抗心律失常藥對(duì)截肢大鼠炎性因子表達(dá)及心肌電活動(dòng)的影響

趙桂香 劉佳

截肢創(chuàng)傷患者手術(shù)前后均會(huì)發(fā)生應(yīng)激反應(yīng),已證實(shí)心血管事件是截肢手術(shù)圍手術(shù)期并發(fā)癥及術(shù)后死亡的主要原因，其中心律失常是常見的并發(fā)癥之一[1]。心肌電活動(dòng)異常和炎性因子的異常表達(dá)是預(yù)測(cè)心血管事件的重要指標(biāo)，傳統(tǒng)臨床治療心律失常的主要藥物包括鈉通道阻滯劑、β受體拮抗劑、延長(zhǎng)動(dòng)作電位時(shí)程藥物及鈣通道阻滯藥，其中代表藥物分別是利多卡因、普萘洛爾、胺碘酮和維拉帕米。對(duì)截肢手術(shù)患者術(shù)后相關(guān)心肌電及炎性反應(yīng)的研究很少[2-3]，本研究利用單相動(dòng)作電位技術(shù)觀察了抗心律失常藥對(duì)截肢大鼠炎性因子表達(dá)及心肌電活動(dòng)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

30只健康清潔級(jí)雄性SD大鼠，8周齡，250～300 g，購(gòu)自于新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)研究室，許可證號(hào)[SYXK(新)2016-0008]，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，飼養(yǎng)環(huán)境溫度22～25 ℃，濕度50%～60%，自然光照條件下，大鼠自由攝食飲水。

1.2 方法

將大鼠隨機(jī)分為5組，每組6只，建立左后肢截肢手術(shù)創(chuàng)傷模型。使用3%異戊巴比妥鈉80 mg/kg對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔麻醉，仰臥位固定后切開左側(cè)腹股溝皮膚，將股動(dòng)靜脈游離并于腹壁牽動(dòng)下進(jìn)行鏡面結(jié)扎，于膝關(guān)節(jié)上1.3 cm處，將除股動(dòng)脈和股靜脈之外所有結(jié)構(gòu)完全切除，最后將股動(dòng)脈和股靜脈剪斷建立截肢創(chuàng)傷模型[4]。A組給予等量生理鹽水，B組、C組、D組和E組分別給予利多卡因(2 mg/kg)、普萘洛爾(7 mg/kg)、胺碘酮(200 mg/kg)和維拉帕米(20 mg/kg)。使用生理信號(hào)采集系統(tǒng)，皮下插入針型電極，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，掃描速率設(shè)定200 ms，頻率設(shè)定10 kHz，觀察大鼠的心率、QT間期和PR間期變化。使用MedLab U/4CS生物信息采集處理系統(tǒng)(南京美易科技公司)實(shí)時(shí)記錄(MAP)，彩色多普勒超聲檢測(cè)大鼠左室收縮壓(LVSP)并觀測(cè)是否存在室性心律失常。于術(shù)前、術(shù)后2 h取尾靜脈血3 mL,靜置30 min后，3 000 轉(zhuǎn)/min離心10 min；分離血清，將血清轉(zhuǎn)移至EP管中，保存于-80℃的冰箱備用；酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和C反應(yīng)蛋白(CRP)，酶標(biāo)儀(美國(guó)BD公司)檢測(cè)450 nm波長(zhǎng)讀數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)整理分析采用SPSS 22.0軟件，TNF-α、IL-6、CRP等計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較使用方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠手術(shù)前后心電圖相關(guān)指標(biāo)比較

C組、D組和E組術(shù)后15、30、60 min時(shí)心率明顯低于A組和B組；B組、C組、D組和E組術(shù)后15、30、60、120 min時(shí)PR間期、QT間期高于A組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠心電圖相關(guān)指標(biāo)比較

2.2 各組大鼠手術(shù)前后MAP比較

B組術(shù)后15、30、60、120 min時(shí)MAP振幅明顯低于A組、C組、D組和E組(P<0.05)，見表2。

表2 各組大鼠MAP指標(biāo)比較

2.3 各組大鼠手術(shù)前后LVSP比較

B組、C組、D組和E組術(shù)后15、30、60、120 min時(shí)LVSP明顯低于A組(P<0.05)，見表3。

表3 各組大鼠LVSP相關(guān)指標(biāo)比較

2.4 各組大鼠手術(shù)前后炎性因子比較

各組大鼠術(shù)后2 h血清TNF-α、IL-6和CRP較術(shù)前均升高(P<0.05)，但各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表4。

表4 各組大鼠手術(shù)前后炎性因子比較

3 討論

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)截肢手術(shù)并發(fā)癥的研究主要集中在術(shù)后并發(fā)癥的預(yù)防與處理,如殘端出血、感染、皮膚壞死、深靜脈血栓、繼發(fā)性骨筋膜室綜合征、殘肢疼痛以及截肢后遠(yuǎn)端臟器繼發(fā)損傷等。對(duì)截肢創(chuàng)傷導(dǎo)致心律失常的機(jī)制缺乏深入認(rèn)識(shí)[5-10]。本研究動(dòng)態(tài)觀察術(shù)前、術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)應(yīng)用抗心律失常藥物大鼠的心電圖、右心室心內(nèi)膜MAP振幅和LVSP的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗心律失常藥物均可有效改善患者PR間期、QT間期，其中普萘洛爾、胺碘酮和維拉帕米較利多卡因降低心率更明顯。利多卡因較其他抗心律失常藥物更有助于降低MAP振幅，其機(jī)制可能是利多卡因可通過阻斷鈉通道, 延長(zhǎng)動(dòng)作電位及不應(yīng)期，還可鎮(zhèn)靜神經(jīng)系統(tǒng)，提高興奮閾值,穩(wěn)定神經(jīng)細(xì)胞膜, 減少病灶高頻放電的擴(kuò)散[11-12]。

本研究提示抗心律失常藥有助于減輕截肢對(duì)大鼠心肌電活動(dòng)的影響，降低患者血壓。截肢大鼠由于嚴(yán)重創(chuàng)傷刺激且易感染，導(dǎo)致炎性指標(biāo)升高，而引起心肌電活動(dòng)異常，進(jìn)而出現(xiàn)高血壓和心血管不良事件。利多卡因?qū)儆阝c通道阻滯劑，對(duì)缺血或強(qiáng)心苷中毒所致的除極化型心律失常具有較強(qiáng)的抑制作用，可與強(qiáng)心苷競(jìng)爭(zhēng) Na+/K+-ATP，抑制強(qiáng)心苷中毒所致的滯后除極，進(jìn)而發(fā)揮抗室性心律失常的作用[13-14]。

手術(shù)前后炎性因子比較結(jié)果顯示，各組大鼠術(shù)后2 h血清TNF-α、IL-6和CRP較術(shù)前升高，但組間比較無顯著差異，提示抗心律失常藥物對(duì)炎性因子并無明顯作用。

綜上所述，抗心律失常藥有助于減輕截肢對(duì)大鼠心肌電活動(dòng)的影響，但對(duì)炎性因子無明顯作用。