紫外可見光檢測器反相高效液相色譜法檢測肉雞及其肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅?/h1>
2017-04-27 07:31:33秦宵寒
河南畜牧獸醫(yī) 2017年6期
秦宵寒（譯）
（華北水利水電大學(xué)國際教育學(xué)院科技英語238班，河南 鄭州 450008）
紫外可見光檢測器反相高效液相色譜法檢測肉雞及其肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅?/p>
秦宵寒（譯）
（華北水利水電大學(xué)國際教育學(xué)院科技英語238班，河南 鄭州 450008）
家禽業(yè)是世界上規(guī)模較大、發(fā)展速度較快的行業(yè)之一。隨著全球范圍內(nèi)肉類需求量的增長，相對(duì)于其他動(dòng)物肉品而言，禽肉的低廉價(jià)格使得家禽業(yè)的重要性日益凸顯。全球禽肉的產(chǎn)量以每年4%的比例持續(xù)增長。雖然禽肉的消費(fèi)量很大，但它經(jīng)常會(huì)受到由沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和李斯特菌等微生物所引發(fā)的污染。因此，家禽業(yè)在把重點(diǎn)放在為人類提供更安全的肉類滿足消費(fèi)者需求的同時(shí)，在通過各種方式提高禽類的動(dòng)物福利方面還面臨著許多重大的問題和挑戰(zhàn)?？股夭粌H用來治愈禽類的疾病，還用來防止傳染并促進(jìn)生長。然而，這些藥物不僅會(huì)在禽肉中積聚，而且這些藥物殘留可能會(huì)造成耐藥菌的產(chǎn)生，并通過人們食用而傳染給人。由于這些可能出現(xiàn)的副作用，監(jiān)管機(jī)構(gòu)和國家食品安全部門禁用了一些抗菌藥物。為了保護(hù)消費(fèi)者不受畜禽肉類中藥物殘留所帶來的副作用影響，包括中國、加拿大、日本及歐盟成員國在內(nèi)的許多國家都根據(jù)其養(yǎng)殖業(yè)用藥實(shí)踐的相關(guān)法律出臺(tái)了藥物最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。
氟苯尼考和氯霉素同屬于胺酰醇類抗生素，由于二者都是能夠有效應(yīng)對(duì)多種微生物的廣譜藥劑，因此被廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中。人類食用氯霉素會(huì)引發(fā)敗血癥，雖說從表面上看起來氟苯尼考并沒有這種副作用，因而相對(duì)于氯霉素來說用在為人類提供食物的動(dòng)物身上更安全些。但是，積聚在各種肉用動(dòng)物體組織中的藥物殘留最終不僅會(huì)給動(dòng)物的健康造成威脅，也會(huì)危及人類的健康。美國食品藥品管理局對(duì)動(dòng)物組織中氯霉素的容許量為零（所以沒有任何最大殘留限量的規(guī)定），因此氯霉素被禁用。歐盟也根據(jù)其氯霉素在獸醫(yī)實(shí)踐中的最大殘留限量，制定了更為嚴(yán)格的準(zhǔn)則。
盡管在食用畜禽使用抗生素藥物方面制定了嚴(yán)格的準(zhǔn)則，許多發(fā)展中國家仍存在非法濫用此類藥物的現(xiàn)象。因此，制定一些適合分析畜禽肉類中違禁藥品的殘留并確定可使用藥劑在肉雞中最大殘留限量的方法是很有必要的。此類方法中包括以保障人們購買到安全的肉制品為目的的紫外可見光檢測器的高效液相色譜法及免疫分析方法。在巴基斯坦，一些家禽飼養(yǎng)場沒有遵守關(guān)于食用動(dòng)物用藥方面的嚴(yán)格規(guī)定；在使用靈敏的方法來對(duì)畜禽肉類中的藥物殘留進(jìn)行初步檢測方面也缺乏可對(duì)比的公開數(shù)據(jù)。該研究用紫外可見光檢測器的高效液相色譜法來檢測出欄肉雞體內(nèi)氟苯尼考的殘留量，目的是提供詳細(xì)的事關(guān)人類健康的氟苯尼考?xì)埩袅繑?shù)據(jù)。
1 樣品采集
巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市農(nóng)業(yè)大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了該研究所用的全部程序。從費(fèi)薩拉巴德市的15家養(yǎng)殖場中各自隨機(jī)選取了5只出欄肉雞，這些肉雞都曾按照30 mg/kg的劑量，連續(xù)4d攝入了氟苯尼考。在無菌條件下從這些肉雞的身體組織中分別采集了5～10 g胸脯肉和肝樣品，并分別封裝進(jìn)自封口塑料袋中，每個(gè)袋子上都貼上標(biāo)簽，并在冷藏條件下全部運(yùn)至當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)大學(xué)生理藥理學(xué)系的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，在-20℃冷凍條件下保存?zhèn)溆谩?/p>
2 化學(xué)用品及試劑
實(shí)驗(yàn)中用到的化學(xué)用品及試劑有乙腈（泰國曼谷RCI LabScan有限公司制造的HPLC級(jí)溶劑），乙酸乙酯（產(chǎn)自德國塞爾策的里德爾德漢），正己烷（韓國始興市化學(xué)用品及金屬有限公司）以及去離子水。氟苯尼考（純度98%）購自巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市A&K制藥有限公司。
3 設(shè)備和儀器
色析法系統(tǒng)包括一個(gè)Hypersil BDS C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm），一個(gè)Sykam的S1122溶劑輸送系統(tǒng)，一個(gè)型號(hào)為S3210的Sykam紫外可見光檢測器，一個(gè)恒溫柱箱，一個(gè)Elma的460/H近距離聲波定位器，適用于Windows的PeakSimple集成軟件（3.29版本），一個(gè)分析天平（島津），一個(gè)均質(zhì)器（德國IKA實(shí)驗(yàn)室技術(shù)公司），一個(gè)TJ-6冷卻離心機(jī)（美國貝克曼）以及濾頭（0.45 μm）。
4 標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)備
用乙腈制備出1 000 μg/ml的氟苯尼考儲(chǔ)備溶液備用。通過乙腈稀釋，得到一系列可用的濃度（10～100 μg/ mL）；取其中的20 μL導(dǎo)入HPLC系統(tǒng)用以研究。通過繪制峰面積相對(duì)各自的濃度（μg/mL）得到標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線。
5 樣品提取與HPLC計(jì)算
徹底解凍事前冷凍起來的雞脯和肝臟樣品并粉碎，取約5 g的雞脯或肝臟樣品放入一個(gè)50 mL的離心管中，之后加入5 mL磷酸鹽緩沖液以及20 mL乙酸乙酯。這些混合物要渦旋3 min以上直至均勻，每份樣品的上清液被轉(zhuǎn)移至干凈的離心管中，剩余部分重復(fù)上述流程兩次，合并三次提取液，倒入燒瓶，60℃水浴下氮?dú)獯蹈?，得到的殘?jiān)c3mL的流動(dòng)相（乙腈/水，27：73 v/v）、2 mL的正己烷進(jìn)行混合，然后以4 000×g的轉(zhuǎn)速在離心機(jī)中將這些混合物轉(zhuǎn)10 min。沉在底部的液體用濾頭進(jìn)行過濾，之后取其中的20 mL注入HPLC系統(tǒng)。用223 nm的紫外可見光檢測器做檢測，使液體流速保持在1 mL/min。
6 計(jì)算樣品中藥物濃度的公式
公式中的y指所提取樣品的峰值區(qū)域，b指標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距，V指所提取樣品的體積（mL），m指標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，W指樣品的重量（g）。
7 統(tǒng)計(jì)分析
對(duì)全部數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，通過MS Office2007軟件計(jì)算出15個(gè)家禽養(yǎng)殖場的均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差。
表1 通過高效液相色譜法檢測出的呈氟苯尼考陽性的肉雞組織樣品
8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
該次實(shí)驗(yàn)是在從巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市15家禽類養(yǎng)殖場中隨機(jī)挑選的75只肉雞身上完成的。對(duì)通過采取HPLC法實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以確定氟苯尼考在雞脯和雞肝樣品中平均的殘留濃度。表1中列出了雞脯和雞肝樣品呈氟苯尼考陽性的數(shù)據(jù)，根據(jù)這些數(shù)據(jù)可以看出75份樣品中有63份有氟苯尼考?xì)埩?，只?2份不含抗生素。同樣，在75份肉雞肝臟樣品中，63份呈氟苯尼考陽性，只有12份呈陰性。因此，在這些樣品中氟苯尼考陽性與氟苯尼考陰性占比分別為84%和16%，即分別有126份陽性樣品和24份陰性樣品。在所有陽性樣品中，52份雞脯樣品和32份肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅科骄捣謩e為311.42±186.56 μg/kg和2 585.44±1759.71 μg/kg，都超過了通用的氟苯尼考最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（見表1）。在所有陽性樣品中，有84例（占比67%）超出氟苯尼考最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，只有42例（占比33%）低于此標(biāo)準(zhǔn)；超標(biāo)的樣品不安全，因而不適合人類食用。氟苯尼考?xì)埩袅吭谌怆u身體組織樣品中的平均濃度展列在表2中，以超出最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（EMRL）或低于最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（BMRL）來顯示。
9 討論
禽肉是牛羊肉等紅肉良好的替代品。對(duì)于作為發(fā)展中國家的巴基斯坦來說，對(duì)禽肉的需求量是極大的。盡管發(fā)展中國家對(duì)禽肉十分依賴，這類肉卻很容易受到多種病菌的影響。在家禽養(yǎng)殖中，抗生素用來預(yù)防及治療禽類疾病，也作為生長劑使用。由于養(yǎng)殖人員對(duì)適當(dāng)?shù)男菟幤谌狈α私猓３＿^量使用或誤用藥物，因而藥物殘留得以在肉制品中積聚。為了避免此類情況的發(fā)生，有關(guān)部門應(yīng)制定禽畜出欄前的休藥時(shí)間和藥物最大殘留限量的標(biāo)準(zhǔn)。為了保障人們的健康，相關(guān)監(jiān)測部門有必要設(shè)計(jì)出一種靈敏準(zhǔn)確的方法來檢測畜禽肉類中的藥物殘留量。氯霉素家族中的廣譜抗生素氟苯尼考是治療各種家禽疾病的常用藥物，盡管它相對(duì)而言比較安全，但如果過量使用仍會(huì)導(dǎo)致藥物殘留。
親脂性的藥物在使用過程中有很大的可能會(huì)滲透進(jìn)動(dòng)物的肺、肝臟、腎臟、肌肉及表皮等不同的身體組織中。由于這些藥物具有很長的半衰期，它們會(huì)在動(dòng)物的身體組織中存留很長的時(shí)間，導(dǎo)致藥物殘留的不斷積聚，藥物殘留最終會(huì)對(duì)食用動(dòng)物肉制品的人的健康造成嚴(yán)重影響。此外，如果在動(dòng)物出欄前沒有設(shè)置適當(dāng)?shù)男菟幤?，也?huì)導(dǎo)致藥物殘留。以上這些情況都會(huì)對(duì)食用過這些受污染雞肉的人的健康造成嚴(yán)重影響。
先前的一項(xiàng)用高效液相色譜紫外方法檢測來源于不同養(yǎng)殖場肉雞的肉和肝臟樣品的實(shí)驗(yàn)也得到了同樣的結(jié)果。也有其他實(shí)驗(yàn)用乙酸乙酯和磷酸鹽緩沖液來提取雞肉中的氟苯尼考?xì)埩?，用正己烷去脂肪?/p>
該研究在對(duì)150例肉雞在胸脯肉和肝臟樣品進(jìn)行的氟苯尼考?xì)埩袅康臋z測中，126例樣品（其中雞胸脯和肝臟各63例）被查出含有氟苯尼考?xì)埩?。而在這些含有藥物殘留的樣品中，又有84例（52例雞脯樣品和32例雞肝樣品）中的氟苯尼考?xì)埩袅看笥谧畲髿埩粝蘖?，不適合人類食用。該研究的結(jié)果與其他許多研究相一致。一項(xiàng)在埃及進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，氟苯尼考會(huì)殘留在肉雞的肌肉組織、肝臟和血清中，而且肝臟中的氟苯尼考濃度比肌肉和血清中的要高，除此之外，他們還提出停藥時(shí)間應(yīng)該為出欄前5 d。另外兩項(xiàng)研究也發(fā)現(xiàn)了氯霉素、甲砜氯霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺在禽肉及肝臟中的殘留。
如表1所示，在126例呈氟苯尼考陽性的樣品中，有33%的樣品低于最大殘留限量，67%的樣品高于這一限量。通過測算，肉雞胸脯與肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅康钠骄鶟舛确謩e為311.42 μg/kg和2 585.44 μg/kg。這一結(jié)果顯示這些樣品的平均氟苯尼考濃度超過了歐盟制定的氟苯尼考最大殘留量的標(biāo)準(zhǔn)（分別為100 μg/kg和2 500 μg/kg）。
表2 從15個(gè)家禽養(yǎng)殖場抽取的雞肉和雞肝樣品中的氟苯尼考濃度（平均值加減標(biāo)準(zhǔn)差）
在該實(shí)驗(yàn)中，所有結(jié)果都表明肉雞肝臟中的氟苯尼考?xì)埩袅看蟠蟾哂陔u肉中的殘留量。這一結(jié)論同樣被許多其他研究證實(shí)。之所以會(huì)產(chǎn)生這樣的現(xiàn)象，是因?yàn)楦闻K是肉雞體內(nèi)負(fù)責(zé)代謝的器官。大多數(shù)藥物的代謝都發(fā)生在肝臟，因而肝臟會(huì)接觸到各種藥劑和異生物質(zhì)。不僅如此，與肌肉組織相比，肝臟具有更強(qiáng)的可灌注性，因此，肝臟里的藥物濃度總是比肌肉組織里的高。在該實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)雞脯樣品中藥物殘留濃度超標(biāo)現(xiàn)象要比肝臟樣品明顯，這意味著出欄時(shí)肉雞體內(nèi)的大部分藥物殘留已經(jīng)從肝臟向身體組織發(fā)生了轉(zhuǎn)移，15個(gè)家禽養(yǎng)殖場的雞肉樣品的氟苯尼考濃度均值全部超出了最大殘留限量，而只有6個(gè)養(yǎng)殖場的肝臟樣品的氟苯尼考濃度均值超標(biāo)。另一項(xiàng)關(guān)于肉雞的研究表明，氟苯尼考在肉雞的身體組織中具有很強(qiáng)的滲透性，因此肉雞腎臟、肝臟和雞肉中氟苯尼考的濃度大于其在肉雞血漿中的濃度，而且，血漿蛋白與氟苯尼考的結(jié)合較少，這也是導(dǎo)致氟苯尼考在肉雞身體的各種組織中積聚的原因。這和El-Banna等人所做的“氟苯尼考（水溶性制劑）對(duì)健康肉雞和感染大腸桿菌肉雞的功效和組織殘留消除規(guī)律”研究結(jié)果相一致，該項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)肉雞肝臟和腎臟中氟苯尼考?xì)埩魸舛雀叩脑蚴沁@兩個(gè)器官在新陳代謝中所負(fù)責(zé)的物質(zhì)配送量很大，而血漿蛋白與氟苯尼考的結(jié)合相對(duì)較少。
氟苯尼考是相對(duì)安全的藥品，但過量使用會(huì)導(dǎo)致其在動(dòng)物體內(nèi)的殘留，給食用受到污染的肉制品的人帶來極大危害，因此，要嚴(yán)格按照各國食品安全機(jī)構(gòu)所制定的相關(guān)政策法規(guī)使用。休藥期應(yīng)有明確規(guī)定，建議要有5 d的氟苯尼考休藥期。
10 結(jié)論
從以上研究結(jié)果中我們可以得出結(jié)論，巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市所收集的肉雞及其肝臟樣品中氟苯尼考的殘留濃度高于規(guī)定的最大殘留限量，這是一個(gè)很嚴(yán)重的問題，有必要擴(kuò)大檢測工作范圍，以確定巴基斯坦其他地區(qū)肉雞體內(nèi)氟苯尼考?xì)埩袅?。?jīng)常食用受污染雞肉的消費(fèi)者會(huì)攝入小劑量的氟苯尼考，導(dǎo)致病菌耐藥性。因此，要使養(yǎng)殖者認(rèn)識(shí)到藥物殘留對(duì)消費(fèi)者健康的不利影響，并教育他們學(xué)會(huì)使用休藥期。對(duì)生肉和熟肉制品中其他抗生素殘留進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測很有必要。有必要成立一個(gè)法律團(tuán)隊(duì)來監(jiān)測肉制品中藥物殘留水平。□
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氟苯尼考和氯霉素同屬于胺酰醇類抗生素，由于二者都是能夠有效應(yīng)對(duì)多種微生物的廣譜藥劑，因此被廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中。人類食用氯霉素會(huì)引發(fā)敗血癥，雖說從表面上看起來氟苯尼考并沒有這種副作用，因而相對(duì)于氯霉素來說用在為人類提供食物的動(dòng)物身上更安全些。但是，積聚在各種肉用動(dòng)物體組織中的藥物殘留最終不僅會(huì)給動(dòng)物的健康造成威脅，也會(huì)危及人類的健康。美國食品藥品管理局對(duì)動(dòng)物組織中氯霉素的容許量為零（所以沒有任何最大殘留限量的規(guī)定），因此氯霉素被禁用。歐盟也根據(jù)其氯霉素在獸醫(yī)實(shí)踐中的最大殘留限量，制定了更為嚴(yán)格的準(zhǔn)則。
盡管在食用畜禽使用抗生素藥物方面制定了嚴(yán)格的準(zhǔn)則，許多發(fā)展中國家仍存在非法濫用此類藥物的現(xiàn)象。因此，制定一些適合分析畜禽肉類中違禁藥品的殘留并確定可使用藥劑在肉雞中最大殘留限量的方法是很有必要的。此類方法中包括以保障人們購買到安全的肉制品為目的的紫外可見光檢測器的高效液相色譜法及免疫分析方法。在巴基斯坦，一些家禽飼養(yǎng)場沒有遵守關(guān)于食用動(dòng)物用藥方面的嚴(yán)格規(guī)定；在使用靈敏的方法來對(duì)畜禽肉類中的藥物殘留進(jìn)行初步檢測方面也缺乏可對(duì)比的公開數(shù)據(jù)。該研究用紫外可見光檢測器的高效液相色譜法來檢測出欄肉雞體內(nèi)氟苯尼考的殘留量，目的是提供詳細(xì)的事關(guān)人類健康的氟苯尼考?xì)埩袅繑?shù)據(jù)。
1 樣品采集
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2 化學(xué)用品及試劑
實(shí)驗(yàn)中用到的化學(xué)用品及試劑有乙腈（泰國曼谷RCI LabScan有限公司制造的HPLC級(jí)溶劑），乙酸乙酯（產(chǎn)自德國塞爾策的里德爾德漢），正己烷（韓國始興市化學(xué)用品及金屬有限公司）以及去離子水。氟苯尼考（純度98%）購自巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市A&K制藥有限公司。
3 設(shè)備和儀器
色析法系統(tǒng)包括一個(gè)Hypersil BDS C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm），一個(gè)Sykam的S1122溶劑輸送系統(tǒng)，一個(gè)型號(hào)為S3210的Sykam紫外可見光檢測器，一個(gè)恒溫柱箱，一個(gè)Elma的460/H近距離聲波定位器，適用于Windows的PeakSimple集成軟件（3.29版本），一個(gè)分析天平（島津），一個(gè)均質(zhì)器（德國IKA實(shí)驗(yàn)室技術(shù)公司），一個(gè)TJ-6冷卻離心機(jī)（美國貝克曼）以及濾頭（0.45 μm）。
4 標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)備
用乙腈制備出1 000 μg/ml的氟苯尼考儲(chǔ)備溶液備用。通過乙腈稀釋，得到一系列可用的濃度（10～100 μg/ mL）；取其中的20 μL導(dǎo)入HPLC系統(tǒng)用以研究。通過繪制峰面積相對(duì)各自的濃度（μg/mL）得到標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線。
5 樣品提取與HPLC計(jì)算
徹底解凍事前冷凍起來的雞脯和肝臟樣品并粉碎，取約5 g的雞脯或肝臟樣品放入一個(gè)50 mL的離心管中，之后加入5 mL磷酸鹽緩沖液以及20 mL乙酸乙酯。這些混合物要渦旋3 min以上直至均勻，每份樣品的上清液被轉(zhuǎn)移至干凈的離心管中，剩余部分重復(fù)上述流程兩次，合并三次提取液，倒入燒瓶，60℃水浴下氮?dú)獯蹈?，得到的殘?jiān)c3mL的流動(dòng)相（乙腈/水，27：73 v/v）、2 mL的正己烷進(jìn)行混合，然后以4 000×g的轉(zhuǎn)速在離心機(jī)中將這些混合物轉(zhuǎn)10 min。沉在底部的液體用濾頭進(jìn)行過濾，之后取其中的20 mL注入HPLC系統(tǒng)。用223 nm的紫外可見光檢測器做檢測，使液體流速保持在1 mL/min。
6 計(jì)算樣品中藥物濃度的公式
公式中的y指所提取樣品的峰值區(qū)域，b指標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距，V指所提取樣品的體積（mL），m指標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，W指樣品的重量（g）。
7 統(tǒng)計(jì)分析
對(duì)全部數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，通過MS Office2007軟件計(jì)算出15個(gè)家禽養(yǎng)殖場的均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差。
表1 通過高效液相色譜法檢測出的呈氟苯尼考陽性的肉雞組織樣品
8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
該次實(shí)驗(yàn)是在從巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市15家禽類養(yǎng)殖場中隨機(jī)挑選的75只肉雞身上完成的。對(duì)通過采取HPLC法實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以確定氟苯尼考在雞脯和雞肝樣品中平均的殘留濃度。表1中列出了雞脯和雞肝樣品呈氟苯尼考陽性的數(shù)據(jù)，根據(jù)這些數(shù)據(jù)可以看出75份樣品中有63份有氟苯尼考?xì)埩?，只?2份不含抗生素。同樣，在75份肉雞肝臟樣品中，63份呈氟苯尼考陽性，只有12份呈陰性。因此，在這些樣品中氟苯尼考陽性與氟苯尼考陰性占比分別為84%和16%，即分別有126份陽性樣品和24份陰性樣品。在所有陽性樣品中，52份雞脯樣品和32份肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅科骄捣謩e為311.42±186.56 μg/kg和2 585.44±1759.71 μg/kg，都超過了通用的氟苯尼考最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（見表1）。在所有陽性樣品中，有84例（占比67%）超出氟苯尼考最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，只有42例（占比33%）低于此標(biāo)準(zhǔn)；超標(biāo)的樣品不安全，因而不適合人類食用。氟苯尼考?xì)埩袅吭谌怆u身體組織樣品中的平均濃度展列在表2中，以超出最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（EMRL）或低于最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（BMRL）來顯示。
9 討論
禽肉是牛羊肉等紅肉良好的替代品。對(duì)于作為發(fā)展中國家的巴基斯坦來說，對(duì)禽肉的需求量是極大的。盡管發(fā)展中國家對(duì)禽肉十分依賴，這類肉卻很容易受到多種病菌的影響。在家禽養(yǎng)殖中，抗生素用來預(yù)防及治療禽類疾病，也作為生長劑使用。由于養(yǎng)殖人員對(duì)適當(dāng)?shù)男菟幤谌狈α私猓３＿^量使用或誤用藥物，因而藥物殘留得以在肉制品中積聚。為了避免此類情況的發(fā)生，有關(guān)部門應(yīng)制定禽畜出欄前的休藥時(shí)間和藥物最大殘留限量的標(biāo)準(zhǔn)。為了保障人們的健康，相關(guān)監(jiān)測部門有必要設(shè)計(jì)出一種靈敏準(zhǔn)確的方法來檢測畜禽肉類中的藥物殘留量。氯霉素家族中的廣譜抗生素氟苯尼考是治療各種家禽疾病的常用藥物，盡管它相對(duì)而言比較安全，但如果過量使用仍會(huì)導(dǎo)致藥物殘留。
親脂性的藥物在使用過程中有很大的可能會(huì)滲透進(jìn)動(dòng)物的肺、肝臟、腎臟、肌肉及表皮等不同的身體組織中。由于這些藥物具有很長的半衰期，它們會(huì)在動(dòng)物的身體組織中存留很長的時(shí)間，導(dǎo)致藥物殘留的不斷積聚，藥物殘留最終會(huì)對(duì)食用動(dòng)物肉制品的人的健康造成嚴(yán)重影響。此外，如果在動(dòng)物出欄前沒有設(shè)置適當(dāng)?shù)男菟幤?，也?huì)導(dǎo)致藥物殘留。以上這些情況都會(huì)對(duì)食用過這些受污染雞肉的人的健康造成嚴(yán)重影響。
先前的一項(xiàng)用高效液相色譜紫外方法檢測來源于不同養(yǎng)殖場肉雞的肉和肝臟樣品的實(shí)驗(yàn)也得到了同樣的結(jié)果。也有其他實(shí)驗(yàn)用乙酸乙酯和磷酸鹽緩沖液來提取雞肉中的氟苯尼考?xì)埩?，用正己烷去脂肪?/p>
該研究在對(duì)150例肉雞在胸脯肉和肝臟樣品進(jìn)行的氟苯尼考?xì)埩袅康臋z測中，126例樣品（其中雞胸脯和肝臟各63例）被查出含有氟苯尼考?xì)埩?。而在這些含有藥物殘留的樣品中，又有84例（52例雞脯樣品和32例雞肝樣品）中的氟苯尼考?xì)埩袅看笥谧畲髿埩粝蘖?，不適合人類食用。該研究的結(jié)果與其他許多研究相一致。一項(xiàng)在埃及進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，氟苯尼考會(huì)殘留在肉雞的肌肉組織、肝臟和血清中，而且肝臟中的氟苯尼考濃度比肌肉和血清中的要高，除此之外，他們還提出停藥時(shí)間應(yīng)該為出欄前5 d。另外兩項(xiàng)研究也發(fā)現(xiàn)了氯霉素、甲砜氯霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺在禽肉及肝臟中的殘留。
如表1所示，在126例呈氟苯尼考陽性的樣品中，有33%的樣品低于最大殘留限量，67%的樣品高于這一限量。通過測算，肉雞胸脯與肝臟樣品中氟苯尼考?xì)埩袅康钠骄鶟舛确謩e為311.42 μg/kg和2 585.44 μg/kg。這一結(jié)果顯示這些樣品的平均氟苯尼考濃度超過了歐盟制定的氟苯尼考最大殘留量的標(biāo)準(zhǔn)（分別為100 μg/kg和2 500 μg/kg）。
表2 從15個(gè)家禽養(yǎng)殖場抽取的雞肉和雞肝樣品中的氟苯尼考濃度（平均值加減標(biāo)準(zhǔn)差）
在該實(shí)驗(yàn)中，所有結(jié)果都表明肉雞肝臟中的氟苯尼考?xì)埩袅看蟠蟾哂陔u肉中的殘留量。這一結(jié)論同樣被許多其他研究證實(shí)。之所以會(huì)產(chǎn)生這樣的現(xiàn)象，是因?yàn)楦闻K是肉雞體內(nèi)負(fù)責(zé)代謝的器官。大多數(shù)藥物的代謝都發(fā)生在肝臟，因而肝臟會(huì)接觸到各種藥劑和異生物質(zhì)。不僅如此，與肌肉組織相比，肝臟具有更強(qiáng)的可灌注性，因此，肝臟里的藥物濃度總是比肌肉組織里的高。在該實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)雞脯樣品中藥物殘留濃度超標(biāo)現(xiàn)象要比肝臟樣品明顯，這意味著出欄時(shí)肉雞體內(nèi)的大部分藥物殘留已經(jīng)從肝臟向身體組織發(fā)生了轉(zhuǎn)移，15個(gè)家禽養(yǎng)殖場的雞肉樣品的氟苯尼考濃度均值全部超出了最大殘留限量，而只有6個(gè)養(yǎng)殖場的肝臟樣品的氟苯尼考濃度均值超標(biāo)。另一項(xiàng)關(guān)于肉雞的研究表明，氟苯尼考在肉雞的身體組織中具有很強(qiáng)的滲透性，因此肉雞腎臟、肝臟和雞肉中氟苯尼考的濃度大于其在肉雞血漿中的濃度，而且，血漿蛋白與氟苯尼考的結(jié)合較少，這也是導(dǎo)致氟苯尼考在肉雞身體的各種組織中積聚的原因。這和El-Banna等人所做的“氟苯尼考（水溶性制劑）對(duì)健康肉雞和感染大腸桿菌肉雞的功效和組織殘留消除規(guī)律”研究結(jié)果相一致，該項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)肉雞肝臟和腎臟中氟苯尼考?xì)埩魸舛雀叩脑蚴沁@兩個(gè)器官在新陳代謝中所負(fù)責(zé)的物質(zhì)配送量很大，而血漿蛋白與氟苯尼考的結(jié)合相對(duì)較少。
氟苯尼考是相對(duì)安全的藥品，但過量使用會(huì)導(dǎo)致其在動(dòng)物體內(nèi)的殘留，給食用受到污染的肉制品的人帶來極大危害，因此，要嚴(yán)格按照各國食品安全機(jī)構(gòu)所制定的相關(guān)政策法規(guī)使用。休藥期應(yīng)有明確規(guī)定，建議要有5 d的氟苯尼考休藥期。
10 結(jié)論
從以上研究結(jié)果中我們可以得出結(jié)論，巴基斯坦費(fèi)薩拉巴德市所收集的肉雞及其肝臟樣品中氟苯尼考的殘留濃度高于規(guī)定的最大殘留限量，這是一個(gè)很嚴(yán)重的問題，有必要擴(kuò)大檢測工作范圍，以確定巴基斯坦其他地區(qū)肉雞體內(nèi)氟苯尼考?xì)埩袅?。?jīng)常食用受污染雞肉的消費(fèi)者會(huì)攝入小劑量的氟苯尼考，導(dǎo)致病菌耐藥性。因此，要使養(yǎng)殖者認(rèn)識(shí)到藥物殘留對(duì)消費(fèi)者健康的不利影響，并教育他們學(xué)會(huì)使用休藥期。對(duì)生肉和熟肉制品中其他抗生素殘留進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測很有必要。有必要成立一個(gè)法律團(tuán)隊(duì)來監(jiān)測肉制品中藥物殘留水平。□
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