雞支氣管堵塞研究進(jìn)展

蔡亞瑋，王子璇，陳立功,2，王學(xué)靜，戴美麗，張曉云，孫會(huì)興

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 071001；2.農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫病病原生物學(xué)華北科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站 071001；3.河北省畜牧獸醫(yī)研究所 071000；4.大廠回族自治縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 065300；5.遷西縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 064300；6.威縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 054700）

雞支氣管堵塞是一種多病因引起的呼吸道傳染性疾病，該病前期主要表現(xiàn)為氣管啰音、打噴嚏、咳嗽等，并伴有輕微腹瀉；中期呼吸困難、伸頸張口呼吸、偶有怪叫，并出現(xiàn)食欲不振、腹瀉、呆滯；后期食量減少、糞便稀黃，最后仰面朝天猝死。 雞支氣管堵塞僅為雞的癥候表現(xiàn)， 并非單一疾病， 其形成有多方面原因，剖檢病變以二級(jí)支氣管、三級(jí)支氣管有嚴(yán)重的堵塞為主要特征[1]。 通過調(diào)查，近年來該病影響范圍較廣，死亡率較高，且無有效防治方法，嚴(yán)重影響?zhàn)B禽業(yè)生產(chǎn)效益。

1 病原學(xué)

雞支氣管堵塞的病原學(xué)方面，2006 年古飛霞等通過熒光RT-PCR 方法鑒定了一例由新城疫病毒（NDV）引起的支氣管堵塞案例。2012 年王正東等[2]從安徽發(fā)生的支氣管堵塞麻雞中分離出了傳染性支氣管炎病毒（IBV）。 2012 年Qing Pan 等[3]報(bào)道，從東北地區(qū)支氣管堵塞病例分離出6 株鼻氣管鳥桿菌(ORT) 和3株獸疫鏈球菌，并表明ORT 和鏈球菌的聯(lián)合感染是造成目前致雞群高死亡率的原因。2014 年齊茜[4]從濰坊地區(qū)肉雞支氣管堵塞病料分離到了大腸桿菌與H9 亞型禽流感病毒（AIV）。2015 年王守榮[5]從山東聊城地區(qū)肉雞支氣管堵塞的病雞分離出了H9 亞型AIV、NDV、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌。 2020 年蘇戰(zhàn)強(qiáng)等[6]從接診病例中分離到了煙曲霉、黃曲霉和米根霉3 種真菌，這表明真菌與雞支氣管堵塞這一病理變化的形成有關(guān)。 2020 年張夢琳等[7]在河北省某養(yǎng)雞場發(fā)生支氣管阻塞肉雞中分離到了H9 亞型AIV、銅綠假單胞菌、大腸桿菌。 2015 年韓文格等曾報(bào)道，我國商品肉雞氣囊炎和支氣管堵塞病例中的60%是由ORT、 溫和型AIV、支原體混合感染引起；30%由ORT、溫和型AIV、鏈球菌、支原體混合感染引導(dǎo)；10%由ORT、鏈球菌混合感染引起。大腸桿菌不是引起氣囊炎和支氣管堵塞的主要原因， 而是ORT 發(fā)揮了重要作用，并且混合感染是加重病情的真正原因[8]。 由以上得出，引起雞支氣管堵塞的病原有多種，包括NDV、IBV、溫和型AIV、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、沙門菌、ORT、金黃色葡萄球菌等，大多數(shù)情況為多重病原混合感染。

呼吸道感染是目前全世界家禽死亡率上升的一個(gè)重要原因[9]。 呼吸道損傷是食用動(dòng)物中最常見的病理狀況之一，是由病原體和環(huán)境因素協(xié)同引起的。 從國外參考文獻(xiàn)中未查到雞支氣管堵塞疾病，但根據(jù)支氣管堵塞為多病因引起的呼吸道疾病，查找出國外相關(guān)呼吸道病的發(fā)生及研究進(jìn)展等情況。 低致病性AIV、禽偏肺病毒（aMPV）、IBV、傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）、支原體、大腸桿菌和/或ORT， 在家禽中被認(rèn)為是呼吸道疾病的主要共感染因子；曲霉屬、多殺性巴氏桿菌、副鳥桿菌或鸚鵡衣原體也可能與呼吸道疾病暴發(fā)有關(guān)[10]。AIV、IBV、NDV、禽肺病毒（APV）和雞毒支原體(MG) 已被認(rèn)為是家禽中最重要的致病微生物[10，11]。Sid, H.等[9]研究證實(shí)MG、MS、IBV、AIV 和aMPV 在阿爾及利亞家禽中有傳播，MG 和滑膜支原體（MS）在阿爾及利亞仍然是兩種重要的病原體。MG 與aMPV 或AIV 的實(shí)驗(yàn)性聯(lián)合感染加重了臨床癥狀，雞只體重減輕。

2 流行與分布

相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)現(xiàn)，支氣管堵塞在新疆[6]、河北[7]、山東[12]、吉林[13]等地均有發(fā)生，多發(fā)于秋末、冬春季節(jié)，多種日齡肉雞均可發(fā)生，主要發(fā)病階段為10～30 日齡[4]。 國外文獻(xiàn)報(bào)道多為IBV、ND、AIV、ILTV、MG、大腸桿菌、曲霉菌、鏈球菌等病原聯(lián)合感染；非洲[9]、約旦[11]、法國和摩洛哥[10]等地均有發(fā)生。 多發(fā)性呼吸道感染可能與不良衛(wèi)生或預(yù)防措施有關(guān)， 多重感染可能是家禽高死亡率的原因[9]，提示只要有多種病原體以及不良環(huán)境的存在，各地養(yǎng)雞場均可能發(fā)生。

3 發(fā)病機(jī)理

呼吸道病原體可獨(dú)立致病，或細(xì)菌與病毒共同致病。腺病毒和呼腸孤病毒， 通常被認(rèn)為是雞上呼吸道的繼發(fā)入侵者。 aMPV和ILTV 存在于呼吸道組織中，而IBV、ND 和AIV 也侵入其他組織，如腎臟和生殖系統(tǒng)（IBV）、胃腸道（ND，AIV）和中樞神經(jīng)系統(tǒng)（NDV，AIV）[14]。在發(fā)病機(jī)理方面，目前國外沒有發(fā)現(xiàn)相關(guān)報(bào)道，國內(nèi)僅王守榮[5]對(duì)肉雞氣管阻塞的發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了相關(guān)研究；王守榮研究表明阻塞物為脫落的上皮細(xì)胞、 血細(xì)胞以及滲出的纖維和蛋白。 通過病原體的分離鑒定，確定所研究病例為H9N2 亞型AIV、NDV、大腸桿菌及金黃色葡萄球菌的聯(lián)合感染，第二代Miseq 高通量測序表明不同樣品之間存在一定的物種差異， 地域?qū)悠分械募?xì)菌組成影響較大， 引發(fā)肉雞氣管阻塞的細(xì)菌病原體也有不同， 也進(jìn)一步解釋了國內(nèi)不同地區(qū)引起支氣管堵塞的病原體不一。 齊茜[4]對(duì)濰坊市不同地區(qū)肉仔雞支氣管栓塞病例進(jìn)行研究表明，24 個(gè)典型病例共分離到20 株致病性大腸桿菌和18株H9 亞型AIV， 兩種病原體聯(lián)合感染試驗(yàn)結(jié)果表明H9 亞型AIV 可以與多種血清型的大腸桿菌分離株在致病方面具有不同程度的協(xié)同作用。Pan 等[3]調(diào)查ORT 與鏈球菌聯(lián)合感染對(duì)SPF 雞和肉雞模型均出現(xiàn)典型的支氣管栓塞。 在商品家禽生產(chǎn)中，家禽對(duì)氣溶膠傳播疾病的易感性可能是由于過度擁擠、 強(qiáng)迫喂食以及為快速增重和產(chǎn)蛋而進(jìn)行的系列操作等， 而不是相對(duì)較弱的肺細(xì)胞防御[15]。 另外有報(bào)道稱[16]，禽肺內(nèi)游離的呼吸道巨噬細(xì)胞數(shù)量雖少，但不一定意味著肺防御的第一道防線就薄弱。

4 診斷方法

根據(jù)病雞的臨床癥狀、 剖檢病理變化可以對(duì)雞支氣管堵塞進(jìn)行初步診斷，通過PCR（或RT-PCR）或熒光PCR（或RT-PCR）檢測病毒、 細(xì)菌等病原體、 以及經(jīng)動(dòng)物回歸試驗(yàn)等進(jìn)行病原確定。 為更快速、準(zhǔn)確的對(duì)多病原進(jìn)行檢測，許多科研工作者不斷創(chuàng)新檢測方法。2016 年Laamiri, N.等[17]報(bào)道建立了一種新型的低聚核苷酸懸浮微陣列（Luminex 微球系統(tǒng)）多重DNA 懸浮芯片，用于快速檢測具有重要臨床意義的禽呼吸道病毒， 包括AIV、NDV、IBV 和ILTV 的單病毒和混合病毒感染。 2018 年報(bào)道建立了一種可同時(shí)檢測AIV、IBV、NDV 和ILTV4 種禽類呼吸道病毒的一步式多重實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄- PCR（rRT-PCR）方法，該多重檢測方法可作為一種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室檢測方法，用于快速、特異地檢測和定量現(xiàn)場感染樣本[18]。Croville G 等[10]建立了一種基于納米流體技術(shù)的創(chuàng)新定量PCR 方法，能夠在一次實(shí)時(shí)定量PCR 中同時(shí)篩選96 個(gè)帶有96 個(gè)病原體特異性PCR 引物的樣品， 可用于禽呼吸道疾病病原體的篩選，針對(duì)與禽類呼吸道感染相關(guān)的病毒、細(xì)菌和真菌等15 種呼吸道病原體進(jìn)行篩選。

5 防控措施

支氣管堵塞發(fā)生的外部原因主要是病毒病的流行、 環(huán)境刺激、疫苗應(yīng)激等，內(nèi)部主要原因?yàn)槿怆u自身的生理結(jié)構(gòu)[19]。 黃鵬[20]通過中醫(yī)辯證支氣管堵塞發(fā)生的原因，即為外感與內(nèi)傷兼致，外感為六淫外邪侵襲肺系；內(nèi)傷為五臟六腑功能失調(diào)。 風(fēng)為六淫之首，外感呼吸道常以風(fēng)為先導(dǎo)；臟腑功能失調(diào)，主要是臟腑病變涉及于肺，致肺衛(wèi)不固，外邪易侵襲，內(nèi)外合邪為病，常見的有霉菌毒素致胃腸功能失調(diào)。 由此可見，本病的病因是與六淫（寒、濕、燥、暑、風(fēng)、火）、飲食有關(guān)，病位主要在肺，可涉及脾、胃等。 據(jù)此，防控措施主要采取以下幾種方式：

5.1 提高飼養(yǎng)水平，營造良好環(huán)境

雞呼吸道堵塞性疾病的外感影響因素主要為環(huán)境因素，包括環(huán)境溫度、濕度、通風(fēng)以及飼養(yǎng)密度等；天氣突然變化或賊風(fēng)入侵，舍內(nèi)溫差過大，導(dǎo)致雞群受涼感冒，引起呼吸道疾??；氣候干燥，舍內(nèi)濕度較低，氣管流失過多的水分，造成氣管纖毛發(fā)生脫落，導(dǎo)致病原菌更容易感染氣管粘膜而引起發(fā)??；粉塵過多與痰液相互混合，導(dǎo)致氣管、支氣管堵塞。 所以要保持環(huán)境衛(wèi)生，防寒保溫，減少溫差、降氨降塵。 飼養(yǎng)密度適宜，營養(yǎng)均衡，防止應(yīng)激，增強(qiáng)抵抗力，盡可能避免不良因素刺激[21]。

5.2 加強(qiáng)生物安全，控制病原傳播

加強(qiáng)外部與內(nèi)部生物安全管理， 外部生物安全通常以堵為主，內(nèi)部生物安全以凈化為主[22]。外防通過養(yǎng)殖場的建設(shè)、外部車輛及人員入場的管理、生態(tài)及水等環(huán)境評(píng)價(jià)、種源及外來投入品的質(zhì)量把控等防止外界或新的病原微生物侵入雞只體內(nèi)。 另外，內(nèi)部生物安全管理應(yīng)抓好基礎(chǔ)免疫、檢測凈化、環(huán)境消毒、人員及物品管理等細(xì)節(jié)，還有加強(qiáng)病死家禽、帶毒（菌） 家禽、鼠類和蚊、蠅、蜱、虻等媒介昆蟲的管理，正確處理、殺滅并防止其繁殖，有效防止疾病傳播和蔓延等[23]。 另外，養(yǎng)殖場建設(shè)要避開候鳥和野鳥的遷徙路線，避免接觸未受保護(hù)的病鳥或死鳥，以盡量減少潛在疫情傳播風(fēng)險(xiǎn)[24]。

5.3 強(qiáng)化疫病監(jiān)測，嚴(yán)防大規(guī)模流行

從雞支氣管堵塞病原來看，AIV、NDV 等傳染性較強(qiáng)的疫病病原體常并發(fā)呼吸道感染，Musa, W.I.等[25]研究確定了尼日利亞兩個(gè)州鳥類中AIV 和NDV 的合并感染狀況，并預(yù)見這些病毒交換遺傳物質(zhì)以增加毒性而復(fù)活的可能性。 因此， 常規(guī)的AIV 和ND 控制措施應(yīng)包括病毒監(jiān)測，并對(duì)飼養(yǎng)的家禽和野生鳥類采取適當(dāng)預(yù)防措施。 Huang, Q.等[26]研究結(jié)果表明，與AIV、IBV 分別感染雞相比，AIV+IBV 聯(lián)合感染組表面活性劑蛋白A（SP-A）表達(dá)水平顯著降低。 提示在防治該病過程中， 盡可能減少多病原互作，可一定程度減少病癥程度。

5.4 活禽市場管理，預(yù)防公共衛(wèi)生事件

Young, S.G.等[27]利用生態(tài)位模型確定了H5N1 和H9N2 亞型AI 在埃及的生態(tài)位的環(huán)境、行為和種群特征。 不同亞型的生態(tài)位顯著不同。 利用單亞型流感暴發(fā)和公開可用的生態(tài)數(shù)據(jù)，以較高的精度確定了可能發(fā)生合并感染的區(qū)域。 并證明距離活禽市場的距離是聯(lián)合感染的一個(gè)強(qiáng)有力的預(yù)測因子。 Su, S. 等[28]2013 年首次從活禽交易市場分離H7N9 亞型AIV， 表明了中國現(xiàn)有的家禽貿(mào)易和活禽市場體系對(duì)人類所構(gòu)成的持續(xù)威脅，病毒的不斷進(jìn)化對(duì)公共衛(wèi)生和家禽業(yè)構(gòu)成了長期威脅， 因此必須加強(qiáng)活禽交易市場的防控管理。 2016-2017 年，鐵嶺市城鄉(xiāng)活禽市場外環(huán)境中存在致病性禽流感傳播風(fēng)險(xiǎn)，AIV 主要為H5 和H9 亞型，應(yīng)加強(qiáng)城鄉(xiāng)活禽市場的管控[29]。 農(nóng)貿(mào)市場和活禽市場AIV 陽性率分別為36.1%和47.0%，明顯高于其他場所[30]。

5.5 加快藥物及疫苗研發(fā)，進(jìn)行有效防治

以AIV 為例，一般來說，高致病性疾病因其高死亡率和典型病變很容易做出臨床診斷， 而低致病性毒株引起的疾病通常不易識(shí)別，且低致病性毒株可變成高致病性毒株。 AIV 的控制是在根除疾病來消滅病毒的基礎(chǔ)上， 建立一個(gè)使用滅活疫苗來降低病毒增殖速度的疫苗接種計(jì)劃，最終實(shí)現(xiàn)消滅病毒[14]。 AIV 疫苗包括滅活疫苗、基因工程疫苗、減毒活疫苗等。 由于流感病毒亞型較多，基因重組等問題，雖已經(jīng)研發(fā)出各種流感病毒疫苗，但疫苗在臨床應(yīng)用中仍然有較多缺點(diǎn)[31]，另外，隨著疫苗的使用，基因重組的傾向性可能使病毒在野外的進(jìn)化和多樣性增加，疫苗可能并非是解決病毒感染的最優(yōu)辦法。

中藥在治療病毒性疾病方面具有治愈率高、耐藥性低、預(yù)后良好的特點(diǎn)。 大多數(shù)中藥在抗病毒的同時(shí)， 還具有調(diào)節(jié)免疫功能、解熱鎮(zhèn)痛、抗菌消炎等綜合療效。 中藥抗病毒研究已經(jīng)取得了較大進(jìn)展，但仍有許多問題需要解決[32]。

6 展望

總體而言，雞支氣管堵塞是病毒、細(xì)菌等多種病原微生物及不良環(huán)境共同造成的結(jié)果， 目前對(duì)該病的機(jī)理性研究及防治措施相對(duì)比較缺乏，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，養(yǎng)殖環(huán)境、飼養(yǎng)管理技術(shù)、生物安全措施的進(jìn)一步提高，安全高效藥物及疫苗的進(jìn)一步研發(fā)，雞支氣管堵塞有望得以解決。