馬尾松松針化學成分分析

孟亞會，閔建華，尚 強

(1.珠海圣美生物診斷技術有限公司，廣東 珠海 519000；2.麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司，廣東 珠海 519000)

馬尾松(PinusmassonianaLamb.)為松科(Pinaceae)松屬(PinusLinn.)常綠喬木，廣泛分布于江蘇、安徽、河南及長江中下游各省區(qū)，資源豐富。馬尾松具有祛風濕止癢的功效，可用于治療風濕萎痹、跌打損傷、失眠、浮腫、濕瘡及疥癬，并能治療流腦、流感、鉤蟲病等病癥。近年來，松針廣泛用于治療風濕病、心腦血管疾病、糖尿病、肥胖病、肝病、胃病、淋病、腫瘤等[1-2]，其臨床價值日益受到重視。為探討松針的藥效物質基礎，我們對馬尾松松針進行了一系列化學成分分析。

關于馬尾松的化學成分，國內外研究較多，報道其成分主要為木脂素、黃酮和揮發(fā)油等。已經(jīng)從馬尾松松針中分離并鑒定的木脂素主要有：苯并四氫呋喃新木脂素類，包括2, 3-二氫-2-(4′-羥基-3′-甲氧基苯基)-7-甲氧基-3-羥甲基-苯并呋喃丙醇、3-O-a-L-鼠李糖苷等；苯代四氫萘木脂素類，包括異落葉松脂素、異落葉松脂素-9′-O-a-L-阿拉伯糖苷等；苯氧醚木脂素類，包括1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-[4-(3-羥丙基)-2-羥基苯氧基]-1, 3-丙二醇、β-D-葡萄糖苷等；簡單木脂素類，8-8′位相連的有2, 3-二(4′-羥基-3′-甲氧基苯甲基)-1, 4-丁二醇等，7-7′位相連的包括開環(huán)異落葉松脂素、開環(huán)異落葉松脂素-9-O-β-D-葡萄糖苷等，雙環(huán)氧木酯素有(+)-松脂素，(+)-松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷；畢躍峰等[6]還分離出了一種木脂內酯：3-羥基-3, 4-二(4′-羥基-3′-甲氧基苯甲基)-2(3H)-呋喃酮，以及一種苯并二氧六環(huán)木酯素：2, 3-二氫-2-(4′-羥基-3′-甲氧基苯基)-3-羥甲基-6-(3″-O-a-L-鼠李糖基-羥丙基)-苯并二氧六環(huán)。Shen Zhaobang等[7]從馬尾松松針中分離出7種黃酮苷：花旗松素(taxifolin)，花旗松素-3′-O-β -D-葡萄糖苷(taxifolin-3′-O-β-D-glucopyranoside)，兒茶素[(+)-catechin]，柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside)，6-C-甲基香樹素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6-C-methylaromadendrin-7-O-β-D-glucopyranoside)，花旗松素-3′-O-β-D-(6″-O-苯乙肽基)-葡萄糖苷(taxifolin-3′-O-β-D-(6″-O-phenylacethyl)-glucopyranoside)，圣草酚-3′-O-β-D-葡萄糖苷(eriodictyol-3′-O-β-D-glucopyranoside)。秦玉琴等[8]從馬尾松花粉中分離并鑒定了10個化合物：柚皮素，花旗松素，山奈酚，山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，α-D-呋喃果糖，對羥基苯甲酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，膽甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇和β-胡蘿卜苷。李麗等[9]從馬尾松花粉中分離并鑒定了11個化合物：β-谷甾醇，單硬脂酸甘油酯，1-正十六烷酸甘油酯，對羥基苯甲醛，3-羥基-4-甲氧基苯甲酸，3, 3′, 5 , 5′, 7-五羥基二氫黃酮醇，雙氫山柰素，對羥基苯甲酸，3 , 4-二羥基苯甲酸，山柰酚，丁二酸。胡文杰等[10]采用水蒸氣蒸餾法提取馬尾松松針揮發(fā)油，利用氣相色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS)對揮發(fā)油進行化學成分分析，共鑒定出了34種化合物，其相對質量分數(shù)占揮發(fā)油總量的95.76%，主要化合物為石竹烯(15.85%)、α-杜松醇(12.12%)、大根香葉烯B(10.81%)、3-古巴烯(7.94%)、4-杜松二烯(6.65%)、γ-依蘭油烯(6.01%)、蛇麻烯(5.82%)、β-瑟林烯(3.63%)等[3-5]。

本研究對馬尾松松針甲醇提取物的正丁醇萃取部分進行了化學成分研究，從中分離得到6個化合物，鑒定了其中2個化合物，為2個木脂素苷，經(jīng)波譜、質譜數(shù)據(jù)分析，分別鑒定為：(7S, 8R)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside(1),(7R, 8S)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside(2)。其中化合物1、2為首次從馬尾松中分離得到?，F(xiàn)將實驗過程報道如下。

1 儀器與材料

旋光經(jīng)SEPA-300儀測定；紅外光譜(IR)采用(KBr)壓片，由Bio-Rad FTS-135型紅外光譜儀測定；紫外光譜由Shimadzu 2410PC光譜儀測定；質譜(EI-MS，F(xiàn)AB-MS和HR-FAB-MS)用VG Autospec-3000型質譜儀測定，其中EI-MS在70ev 下測定；核磁共振譜用Bruker AM-400和DRX-500超導核磁共振儀測定，TMS為內標；薄層層析板和柱色譜硅膠由青島海洋化工廠生產；D101大孔樹脂由天津農化公司生產；Sephadex LH-20由德國默克公司生產；反相填充材料Lichroprep RP-18 gel(40-63 μm)為德國默克公司產品；HPLC為美國安捷倫公司產品。

植物樣品于2018年7月采于云南省昆明市西山，由中國中藥工程技術研究中心曹暉研究員鑒定為馬尾松(PinusmassonianaLamb.)。

2 提取與分離

將馬尾松甲醇提取物的正丁醇萃取部分，拌樣上硅膠柱，用氯仿-甲醇(20∶1 ～ 1∶1)進行粗分，分為7個部分，然后將成點較好的部分再經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱以甲醇粗分，再反復用硅膠柱細分，最后經(jīng)反相柱和半制備柱純化得到化合物1(6.5 mg)、2(3.5 mg)。其結構式，見圖1。

圖1 首次從馬尾松松針中分離得到的化合物結構式

3 結構鑒定

化合物1：無色油狀物，F(xiàn)AB--MS顯示其準分子離子峰為m/z(%) 508[M]-，[α]：-48.8°。1H-NMR(CD3OD, 400MHz) δ： 7.06(1H, d, J=1.8 Hz, H-2), 7.13(1H, d, J=8.4 Hz, H-5), 6.95(1H, dd, J=8.4 Hz, 1.8 Hz, H-9), 5.54(1H, d, J=5.7 Hz, H-7), 3.47(1H, m, H-8), 6.59(1H, s, H-2′), 6.57(1H, s, H-6′), 2.57(2H, t, J=7.5 Hz, H-7′), 1.78(2H, m, H-8′), 3.55(2H, t, J=6.5 Hz, H-9′), 3.83(3H, s, 3-OMe)。13C-NMR(CD3OD, 100 MHz) δ： 138.6(s, C-1), 111.0(d, C-2), 150.8(s, C-3), 147.4(s, C-4), 117.9(d, C-5), 119.3(d, C-6), 88.2(d, C-7), 56.0(d, C-8), 65.2(t, C-9), 136.9(s, C-1′), 117.1(d, C-2′), 141.9(s, C-3′), 146.4(s, C-4′), 129.4(s, C-5′), 116.7(d, C-6′), 32.7(t, C-7′), 35.8(t, C-8′), 62.4(t, C-9′), 102.7(d, C-1″), 74.9(d, C-2″), 78.1(d, C-3″), 71.3(d, C-4″), 77.8(d, C-5″), 62.3(t,C-6″), 56.6(q, 3-OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道一致，鑒定為(7S, 8R)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′ -Lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside。

化合物2：無色油狀物，F(xiàn)AB--MS顯示其準分子離子峰為m/z(%) 507[M-H]-。[α]：-25.5°。1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ： 7.14(1H, d, J=8.4 Hz, H-5), 7.06(1H, d, J=1.9 Hz, H-2), 6.95(1H, dd, J=8.4 Hz, 1.8 Hz, H-9), 6.58(1H, s, H-2′), 6.56(1H, s, H-6′), 5.54(1H, d, J=5.7 Hz, H-7), 3.83(3H, s, 3-OMe), 3.55(2H, t, J=6.5 Hz, H-9′), 3.45(1H, m, H-8), 2.55(2H, t, J=7.3 Hz, H-7′), 1.78(2H, m, H-8′)。13C-NMR(CD3OD, 125 MHz) δ： 138.6(s, C-1), 111.0(d, C-2), 150.8(s, C-3), 147.4(s, C-4), 117.9(d, C-5), 119.3(d, C-6), 88.1(d, C-7), 56.0(d, C-8), 65.2(t, C-9), 136.9(s, C-1′), 117.0(d, C-2′), 141.9(s, C-3′), 146.4(s, C-4′), 129.4(s, C-5′), 116.7(d, C-6′), 32.7(t, C-7′), 35.8(t, C-8′), 62.4(t, C-9′), 102.7(d, C-1″), 74.9(d, C-2″), 78.2(d, C-3″), 71.3(d, C-4″), 77.8(d, C-5″), 62.3(t, C-6″), 56.6(q, 3-OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻[11]報道一致，鑒定為(7R,8S)-4′, 7-epoxy-3-methoxy-3′, 4′, 4, 9, 9′-lignanepentol-4′-O-β-D-glucopyranoside。