多維生物網(wǎng)絡(luò)探討鴉膽子治療潰瘍性結(jié)腸炎的潛在藥效成分和分子機(jī)制＊

陳文璐，王樂琪，萬力生，張怡萍，李莎莎，4＊＊，肖 雪

（1. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)深圳市兒童醫(yī)院 深圳 518038；2. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 廣州 510006；3. 廣東藥科大學(xué)中醫(yī)藥研究院 廣州 510006；4. 廣東省中醫(yī)藥防治難治性慢病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州 510006）

潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC）是由環(huán)境、遺傳、感染、免疫等多因素相互作用引起的結(jié)腸和直腸慢性非特異性炎癥性疾病，屬于炎癥性腸?。↖nflammatory bowel disease，IBD）[1]。臨床上以反復(fù)發(fā)作的腹瀉、腹痛、黏液膿血便、里急后重為主要表現(xiàn)，可伴有便秘、腹脹、食欲不振、惡心等消化系統(tǒng)癥狀以及發(fā)熱、營養(yǎng)不良等全身反應(yīng)，部分UC 患者可出現(xiàn)中毒性巨結(jié)腸、直腸結(jié)腸癌變等并發(fā)癥[2]。西醫(yī)治療上主要以5-氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等藥物控制炎癥反應(yīng)以及對癥治療為主，但長期療效欠佳，大部分患者存在復(fù)發(fā)情況。與之對應(yīng)，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在緩解UC 癥狀、預(yù)防UC 復(fù)發(fā)方面具有一定的優(yōu)勢[3]。在我國，UC 近年患病率明顯增加，因此開展中醫(yī)藥治療UC的臨床應(yīng)用和作用機(jī)制研究，具有較好的前景。

從中醫(yī)藥角度出發(fā)，篩選對UC 具有潛在治療作用的中藥及復(fù)方，探討其治療UC 的潛在藥效成分和作用機(jī)制，可以為UC 的治療提供更多的途徑，同時(shí)能為中藥及其復(fù)方治療UC 提供良好的示范研究。根據(jù)臨床報(bào)道和文獻(xiàn)研究，選擇傳統(tǒng)中藥鴉膽子作為研究對象。鴉膽子為苦木科植物鴉膽子Brucea javanica(L.)Merr.的干燥成熟果實(shí)，其味苦、性寒、有小毒，歸大腸、肝經(jīng)，具有清熱解毒、止痢截瘧之功效[4]。《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》中記載鴉膽子“善治熱痢赤痢，二便因熱下血，最能清血中之熱及腸中之熱”[5]?，F(xiàn)代藥理研究表明鴉膽子具有抗瘧[6]、抗癌[7]、抗炎[8]、抗阿米巴原蟲[9]、抗胃潰瘍[10]以及調(diào)控免疫系統(tǒng)[11]的作用，臨床多用于治療癌癥、瘧疾、阿米巴痢疾等[12]。動物實(shí)驗(yàn)表明鴉膽子藥渣可以降低腸炎小鼠的疾病活動指數(shù)和組織損傷評分，結(jié)腸組織中的TNF-α、IL-1β、IFN-γ等促炎因子的水平下降，小鼠體重下降有所改善[13]，提示鴉膽子可用于治療部分腸道疾病。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是生物信息學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)、多向藥理學(xué)等多學(xué)科交叉的理論，是促進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的重要手段，在中醫(yī)藥研究中已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用[14-15]。它的多維性與中醫(yī)藥的整體觀念類似，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法構(gòu)建“中藥-成分-靶點(diǎn)-疾病-通路”相關(guān)網(wǎng)絡(luò)，并對該生物網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析，篩選出其中可能發(fā)揮主要作用的藥效成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、通路，闡明中藥及復(fù)方在治療疾病中的具體作用機(jī)制，同時(shí)也能節(jié)約藥物研發(fā)成本，提高研發(fā)效率。基于此，本文擬采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)研究鴉膽子治療UC 的作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供理論參考和支持。

1 材料與方法

1.1 鴉膽子化學(xué)成分庫構(gòu)建及靶點(diǎn)預(yù)測

將“鴉膽子”輸入TCMGeneDIT 數(shù)據(jù)庫（http://tcm.lifescience.ntu.edu.tw/index.html）進(jìn)行查詢；同時(shí)在中國知網(wǎng)（http://www.cnki.net/）中以“（篇名=鴉膽子）AND（篇名=成分）”為檢索條件、以“資源范圍：總庫；中英文擴(kuò)展；更新時(shí)間：不限”為檢索范圍，開展文獻(xiàn)檢索。將二者結(jié)果相結(jié)合，整理出鴉膽子的化學(xué)成分。

通 過 ChemicaBook 數(shù) 據(jù) 庫（https://www.chemicalbook. com/）和 PubChem 數(shù) 據(jù) 庫（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）查詢化學(xué)成分的CAS 號和SMILES 字符串（Simplified molecular input line entry specification，SMILES）。將得到的SMILES字符串輸入SwissTargetPrediction（http://www. swisstargetprediction.ch/，http://old.swisstargetprediction.ch/）進(jìn)行化合物的靶點(diǎn)預(yù)測，得到鴉膽子化學(xué)成分的作用靶點(diǎn)。

1.2 疾病靶點(diǎn)預(yù)測

以“ulcerative colitis”為關(guān)鍵詞在GeneCards 數(shù)據(jù)庫（https://www.genecards.org/）進(jìn)行搜索，收集與UC 相關(guān)的靶點(diǎn)，即疾病靶點(diǎn)。

將得到的疾病靶點(diǎn)輸入String11.0（https://stringdb.org/）中，分組選中“Multiple Proteins”，設(shè)定物種為“Homo sapiens”，其余保持默認(rèn)值，得到疾病靶點(diǎn)互相作用關(guān)系。

1.3 “成分-疾病-潛在靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將整理好的鴉膽子“成分-靶點(diǎn)”信息導(dǎo)入Cytoscape3.7.2軟件，構(gòu)建鴉膽子的“成分-靶點(diǎn)”圖，同時(shí)利用該軟件構(gòu)建“（疾病）靶點(diǎn)-靶點(diǎn)”圖，使用軟件的Merge 功能找到以上2 個(gè)網(wǎng)絡(luò)中的共同靶點(diǎn)，即為鴉膽子治療UC 的潛在靶點(diǎn)。將潛在靶點(diǎn)輸入String11.0 中，分組選中“Multiple Proteins”，設(shè)定物種為“Homo sapiens”，其余保持默認(rèn)值，得到潛在靶點(diǎn)互相作用網(wǎng)絡(luò)圖。同時(shí)利用Cytoscape3.7.2軟件構(gòu)建“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)”圖。

1.4 潛在靶點(diǎn)富集分析及網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

利用Cytoscape3.7.2 軟件的ClueGo 插件對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行富集分析，設(shè)定P＜0.01，其余參數(shù)默認(rèn)，開展GO 功能分析中的生物過程（Biological process）、分子功能（Molecular function）分析；同樣條件下對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路分析，確定潛在靶點(diǎn)的通路。

使用Cytoscape3.7.2 軟件構(gòu)建“通路-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)，利用Merge 功能將其與“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)互作圖”合并，構(gòu)建“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)”網(wǎng)絡(luò)圖。

2 結(jié)果

2.1 鴉膽子化學(xué)成分庫構(gòu)建及靶點(diǎn)預(yù)測

通過文獻(xiàn)檢索得到相關(guān)文章72篇，將其整理后與TCMGeneDIT 數(shù)據(jù)庫結(jié)果匯總并去重，共得出鴉膽子的74 個(gè)化學(xué)成分，其中能夠查詢到SMILES 字符串的成分有47個(gè)（表1）。

在SwissTargetPrediction 網(wǎng)站預(yù)測得到3932 個(gè)成分靶點(diǎn)，刪除Probability為0值（假陽性）的靶點(diǎn)及其對應(yīng)的化學(xué)成分（Bruceine C，Bruceine E）并將靶點(diǎn)去重后，剩余503 個(gè)成分靶點(diǎn)，與45 個(gè)有效成分相對應(yīng)。將“成分-靶點(diǎn)”信息導(dǎo)入Cytoscape3.7.2 軟件構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖。

2.2 疾病靶點(diǎn)預(yù)測及網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

通過Genecards 數(shù)據(jù)庫查詢，共得到與UC 相關(guān)的靶點(diǎn)3870 個(gè)，說明UC 是一種由多基因調(diào)控的疾病。以“relevance score ≥10”為篩選條件，篩選出疾病靶點(diǎn)234個(gè)。

表1 鴉膽子化學(xué)成分表

2.3 “成分-疾病-潛在靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建

將2.2 中的234 個(gè)疾病靶點(diǎn)導(dǎo)入String11.0 數(shù)據(jù)庫，得到疾病的靶點(diǎn)互相作用關(guān)系圖，下載tsv 格式文本并導(dǎo)入Cytoscape3.7.2 軟件，構(gòu)建“（疾?。┌悬c(diǎn)-靶點(diǎn)”互作網(wǎng)絡(luò)圖。使用軟件的Merge功能，將“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)與“（疾?。┌悬c(diǎn)-靶點(diǎn)”取交集，得到疾病與成分的重合靶點(diǎn)41 個(gè)，即為潛在靶點(diǎn)，說明鴉膽子可能通過作用于這41 個(gè)靶點(diǎn)而對UC 產(chǎn)生影響。將41 個(gè)潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape3.7.2軟件，構(gòu)建潛在靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)圖（圖1）。

使用Cytoscape3.7.2 軟件的Merge 功能，將“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖與“潛在靶點(diǎn)”互作圖取并集，剔除其中無潛在靶點(diǎn)的8個(gè)成分節(jié)點(diǎn)，得到“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)”互作網(wǎng)絡(luò)圖（圖2）。鴉膽子通過多成分-多靶點(diǎn)作用于UC，該網(wǎng)絡(luò)共有邊467 條，節(jié)點(diǎn)78 個(gè)，其中成分節(jié)點(diǎn)37 個(gè)，潛在靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn)41 個(gè)，平均鄰居節(jié)點(diǎn)數(shù)為11.974。計(jì)算得到該網(wǎng)絡(luò)中成分的平均節(jié)點(diǎn)度為4.027，潛在靶點(diǎn)的平均節(jié)點(diǎn)度為19.146。節(jié)點(diǎn)度大于4.027的成分如木犀草素、亞油酸、棕櫚酸、鴉膽亭等可能為鴉膽子發(fā)揮藥效的主要成分，節(jié)點(diǎn)度大于19.146的 潛 在 靶 點(diǎn) 如PTGS2、IL6、AKT1、EGFR、STAT3、HIF1A等可能為鴉膽子治療UC的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

2.4 潛在靶點(diǎn)的富集分析及成分-疾病-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

2.4.1 富集分析

使用Cytoscape3.7.2 軟件中的GlueGo 插件，對篩選出的41個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行GO 功能分析以及KEGG 通路分析。

圖1 潛在靶點(diǎn)互作圖

圖2 成分-疾病-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)互作圖

輸入41 個(gè)潛在靶點(diǎn)，設(shè)置P＜0.01，選擇GO 功能分析中的生物過程（Biological process）、分子功能（Molecular function）分析（圖3）。潛在靶點(diǎn)主要富集在骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增值的正調(diào)控（Positive regulation of skeletal muscle satellite cell proliferation）、白三烯參與的炎癥反應(yīng)（Leukotriene production involved in inflammatory response）、氰鈷胺素反應(yīng)（Response to cobalamin）、多巴胺能的負(fù)性調(diào)節(jié)突觸傳遞（Negative regulation of synaptic transmission, dopaminergic）、缺氧時(shí)RNA 聚合酶II 啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控（Positive regulation of transcription from RNA polymerase II promoter in response to hypoxia）、細(xì)胞對肽聚糖的反應(yīng)（Cellular response to peptidoglycan）、過氧化氫代謝過程的負(fù)調(diào)控（Negative regulation of hydrogen peroxide metabolic process）等生物過程及分子功能上。

圖3 GO功能分析結(jié)果圖

輸入41 個(gè)潛在靶點(diǎn)，設(shè)置P＜0.01 進(jìn)行KEGG 通路分析，選取前10 條通路進(jìn)行展示（圖4、表2）。由圖4 可知，鴉膽子治療UC 可能是通過癌癥相關(guān)通路（Pathway in cancer）、HIF-1 信號通路（HIF-1 signaling pathway）、AGE-RAGE 信 號 通 路（AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications）、趨化因子信號通路（Chemokine signaling pathway）、病毒感染及疾病通路等多條通路發(fā)揮作用。表2展示了富集在各條通路上的具體靶點(diǎn)，表明鴉膽子可能是通過調(diào)控通路上的多個(gè)靶點(diǎn)而影響整條通路。

圖4 KEGG通路富集分析圖

2.4.2 成分-疾病-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

為了驗(yàn)證通路與靶點(diǎn)之間的互作關(guān)系，選取部分通路導(dǎo)入Cytoscape3.7.2軟件，構(gòu)建“通路-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)，使用Merge 功能將其與“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)互作圖”合并，構(gòu)建“成分-疾病-潛在靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)圖（圖5）。該圖中邊526 條，節(jié)點(diǎn)106 個(gè)，其中10 個(gè)內(nèi)圈節(jié)點(diǎn)代表通路，37 個(gè)中圈節(jié)點(diǎn)代表成分，59 個(gè)外圈節(jié)點(diǎn)代表合并后的靶點(diǎn)。表示鴉膽子可能是通過這37個(gè)關(guān)鍵成分，調(diào)節(jié)41 個(gè)潛在靶點(diǎn)的表達(dá)，并由此影響關(guān)鍵通路，從而發(fā)揮治療UC的作用。

3 討論

3.1 鴉膽子“清熱利濕”適用于UC主要證型

UC 纏綿難愈，病勢呈復(fù)發(fā)、緩解、復(fù)發(fā)的波浪式進(jìn)程，該特點(diǎn)決定了患者需要長期、反復(fù)地對病情進(jìn)行治療或監(jiān)控炎癥進(jìn)展防止惡化[16-17]。UC 給患者的經(jīng)濟(jì)、生理和心理都會帶來不良影響，如何緩解癥狀與預(yù)防其復(fù)發(fā)的問題亟待解決。張?zhí)旌萚16]研究認(rèn)為UC 輕度活動期患者以脾虛濕蘊(yùn)證為主，其次是大腸濕熱證，再次為脾虛肝郁證；中度及重度活動期患者均以大腸濕熱證為主。而鴉膽子擅長清熱利濕涼血解毒，適用于UC 的主要證型。盛英麗[18]對150 例UC活動期患者進(jìn)行隨機(jī)對照實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了鴉膽子油口服乳液保留灌腸對于UC 有明顯的治療作用。臨床研究證實(shí)鴉膽子對UC 有治療作用，但其作用機(jī)制鮮有報(bào)道。而現(xiàn)代對于鴉膽子的研究多集中于其抗腫瘤作用上，較少關(guān)注鴉膽子治療痢疾這一傳統(tǒng)應(yīng)用[19]。因此，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析并探索鴉膽子治療UC的作用機(jī)制，可為其進(jìn)一步的研究及臨床應(yīng)用提供一定的理論指導(dǎo)。

表2 “通路-靶點(diǎn)”表

圖5 成分-疾病-潛在靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

3.2 鴉膽子主要藥效成分分析

本研究發(fā)現(xiàn)木犀草素、亞油酸、棕櫚酸等可能為主要的藥效成分。木犀草素是一種天然四羥基黃酮化合物，具有多種藥理活性，如消炎、抗過敏、抗腫瘤、抗菌、抗病毒等[20]。亞油酸具有防癌抗癌、抗粥狀動脈硬化、參與脂肪分解與新陳代謝、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力等作用，屬于人體必需脂肪酸[21]。棕櫚酸屬于飽和脂肪酸，可通過損傷線粒體氧化呼吸鏈的正常功能，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)[22]。研究結(jié)果示鴉膽子在治療UC 的過程中，木犀草素主要通過作用于PTGS2、AKT1、MMP9、TERT 等關(guān)鍵靶點(diǎn)發(fā)揮作用，亞油酸主要影響PTGS2、IL6、MMP2、TERT、NOS2等關(guān)鍵靶點(diǎn)發(fā)揮作用，棕櫚酸主要影響TERT、ABCB1 等靶點(diǎn)發(fā)揮作用。以上靶點(diǎn)參與炎癥反應(yīng)、氧化作用、癌癥等，與主要藥效成分抗炎、抗氧化及抗癌作用相關(guān)聯(lián)。李越等[23]研究表明木犀草素可能是通過激活Nrf2 信號通路，增強(qiáng)小鼠結(jié)腸抗氧化活性、抑制促炎因子TNF-α、IL-6 表達(dá)，緩解由葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠UC。Chen 等[24]研究顯示木犀草素能夠抑制小鼠巨噬細(xì)胞分泌TNF-α等促炎因子，從而減輕UC 的炎癥反應(yīng)。且有研究證實(shí)木犀草素對結(jié)腸癌HT-29 細(xì)胞增殖、遷移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化具有抑制作用[25]，說明木犀草素能夠控制UC 進(jìn)一步發(fā)展為癌癥，還可以有效抑制結(jié)腸癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移。覃一楓等[26]通過代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)亞油酸可以減輕伊立替康所致腸炎的小鼠的炎性癥狀。馬清林等[27]發(fā)現(xiàn)棕櫚酸可能是烏梅丸治療UC 的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)預(yù)測得出的潛在藥效成分與現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相符，可為鴉膽子有效成分的深入研究和應(yīng)用提供參考。

3.3 潛在靶點(diǎn)及KEGG通路分析

鴉膽子治療UC 可能是通過IL6、STAT3、AKT1、EGFR、HIF1A 等多個(gè)靶點(diǎn)以及HIF-1 信號通路（HIF-1 signaling pathway）、AGE-RAGE 信號通路（AGERAGE signaling pathway in diabetic complications）、癌癥通路（Pathway in cancer）等多個(gè)通路發(fā)揮作用。

3.3.1 潛在靶點(diǎn)分析

白細(xì)胞介素6（Interleukin-6，IL-6）是細(xì)胞因子核心成員，是UC發(fā)展過程中的關(guān)鍵因子[28]。IL-6主要通過“反式傳導(dǎo)信號”誘導(dǎo)STAT3 磷酸化，激活轉(zhuǎn)錄因子NF-κB（Nuclear factorκB）信號通路，NF-κB 從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)控炎性細(xì)胞因子的表達(dá)[29]。目前已有研究發(fā)現(xiàn)針對IL-6 或NF-κB 的靶向治療能夠抑制甚至阻斷炎癥的發(fā)生[30]。

信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（Signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）存在于細(xì)胞核內(nèi)，由Sinapaldehyde 調(diào)控參與到抗炎過程中[31]，已被研究證實(shí)與UC 發(fā)病密切相關(guān)[32]。一方面，臨床實(shí)驗(yàn)[33]發(fā)現(xiàn)STAT3 被細(xì)胞因子激活后發(fā)生磷酸化形成磷酸化STAT3（P-STAT3），定位于UC 患者腸道炎癥活動性的區(qū)域，此時(shí)發(fā)現(xiàn)UC 患者體內(nèi)的STAT3 及P-STAT3 的表達(dá)均比健康人升高，且表達(dá)水平隨內(nèi)鏡下及臨床病變活動度的加重逐漸增加。該結(jié)果說明了STAT3 不僅是判斷UC 是否存在的依據(jù)，更能作為一個(gè)動態(tài)指標(biāo)反映UC 的發(fā)展階段。另一方面，研究發(fā)現(xiàn)[34]STAT3作為一種可介導(dǎo)多種信號通路的轉(zhuǎn)錄因子，通過調(diào)控基因表達(dá)會對腸膜上皮Claudin-1 和Occludin 的表達(dá)水平產(chǎn)生影響，而Claudin-1和Occludin的表達(dá)減少是UC發(fā)病及進(jìn)展的重要分子學(xué)基礎(chǔ)，STAT3通過破壞腸黏膜機(jī)械屏障的完整性參與了UC 的發(fā)病。以上研究證實(shí)了STAT3 通過參與炎癥反應(yīng)及破壞腸道屏障導(dǎo)致UC 的發(fā)生，進(jìn)一步研究對STAT3 的靶向阻斷有助于UC的診治。

AKT1 屬于AKT 激酶的3 種緊密相關(guān)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶之一，另外2 種為AKT2、AKT3，能夠參與調(diào)節(jié)代謝、增殖、細(xì)胞存活、生長和血管生成等過程，該靶點(diǎn)涉及的AKT 信號通路與炎癥反應(yīng)相關(guān)[35]。馬西等[36]通過體外培養(yǎng)結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-8，測定AKT1 以及其他相關(guān)炎癥因子的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)炎癥因子可以通過調(diào)控PI3K/Akt 信號通路促進(jìn)結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移。說明AKT1 在腸道炎癥性疾病以及癌癥轉(zhuǎn)移等方面都會產(chǎn)生影響，該靶點(diǎn)受到木犀草素等成分的調(diào)控，與木犀草素抗炎、抗腫瘤的藥理活性相適應(yīng)。

3.3.2 KEGG通路分析

晚期糖基化終末產(chǎn)物（Advanced Glycation End Products，AGEs）是在非酶促條件下一些蛋白質(zhì)、氨基酸、脂質(zhì)與葡萄糖或其他還原糖經(jīng)過一系列化學(xué)反應(yīng)形成的；晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（Receptor for Advanced Glycation End，RAGE）屬于免疫球蛋白超家族受體[37]。AGE-RAGE 可激活核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB，啟動異常的炎癥反應(yīng)；亦可誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，損害細(xì)胞[38]。UC 是以炎癥反應(yīng)為主的疾病，激活A(yù)GERAGE 信號通路則可以通過激活炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，促進(jìn)UC發(fā)生發(fā)展。

HIF-1 信號通路主要依靠HIF-1 發(fā)揮作用。缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）異質(zhì)二聚體由2 個(gè)亞基：HIF-α（HIF-1α或HIF-2α）和HIF-1β構(gòu)成[39]，是細(xì)胞適應(yīng)低氧脅迫的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。UC 發(fā)生時(shí)會使腸道處于低氧甚至缺氧狀態(tài)，細(xì)胞出現(xiàn)氧化應(yīng)激，導(dǎo)致氧自由基及相關(guān)代謝產(chǎn)物堆積，對細(xì)胞產(chǎn)生毒性損害；且氧化應(yīng)激使氧化劑與抗氧化劑失衡，損傷腸黏膜[30]。Sun M等[40]證明了HIF-1α能夠調(diào)節(jié)腸道炎癥和維持粘膜內(nèi)穩(wěn)態(tài)；Higashiyama M 等[41]闡明了缺氧是通過HIF-1α依賴調(diào)節(jié)細(xì)胞因子平衡來控制腸道炎癥。這些研究說明了通過誘導(dǎo)HIF1A（HIF-1α）靶點(diǎn)，激活HIF-1 信號通路，有助于控制炎癥。

3.4 小結(jié)

綜上所述，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究表明中藥鴉膽子治療潰瘍性結(jié)腸炎是具有多成分-多靶點(diǎn)-多通路協(xié)同作用的特點(diǎn)，且預(yù)測得出的結(jié)果與現(xiàn)有研究報(bào)道中相一致，可從一定程度上為臨床實(shí)際應(yīng)用提供參考。研究發(fā)現(xiàn)鴉膽子通過其有效成分，干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)展的關(guān)鍵靶點(diǎn)及通路，減緩疾病的發(fā)展，提示我們可對鴉膽子進(jìn)行更加全面的綜合開發(fā)和深入研究。然而本研究僅是基于數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)預(yù)測得出的結(jié)果，尚需要進(jìn)行系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。