兔病毒性出血癥及其診斷與防控

李雪源

（青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院 810016）

我國作為全球首位的養(yǎng)兔大國，兔存欄量居于世界第一。我國同樣也是兔病毒性出血癥病毒廣泛流行的地區(qū)之一，該病首次暴發(fā)于我國，并在短時間內(nèi)對我國養(yǎng)兔業(yè)造成了毀滅性的打擊。雖目前，通過各種手段該疫病已經(jīng)得到有效防控，但在2020年5月份我國四川省暴發(fā)了由新的兔病毒性出血癥病毒亞型所引起的非典型兔瘟，根據(jù)國外研究人員的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)目前采用的商品化兔瘟疫苗無法對該亞型提供完全保護(hù)，并有取代其他亞型的趨勢。

1 自然歷史及流行病學(xué)

在上世紀(jì)80年代，歐洲地區(qū)兔群由于一種未知名病毒感染導(dǎo)致大批量死亡，該病的特征是對，家兔和野兔中都具有極高的致死性和高度傳染性，這個病毒就是兔病毒性出血癥病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus ，RHDV)。該病原第一次有記錄的暴發(fā)是于1984年的我國江蘇省，不到一年的時間便引起全國范圍超過十四億家兔的死亡，對我國養(yǎng)兔業(yè)造成了極大的損失。該病隨后于1986年在意大利暴發(fā)，并從意大利傳播到歐洲的其他國家和地區(qū)。到目前，該病原廣泛存在于全球的多個國家和地區(qū)并呈現(xiàn)地方流行性。

由于該病毒是無囊膜的單股正鏈RNA病毒，對外界環(huán)境具有較高的地方能力。因此RHDV致死的兔尸體是該病的主要傳染源。該病可以通過口、鼻等呼吸系統(tǒng)器官及消化系統(tǒng)器官傳播，且吸血昆蟲也是其重要的傳播媒介。健康動物可通過接觸感染動物以及病毒粒子污染的食物、水源、飼料及籠具器械等感染該病原。

2 臨床癥狀及病理變化

該病的潛伏期較短，通常為1～3d，大多數(shù)感染兔在體溫升高后的12～36h內(nèi)便死亡，根據(jù)臨床癥狀的不同，可將該病分為急性型、亞急性型和慢性型三種類型，其中急性型最為常見。其中急性感染兔由于病程較短死亡較快，并不表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。部分能夠見到厭食、不喜動、結(jié)膜充血，并有角弓反張、麻痹和共濟(jì)失調(diào)等臨床癥狀。亞急性型感染家兔表現(xiàn)出類似但較弱的臨床癥狀，且大多數(shù)存活。

由于肝、肺和脾等實(shí)質(zhì)臟器是該病原的主要靶器官，因此剖檢后主要的病理變化是由于細(xì)胞凋亡引起的急性肝炎和脾腫大，以及由于彌散性血管內(nèi)凝血導(dǎo)致的包括肺、心、腎等多臟器的出血、淤血及堵塞。同時，疾病過程中伴隨有肝臟和腎臟的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的衰竭會導(dǎo)致免疫損傷并導(dǎo)致2～3d內(nèi)死亡。

3 疾病診斷

臨床生產(chǎn)中，主要通過對發(fā)病兔的臨床癥狀和剖檢后的病理變化對該病進(jìn)行鑒別診斷，同時，由于該病原具有良好的中和人“O”型紅細(xì)胞的能力，因此可以通過血凝及血凝抑制試驗(yàn)對發(fā)病病原進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。由于分子生物學(xué)及免疫學(xué)的快速發(fā)展，大量的研究人員研發(fā)了多種分子生物學(xué)及免疫學(xué)的檢測方法。其中最主要的就是基于該病原主要結(jié)構(gòu)蛋白VP60的PCR及熒光定量PCR檢測方法以檢測病原的核酸。同時，也有研究人員通過表達(dá)純化結(jié)構(gòu)蛋白VP60以及制備該蛋白的單克隆及多克隆抗體，從而建立了間接ELISA及雙抗夾心ELISA檢測方法以檢測該病原及其刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體。

4 基因多樣性

過去的研究人員認(rèn)為該病原僅存在一個血清型，并根據(jù)病原的結(jié)構(gòu)蛋白VP60的核苷酸序列將其分為了6個不同的基因型——G1～G6，不同亞型病原之間具有較好的交叉免疫原性，因此基于一種亞型制備的疫苗可以為其他亞型提供較強(qiáng)的保護(hù)。但是在2010年法國地區(qū)暴發(fā)了由新的變異亞型所引起的非典型兔瘟，新的變異亞型與傳統(tǒng)的亞型所引起的臨床癥狀及病理變化均相似，但死亡率較低，但該亞型病原可以突破傳統(tǒng)兔瘟疫苗所提供的免疫保護(hù)力，引起免疫后兔的死亡，因此該亞型被研究人員認(rèn)定為一種新的血清型，并命名為RHDVb/RHDV2。

5 經(jīng)典兔瘟與新型兔瘟病毒的差異

雖然經(jīng)典兔瘟和新型兔瘟病毒所引起的病理變化和臨床癥狀相似，但是其潛伏期、致死率、宿主范圍及年齡特異性有顯著差異。新型兔瘟的潛伏期較經(jīng)典兔瘟的更長，可達(dá)3～5d；經(jīng)典兔瘟的致死率較高，可到80%～90%，而新型兔瘟的致死率差異較大，可達(dá)5%～70%；經(jīng)典兔瘟的宿主范圍較窄，能夠感染Oryctolagus cuniculus和Lepus granatensis兩個品種的兔子，新型兔瘟的宿主范圍明顯擴(kuò)大，可以感染包括Oryctolagus cuniculus、Lepus capensis、L. Corsicanus和L. europaeus在內(nèi)的多個品種的兔子；經(jīng)典兔瘟僅能夠感染8周齡以上的成年兔，而新型兔瘟對2～3周齡的幼年兔同樣易感；最為重要的一個差異是經(jīng)典兔瘟和新型兔瘟的免疫原性存在差異，因此基于經(jīng)典兔瘟的疫苗無法提供針對新型兔瘟的完全保護(hù)，這對兔瘟疫情的防控帶來了新的嚴(yán)峻考驗(yàn)。

6 兔瘟病毒的防控

對于病毒感染后處于亞臨床或無臨床癥狀的兔子，可是注射高免血清從而進(jìn)行緊急被動免疫，高免血清可以中和病毒粒子從而減少對靶器官的攻擊，以提供短期保護(hù)，避免家兔死亡。然而生產(chǎn)中很難能夠及時發(fā)現(xiàn)無臨床癥狀的感染動物，然而到目前為止研究人員并沒有發(fā)現(xiàn)有效方法，可以治愈RHDV感染的兔子，因此生物安全防控和免疫預(yù)防如接種疫苗等措施仍然是預(yù)防和控制該病的最重要手段。

為了有效的防控該病，需加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和安全防控。合理密度養(yǎng)殖，合理規(guī)劃養(yǎng)殖地點(diǎn)，進(jìn)行集約化養(yǎng)殖和自繁自養(yǎng)的管理模式，以防外來引種可能帶來的污染。保證飼料和飲水充足，禁止使用霉變和污染的水源喂養(yǎng)兔子。保證適當(dāng)?shù)墓庹蘸屯L(fēng)，避免兔子產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)。定期對圈舍和飼養(yǎng)器械進(jìn)行消毒，平時做好病毒的凈化和清除工作，對育肥家兔盡可能采用全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式。

目前，常用的商品化兔瘟疫苗除了單價兔病毒性出血癥滅活疫苗外，還有兔病毒性出血癥-兔多殺性巴氏桿菌二價滅活疫苗及兔病毒性出血癥-兔多殺性巴氏桿菌-兔產(chǎn)氣莢膜梭菌三價滅活疫苗。除了常規(guī)的滅活苗以外，研究人員還研發(fā)了大量的亞單位疫苗，此類疫苗無散毒的潛在風(fēng)險，更為安全，目前我國已上市的有基于桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)研發(fā)的兔病毒性出血癥亞單位疫苗，同樣可以為兔子提供較強(qiáng)的保護(hù)力。免疫時，需要合理檢測母源抗體水平，以減少母源抗體對免疫帶來的影響，首免應(yīng)在2月齡后，也可斷奶后進(jìn)行首免然后在2月齡時進(jìn)行加強(qiáng)免疫，對種兔應(yīng)每隔3～4個月進(jìn)行加強(qiáng)免疫，以維持較高的抗體水平。

7 總結(jié)

雖近年來由于合理的免疫和安全防控，兔瘟疫情在我國較少發(fā)生，但隨著我國新的變異亞型出現(xiàn)，研究人員和養(yǎng)殖戶仍然需要提高防范意識。相關(guān)部門及研究人員仍需對我國的主要流行毒株進(jìn)行長期監(jiān)測，以合理地調(diào)整疫苗毒株和免疫規(guī)程，從而更好地指導(dǎo)養(yǎng)殖戶生產(chǎn)應(yīng)用。