疏風(fēng)解毒膠囊對急性咽炎大鼠干預(yù)作用及機(jī)制探討

吳飛虎，宋任潔，錢雅琴，蔡傳羽，劉 鋼

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230031)

急性咽炎是耳鼻喉科常見病和多發(fā)病，其起病急，發(fā)展迅速，若診療不及時，還可能并發(fā)鼻竇炎、風(fēng)濕熱、急性腎炎、敗血癥等疾病[1]。西醫(yī)認(rèn)為，急性咽炎是咽部黏膜及黏膜下的非特異性炎癥，病變可以涉及鄰近及周圍的淋巴組織，病因多認(rèn)為與細(xì)菌感染、病毒感染、環(huán)境因素有關(guān)[2]。目前該病治療以抗菌、抗病毒為主，但大量頻繁使用抗生素容易產(chǎn)生耐藥，影響疾病臨床療效和轉(zhuǎn)歸，所以很多患者尋求中醫(yī)藥的治療。中醫(yī)認(rèn)為，急性咽炎病因多與外感風(fēng)熱、肺胃熱盛等有關(guān)，強(qiáng)調(diào)個體化治療，原則上以疏風(fēng)清熱、解毒利咽為主[3-4]。疏風(fēng)解毒膠囊源自“祛毒散”，此方系湘西老中醫(yī)祖?zhèn)鞣?，目前已?jīng)制成中成藥，廣泛應(yīng)用于急性咽炎的治療，療效確切，復(fù)發(fā)率低且安全性高[5-7]，但其治療急性咽炎的作用機(jī)制目前尚未明確。本研究觀察了疏風(fēng)解毒膠囊對急性咽炎大鼠的治療作用，初步探討了其抗炎的相關(guān)部分作用機(jī)制，旨在為該藥的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)，為其進(jìn)一步開發(fā)利用及拓展使用范圍提供理論支持。

1 實驗材料與方法

1.1藥物與試劑 疏風(fēng)解毒膠囊，安徽濟(jì)人藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字Z20090047，規(guī)格:0.52 g/粒；克拉霉素緩釋片，海南普利制藥股份有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H20051296，規(guī)格：0.5 g/片；25%氨水，鄭州市化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，規(guī)格：500 mL/瓶；10%福爾馬林中性固定液，南昌雨露實驗器材有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：500 mL/瓶；大鼠血清前列腺素E2(PGE2)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)試劑盒，購自北京安迪華泰科技有限公司，批號：20180509。

1.2動物 SPF級SD大鼠70只，體質(zhì)量(190±10)g，雌雄各半，由安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK(皖)2017-001。在安徽中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心正常飼養(yǎng)3 d，正常生長后入選。

1.3儀器 喉頭噴霧器，江蘇平安醫(yī)療器械有限公司，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號：YZB/蘇楊0120-2013；GL-88B型漩渦混合器，其林貝爾儀器制造公司；JW3021HR型離心機(jī)，安徽嘉文醫(yī)療器械有限公司；DNP-9052BS-Ⅲ型電熱恒溫箱，上海三發(fā)醫(yī)療器械有限公司；RT-6000型酶標(biāo)儀，雷杜醫(yī)療器械有限公司。

1.4實驗方法 將70只健康SD大鼠隨機(jī)分為7組，每組10只。正常組大鼠咽部噴生理鹽水，其余組大鼠參照文獻(xiàn)[8]方法制備急性咽炎模型：將15%的氨水放入喉頭噴霧器中噴大鼠咽部，2次/d，3撳/次，連續(xù)3 d，若大鼠出現(xiàn)咽部黏膜充血、腫脹及撓抓口咽為造模成功。從第4天開始，疏風(fēng)解毒膠囊高、中、低劑量組分別給予疏風(fēng)解毒膠囊2.2，1.1，0.55 g/(kg·d)灌胃(參照文獻(xiàn)[9]，按人與動物體表面積換算，分別相當(dāng)于臨床用量的2倍、等倍及1/2倍)，克拉霉素組給予克拉霉素緩釋片20 mg/(kg·d)灌胃(給藥劑量參照文獻(xiàn)[10])，正常組、模型組給予等量蒸餾水灌胃，均2次/d，連續(xù)5 d。

1.5觀察指標(biāo) 實驗過程中每天觀察和記錄各組動物飲水、飲食情況及活動強(qiáng)度、咽部黏膜變化(包括咽部黏膜的顏色、形態(tài)、分泌物情況)。末次灌胃結(jié)束后，麻醉各組大鼠取腹主動脈血，抗凝，取血清，-20 ℃保存，采用酶聯(lián)免疫法(ELISA法)檢測血清PGE2、IL-1β和TNF-α水平。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠一般情況及癥狀表現(xiàn) 造模3 d后，正常組大鼠咽部黏膜形態(tài)正常，淡紅隱隱，未見分泌物，正常飲食飲水，活動正常；模型組大鼠咽部黏膜出現(xiàn)充血、紅腫，飲水增多，食欲下降，狀態(tài)萎靡，自主活動減少，同時伴有撓抓口部。灌胃2 d后，克拉霉素組、疏風(fēng)解毒膠囊各組大鼠咽部黏膜紅腫均有不同程度減輕，疏風(fēng)解毒膠囊高劑量組和克拉霉素組灌胃5 d后基本痊愈；模型組灌胃5 d后癥狀有輕微改善。

2.2各組大鼠血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平比較 模型組大鼠血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平均明顯高于正常組(P均<0.05)?？死顾亟M、疏風(fēng)解毒膠囊各組大鼠血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平均明顯低于模型組(P均<0.05)，且克拉霉素組、疏風(fēng)解毒膠囊高劑量組均明顯低于疏風(fēng)解毒膠囊中、低劑量組(P均<0.05)，但疏風(fēng)解毒膠囊高劑量組均明顯高于克拉霉素組(P均<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平比較

3 討 論

急性咽炎屬于上氣道急性炎癥的一部分，多由細(xì)菌、病毒感染或理化因素刺激所致，病理改變以咽黏膜及黏膜下的急性炎癥為主，可以累及咽部淋巴組織，在臨床上發(fā)病率約為5%[11]。急性咽炎如果治療不及時或治療不當(dāng)，可轉(zhuǎn)化成慢性咽炎，甚至可以引發(fā)一系列耳鼻咽喉相關(guān)并發(fā)癥，給患者的工作和生活帶來較大的影響。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為急性咽炎屬“急喉痹”“風(fēng)熱喉痹”的范疇，臨床以實證、熱證居多，故治療應(yīng)以清熱解毒、消腫利咽為法。疏風(fēng)解毒膠囊由虎杖、板藍(lán)根、連翹、敗醬草、馬鞭草、柴胡、蘆根、甘草8味藥物組成，具有疏風(fēng)清熱、解毒利咽之功，用于治療急性咽炎臨床療效確切，且可用于急性細(xì)菌性支氣管炎的輔助治療[12]。本實驗以臨床常用抗生素克拉霉素作用對照藥物，觀察了不同劑量疏風(fēng)解毒膠囊對急性咽炎大鼠的干預(yù)效果，結(jié)果顯示干預(yù)5 d后克拉霉素組、疏風(fēng)解毒膠囊各組大鼠咽部黏膜紅腫均有不同程度減輕，疏風(fēng)解毒膠囊高劑量組和克拉霉素組灌胃5 d后基本痊愈，證實疏風(fēng)解毒膠囊治療急性咽炎效果確切。

現(xiàn)代研究表明，炎癥的發(fā)生和發(fā)展及轉(zhuǎn)歸與機(jī)體免疫反應(yīng)具有密切相關(guān)性。IL-1β是一種非常重要的炎癥介質(zhì)，是前炎癥網(wǎng)鏈中的一級細(xì)胞因子[13]；TNF-α是炎癥啟動的細(xì)胞因子，在炎癥發(fā)生和發(fā)展中起到核心作用，在這一階段其會持續(xù)升高，并會導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生一系列生理及病理改變，IL-1β、TNF-α和其他多種細(xì)胞因子一起構(gòu)成炎癥介質(zhì)網(wǎng)[14-15]；PGE2是一種重要的免疫負(fù)調(diào)節(jié)劑,其能選擇性抑制Th1及其所產(chǎn)生的細(xì)胞因子的合成,并促進(jìn)Th1向Th2的轉(zhuǎn)換,同時PGE2預(yù)處理可降低巨噬細(xì)胞表面IL-12受體的表達(dá)并抑制IL-1、TNF-α、IL-12、IL-8的表達(dá),刺激IL-10表達(dá),導(dǎo)致TNF-α、IL- 2等促炎介質(zhì)的合成減少,IL-4、IL-10等抗炎介質(zhì)合成增加。故其可上調(diào)抗炎因子水平、下調(diào)促炎因子水平,從而調(diào)控過度的炎癥反應(yīng)[16-17]。本實驗研究結(jié)果顯示，模型組血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平均明顯高于正常組，表明大鼠發(fā)生急性咽炎后，這些指標(biāo)會顯著升高；藥物干預(yù)后，各組血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平均明顯降低，且克拉霉素組、疏風(fēng)解毒膠囊高劑量組降低更明顯，表明降低血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平可能是疏風(fēng)解毒膠囊有效治療急性咽炎的作用機(jī)制之一。

綜上所述，疏風(fēng)解毒膠囊治療急性咽炎療效確切，作用機(jī)制可能與降低血清中PGE2、IL-1β、TNF-α水平，促進(jìn)局部炎癥減輕或消除有關(guān)。與克拉霉素相比，疏風(fēng)解毒膠囊不易產(chǎn)生耐藥，臨床更值得推薦應(yīng)用。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。