中醫(yī)非藥物療法調(diào)控表觀遺傳機制的研究進展*

李錦超，王萍

1 江西中醫(yī)藥大學(xué) 江西南昌 330004

2 江西中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院 江西南昌 330004

疾?。ㄓ绕涫窃S多慢性疾?。┑陌l(fā)生發(fā)展受先天遺傳及后天環(huán)境因素的共同影響?？紤]到遺傳因素難以逆轉(zhuǎn)，影響疾病發(fā)生發(fā)展的可逆機制成為新的研究熱點。其中表觀遺傳可逆、可遺傳的特性為慢性復(fù)雜性疾病的治療提供了新的契機。表觀遺傳主要從DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑 、非編碼RNA（Non-coding RNA）的調(diào)控[1]等方面來調(diào)控基因表達。目前微觀和宏觀環(huán)境因素均被證實能夠誘導(dǎo)細胞發(fā)生表觀遺傳層面的特異性改變[2]，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究顯示肥胖、糖尿病、代謝性心肌病等的發(fā)生發(fā)展均與表觀遺傳調(diào)控有關(guān)[3]，在治療方面，如核苷衍生物抑制劑zebularine，可以通過穩(wěn)定DNMTs與DNA的結(jié)合來阻止甲基化和抑制復(fù)合物解離從而維持去甲基化的狀態(tài)[1]，從DNA甲基化等角度為癌癥治療拓展了思路究?？梢哉f表觀遺傳為我們認識和干預(yù)治療疾病提供了新的可能。

而中醫(yī)對于慢性疾病的治療亦有其獨到之處，除傳統(tǒng)藥物治療外，還多引入針刺、熱灸、食療、導(dǎo)引、情志調(diào)攝等進行綜合干預(yù)。如通過調(diào)整飲食、心身調(diào)攝、中醫(yī)外治法等可對高血壓患者的綜合治療起到了積極作用[5]，即通過中醫(yī)非藥物療法改變機體的內(nèi)外環(huán)境因素來治療疾病是行得通的，這與表觀遺傳學(xué)的調(diào)控存在一致性，也有學(xué)者認為中醫(yī)的證候可能包含表觀遺傳學(xué)的內(nèi)容[6]，論證兩者的關(guān)系對我們更好的把握和治療慢性復(fù)雜性疾病及拓展相關(guān)研究思路具有積極意義。考慮到目前大部分關(guān)于中醫(yī)與表觀遺傳的作用關(guān)系多集中在中藥、方劑等領(lǐng)域，本文將對中醫(yī)非藥物療法與表觀遺傳作用機制關(guān)系的研究進展進行簡要綜述。

針刺與表觀遺傳

針刺即以針具刺入人體的穴位來發(fā)揮其醫(yī)療作用的一種治療方式。通過適當(dāng)?shù)难a瀉手法、穴位配伍等，針刺往往能發(fā)揮整體、綜合、雙向調(diào)節(jié)的作用，這與表觀遺傳的作用特點很相似。關(guān)于針刺與表觀遺傳的研究，近年較為多見，且涉及疾病種類多樣，如鄭仕平指出以通督調(diào)神針灸預(yù)處理的方式，可有效降低腦缺血再灌注模型大鼠的神經(jīng)行為學(xué)評分及腦水含量，并通過調(diào)控mi RNA664的表達降低MMP9相對表達量從而誘導(dǎo)腦缺血耐受，減輕腦水腫[7]。在癌癥治療方面，研究發(fā)現(xiàn)擇時電針可以對肝癌小鼠的轉(zhuǎn)輪活動節(jié)律產(chǎn)生良性調(diào)節(jié)，并可下調(diào)肝癌小鼠SCN內(nèi)異常高表達的表觀遺傳學(xué)相關(guān)基因[8]。另有實驗證明針刺可以調(diào)控組蛋白H3K9Z的乙?；剑龠MVEGF轉(zhuǎn)錄來介導(dǎo)缺血心肌血管的新生，實現(xiàn)心肌保護機制[9]。在肥胖治療方面，電針大鼠的中脘、天樞等穴位可以負調(diào)控DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的活性來調(diào)節(jié)食欲因子改善肥胖癥狀[10]，另有學(xué)者從降低脂肪組織中炎癥因子TNF-α的表達方面解釋了電針治療胰島素抵抗肥胖的作用[11]。表觀遺傳不僅解釋了針刺效果的作用機制，同時兩者的結(jié)合也為拓寬針刺治療范圍提供了科學(xué)的理論依據(jù)。

灸法與表觀遺傳

灸法，是以艾為主要施灸材料，點燃后在體表穴位或病變部位燒灼、溫熨，借助灸法的溫?zé)峒笆┚乃幬锎碳碇委熂膊〉姆椒?，臨床上多用于虛證、寒證、陰證，在現(xiàn)代疾病歸屬上多應(yīng)用于慢性病如腫瘤、胃炎、痹證等的治療，而近些年受到認可的三伏貼為天灸的一種，在預(yù)防和緩解哮喘癥狀[12]等方面發(fā)揮著很好的作用。實驗表明艾灸可降低小鼠腫瘤細胞的bcl-2蛋白、PCNA表達，提高bax蛋白表達，降低bcl-2/bax比值[13]，隔藥餅灸可以影響慢性萎縮性胃炎大鼠外周血免疫及腫瘤相關(guān)的基因表達譜[14]，這就從基因調(diào)控的方面解釋了其抗腫瘤的作用機制。而灸法作為接受度較高的保健手段，實驗支持艾灸腎俞穴可以下調(diào)DNMT1 mRNA表達，起到調(diào)節(jié)衰老的作用[15]。由于灸法本身的溫?zé)帷⒀a益作用，隔鹽灸、隔姜灸等一直在治療腹痛、泄瀉等方面具有突出優(yōu)勢。黃艷等[16]認為表觀遺傳修飾可能參與了抑炎細胞與促炎細胞的調(diào)控從而解釋了艾灸在炎癥性腸病中的作用。而足三里作為常用穴，有著“若想身體安，三里長不干”的說法，馬琦[17]就指出艾灸“足三里”穴位局部，可引起CG序列環(huán)境發(fā)生低甲基化改變，另有實驗指出長期艾灸“足三里”穴對于炎癥引起的全身皮膚異常DNA甲基化可起到糾正作用[18]。表觀遺傳的引入為客觀的評價和分析揭發(fā)的療效提供了參考。而明確艾灸單個穴位如大椎、三陰交等的作用也可能成為新的發(fā)展方向。

推拿與表觀遺傳

推拿是指醫(yī)者運用自己的雙手，運用推、摩、揉、拿、按、滾、扣等方式在病患的不適所在或特定腧穴等位置進行操作，以達到推行氣血、扶傷止痛的效用。《黃帝內(nèi)經(jīng)》曰：“行數(shù)驚恐、經(jīng)絡(luò)不通，病生于不仁。治之以按摩醪藥”其舒筋活絡(luò)止痛作用迅速，故在疼痛、康復(fù)治療中占有重要地位，現(xiàn)代研究從推拿對血清降鈣素基因肽的影響解釋了其在治療膝關(guān)節(jié)炎[19]、坐骨神經(jīng)損傷等疾病的作用機制。而基于推拿作用舒適、操作便捷的特點，其在小兒疾病中應(yīng)用度和接受度也較高。在治療小兒食積、萎證、發(fā)熱、咳喘等方面發(fā)揮著顯著優(yōu)勢，在后期發(fā)展中甚至形成了專門的小兒推拿體系并延續(xù)至今。石維坤[20]指出，經(jīng)苗醫(yī)推拿治療后，患兒外周血 CD4 + T 細胞組蛋白乙酰化轉(zhuǎn)移酶活性顯著降低，而組蛋白去乙?；富钚燥@著升高，說明對外周血CD4+T細胞組蛋白乙?；恼{(diào)控可能是治療小兒哮喘的表觀遺傳學(xué)機制之一。而以腦癱幼鼠為模型的實驗表明，在接受脊柱推拿后腦癱幼鼠的海馬炎癥細胞因子TNF-α表達下降而IL-10表達升高，考慮與基因表達的甲基化調(diào)控有關(guān)[21]，從炎癥反應(yīng)與腦癱[8]的關(guān)系解釋了推拿的作用機制。我們可以更多地將表觀遺傳學(xué)內(nèi)容引入，解釋類似“清天河水”“運內(nèi)八卦”等手法的作用途徑，來更好地繼承和發(fā)展這一學(xué)科。

功法鍛煉與表觀遺傳

傳統(tǒng)功法的具體內(nèi)容包含吐納、坐忘、導(dǎo)引、存想等等，目前常見的養(yǎng)生功法有六字訣、五禽戲、太極拳、八段錦等。功法一方面把人與自然環(huán)境統(tǒng)一起來，通過呼吸吐納、導(dǎo)引等鍛煉形體的方式，起到養(yǎng)生保健的作用。如試驗發(fā)現(xiàn)長期接受太極拳訓(xùn)練的女性與未訓(xùn)練女性相對比，訓(xùn)練組女性中6個應(yīng)隨年齡增長甲基化增加的CpG位點的DNA甲基化狀態(tài)較正常情況明顯降低[23]。動物實驗也表明有氧運動鍛煉可使高血壓腸系膜動脈Agtr1a基因啟動子甲基化水平提高，這種變化能改善血管功能，調(diào)節(jié)血壓[24]。另一方面?zhèn)鹘y(tǒng)功法要求鍛煉者寧心守神，清虛寧靜，做到調(diào)息、調(diào)神、調(diào)心的統(tǒng)一[25]，這與中醫(yī)的“心神合一”的“整體觀”是相吻合的，在緩解情緒焦慮，改善精神分裂癥患者康復(fù)效果[26]及防治胃癌前病變[27]等方面也被證實有積極作用。而精神分裂癥和雙相情感障礙患者的腦組織Reelin基因啟動子區(qū)的DNA甲基化呈高水平狀態(tài)[28]，是否可以從這個角度討論對此類疾病的治療，是一個新思路。功法鍛煉把自然、個體生理、心理等各要素做到了很好地統(tǒng)一，與目前社會-心理-生理的綜合模式[29]是吻合的，這對疾病的預(yù)防和綜合治療具有很大益處。目前明確關(guān)于傳統(tǒng)功法與表觀遺傳的機制研究確實不多見，但個體的甲基化狀態(tài)已被證實和身體活動水平存在劑量依賴性[30]，那么長期地進行功法鍛煉是可以被推廣的。

食療與表觀遺傳

中醫(yī)食療是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，通過食物或在日常飲食中加入藥物，以食借藥力、藥助食威來進行養(yǎng)生保健和防病治病的一門學(xué)科?！肚Ы鹨健な持巍分杏涊d“食能排邪而安臟腑，悅神爽志，以資血氣，若能用食平病，釋情遣疾者，可謂良工，常年餌老之奇法，極養(yǎng)生之術(shù)也”。《食療本草》中也有提及食用某些藥食同源的植物來防治疾病，如食覆盆子“主益氣輕身，令人發(fā)不白”等，又有“……知其所犯，以食治之。食療不愈，然后命藥……”說明食療在預(yù)防疾病發(fā)生和控制疾病進展等方面都可以起到很好的效用?！饵S帝內(nèi)經(jīng)·六節(jié)藏象論》云：“飲食入胃，游溢精氣，上輸于脾，脾氣散精，上歸于肺……”，日常飲食與臟腑之間關(guān)系密切，且《素問·生氣通天論》又有“……味過于酸，肝氣以津，脾氣乃絕；味過于咸，大骨氣勞。短肌，心氣抑……”等五臟與飲食五味關(guān)聯(lián)性的記載，即是說通過有節(jié)制的調(diào)控飲食或針對臟腑不同的喜用特點[31]、生克關(guān)系、個人體質(zhì)差異等選用不同的食材來調(diào)整全身狀態(tài)從而預(yù)防和治療疾病就是可行的。例如在治療痰濕肥胖方面，個性化膳食調(diào)養(yǎng)可有效提高臨床療效[32]。而表觀遺傳修飾的改變亦是飲食結(jié)構(gòu)變化、遺傳及環(huán)境因子等多種因素共同作用下的結(jié)果。而人體內(nèi)的甲基基團主要來源于飲食，因此飲食結(jié)構(gòu)的不合理在某種程度上說，是有導(dǎo)致低甲基化狀態(tài)和遺傳不穩(wěn)定性的可能的。有研究指出亞甲基四氫葉酸還原酶的多態(tài)性與 DNA 甲基化相關(guān)，而這種相關(guān)性受飲食飲酒和疾病影響[33]。同時這種因飲食結(jié)構(gòu)帶來的表觀遺傳改變是可以延續(xù)的，有實驗表明高脂飲食組大鼠的BDNF/TrkB的蛋白表達量量明顯下降，從而介導(dǎo)父親高脂飲食導(dǎo)致的子一代認知功能的受損[34]，而祖父母早年食物供應(yīng)與孫子長壽之間也存在代紀(jì)相關(guān)性[35]，有限制的調(diào)節(jié)飲食如控制熱量攝入則被證明有效地預(yù)防腫瘤、認知障礙，延長壽命[36]，而這種變化與PP2Ac去甲基化水平下調(diào)相關(guān)[37]。另一方面，某些藥食同源的植物如人參就被證實可以通過抑制P16啟動子區(qū)甲基化水平，上調(diào)蛋白表達來抑制肝癌細胞[38]，黃芪可以調(diào)節(jié)H3K9及H4K8的乙?；絒39]。那么通過有節(jié)制的調(diào)控飲食或針對臟腑不同的喜用特點、生克關(guān)系、個人體質(zhì)差異等選用不同的食材來調(diào)整全身狀態(tài)從而預(yù)防和治療疾病就是可行的措施。6飲食是日常正常生活中不可或缺的環(huán)節(jié)，在本次新冠疫情中，營養(yǎng)支持成為肺炎患者治療方案的組成部分，而補脾肺、補氣陰的食療方，也成為對抗新冠疫情的助力[40]。把食療的作用推廣起來，也有利于提高全民健康水平。

小 結(jié)

中醫(yī)學(xué)認為，人體始終處于一種陰陽的相對平衡中，這種平衡是動態(tài)的，它最初來源先天稟賦，在后天生長壯老的生命過程中，亦會受到營養(yǎng)、鍛煉、疾病、情志、自然及社會環(huán)境等諸多因素的影響從而發(fā)生改變。與之類似，表觀遺傳修飾的改變也是可逆可調(diào)的，也正因這種可調(diào)控與可逆性，我們才能夠通過調(diào)整環(huán)境、情志、飲食結(jié)構(gòu)、接受藥物及非藥物治療等來防病治病。這是兩者的共性所在。

目前中醫(yī)學(xué)在表觀遺傳方面的研究日益增多，通過引入表觀遺傳學(xué)知識，我們對中醫(yī)的作用機制和疾病把握方面都有了新的認識，為中醫(yī)復(fù)方研究等提供了多層面、多通路的研究手段，也為客觀評價中醫(yī)單藥、針刺手法研究等提供了新的思路。但是，表觀遺傳所涉及的影響因素復(fù)雜，尋找單一的針對性作用靶點較難，目前所做研究成果的時效性、針刺等臨床效應(yīng)的可重復(fù)性也都有待觀察。而中醫(yī)非藥物療法有著便捷操作、綠色理念、與傳統(tǒng)藥物治療互補、無藥物毒副作用等優(yōu)勢，食療、功法調(diào)攝等完全可以滲透在人們的日常生活中。將這些療法與表觀遺傳相結(jié)合，不僅僅是為了更客觀地解釋其作用機制，通過這些有效手段，提前干預(yù)或者糾正不良的機體內(nèi)外環(huán)境，針對特定表觀遺傳位點所發(fā)揮作用可為疾病的綜合防治提供新的思路。同時食療、功法等還可與中醫(yī)體質(zhì)學(xué)說相結(jié)合，通過提早干預(yù)易感人群的體質(zhì)因素，這對防治家族遺傳性疾病也有著積極意義。