傳染性法氏囊病的診斷與防控

文│紀(jì)貝貝 孫芳（山東省青島市市級公園管理服務(wù)中心）

在家禽養(yǎng)殖過程中，傳染性法氏囊病病毒（IBDV）是家禽養(yǎng)殖中的一個限制因素。IBDV導(dǎo)致的免疫抑制可造成免疫接種失敗和雞繼發(fā)感染其他病原體。例如，低致病性禽流感病毒在傳染性法氏囊病毒（IBDV）感染的雞體內(nèi)連續(xù)傳代時，其毒力會增強。高致病力的IBDV在雞群中會引起較高的死亡率。

除生物安全外，接種疫苗是預(yù)防傳染性法氏囊病的重要措施。經(jīng)典毒株和變異毒株制成的疫苗已經(jīng)使用了很多年，但仍有新毒株的出現(xiàn)。新出現(xiàn)的毒株可逃離疫苗誘導(dǎo)的免疫，并可能在基因組中參與重組。因此，了解傳染性法氏囊病的流行現(xiàn)狀和采取預(yù)防措施是控制傳染性法氏囊病的關(guān)鍵。

一、診斷

1.雞胚接種。取病死雞法氏囊、脾或腎等組織器官，按常規(guī)方法配制病料懸液，經(jīng)過離心、沉淀后添加雙抗，取上清液接種到9～11日齡雞胚，經(jīng)過3～5天培養(yǎng)，雞胚死亡，剖檢可見胚體和絨毛尿囊膜出現(xiàn)病變。

2.易感雞接種。選取4只同日齡健康雞，隨機分成試驗組和對照組，前者接種病料懸液，每只0.8毫升，可采取3種接種途徑，分別為口服、滴眼、滴鼻；后者接種等劑量的生理鹽水。兩組雞分開飼養(yǎng)，但飼養(yǎng)條件相同，經(jīng)過2天飼養(yǎng)，試驗組雞出現(xiàn)采食減少，排出黃色或者血色的水樣糞便，經(jīng)剖檢可見法氏囊腫大、出血，與自然感染死亡病雞的變化相同，而對照組雞一切正常。

二、疫苗防控

1.新一代疫苗佐劑。由于疫苗，特別是非復(fù)制結(jié)構(gòu)即亞單位疫苗和D N A疫苗可提供部分保護，開發(fā)新的疫苗佐劑可有助于提高這些疫苗的免疫原性和保護作用。已有研究證明，與僅表達VP2/4/3和IL-18的DNA疫苗相比，用VP2/4/3和IL-18共同表達的DNA疫苗對雞的免疫具有更好的保護作用。將IL-2與VP2基因一同克隆到真核表達載體中，所表達的產(chǎn)物免疫增強作用顯著。

如Negash等人所示，佐劑的使用可能會改變疫苗效力，應(yīng)用不同的佐劑可提高疫苗的效力。豬乳鐵蛋白，98HSP，雞β-防御素-1等已進行了試驗測試，合成的PAMP模擬物或CpG寡脫氧核苷酸結(jié)合可形成不同的疫苗。編碼hsp 70 C末端結(jié)構(gòu)域的結(jié)核分枝桿菌DNA疫苗與不含HSP的VP2 DNA疫苗相比，VP2基因與全長VP2基因融合的DNA疫苗可誘導(dǎo)更高的抗體水平。

2.黏膜疫苗注射。通過特定的免疫部位，例如抗原遞增細(xì)胞，來優(yōu)化候選疫苗。微粒（MP）和納米粒子傳遞系統(tǒng)，特別是由可降解的聚合物（如聚乳酸-）制成的系統(tǒng)。乙醇酸（PLGA）和殼聚糖已用于家禽疫苗的黏膜傳遞，具有防止黏膜酶降解疫苗和控制抗原緩慢釋放的優(yōu)點。將IBDV DNA疫苗與不同PLGAMPS吸附的雞IL-2或CpG寡核苷酸質(zhì)粒結(jié)合在一起，對雞的黏膜免疫可產(chǎn)生明顯的T細(xì)胞應(yīng)答和免疫保護作用。

3.反向遺傳學(xué)和疫苗學(xué)。在IBDV控制策略中，引入針對循環(huán)IBDV重組亞群的疫苗可能是必要的。通過反向遺傳系統(tǒng)，可用于IBDV的特性鑒定和疫苗的研制。

三、結(jié)論和未來展望

預(yù)防IBDV仍然是家禽養(yǎng)殖的重點。此外，新出現(xiàn)的IBDV毒株的鑒定，是研制新疫苗的一個重要因素。未來使用測序技術(shù)和生物信息學(xué)來了解IBDV的流行病學(xué)，可預(yù)測某些毒株在不同地域的分布。

宿主體內(nèi)感染決定了病原體向新宿主傳播和在種群中傳播的能力。因此，進一步了解IBDV的發(fā)病機制及其與天然免疫系統(tǒng)間的相互作用，為IBDV的預(yù)防控制提供依據(jù)。

近年來，IBDV亞單位疫苗和重組載體疫苗已獲得了批準(zhǔn)，克服了經(jīng)典疫苗的一些問題。IBDV的DNA疫苗還未研制成功，主要原因是疫苗的保護作用較差，尤其是在黏膜接種后。通過測試新佐劑來刺激先天免疫和后天免疫，可改進新型疫苗接種效力。除傳統(tǒng)佐劑外，其他改善疫苗誘導(dǎo)免疫的創(chuàng)新方法，包括代謝途徑抑制劑、炎癥水平調(diào)節(jié)劑、針對檢查點抑制劑的單克隆抗體、載體疫苗等均在抑制經(jīng)典減毒疫苗毒株的毒力返強方面起到重要作用。