(chǎn)羔率的情況，最終期望能得到提高繁殖性能的FSH注射劑量及方法。