王 雨 李沛檑 王 源 許 越 王 燃 劉琦琦 李夢(mèng)瑤 吳恒梅
(佳木斯大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 黑龍江佳木斯 154007)
昆侖雪菊(Coreopsis tinctoriaL.),又名兩色金雞菊,是新疆的特色藥材之一,可藥食兩用[1-2]。通常被作為花茶飲用,但其藥理功效較強(qiáng)。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明,雪菊的某些化學(xué)成分具有調(diào)節(jié)糖脂代謝、預(yù)防糖尿病等功能[3]。
雛菊(Bellis perennisL.),又名春菊、太陽菊、延命菊等,是菊科雛菊屬多年生草本植物[4]。其花色多種,小巧玲瓏,觀賞價(jià)值高。由于雛菊植株較矮小,適合栽于花壇、花境的邊緣等地,也可盆栽觀賞[5-6]。
翠菊(Calistephus chinensisL.),又名江西臘、五月菊,是菊科翠菊屬一年生草本植物,原產(chǎn)于我國北部及西南地區(qū)。翠菊花色鮮艷,花期長,在國內(nèi)外做觀賞植物,亦可入藥。目前常被用在庭院美化、室內(nèi)裝飾、城市景觀布置等方面,是城市園林綠化常用的草本花卉[7-8]。
目前我國對(duì)羅勒水提液對(duì)雜草生長的影響[9]、紫蘇浸提液對(duì)野草香生長的影響[10]以及重金屬脅迫對(duì)種子萌發(fā)影響[11-13]等方面研究較多,而以雪菊為材料,研究對(duì)雛菊和翠菊種子萌發(fā)的影響的相關(guān)報(bào)道卻較少。本實(shí)驗(yàn)探究了不同濃度雪菊浸提液對(duì)雛菊、翠菊種子萌發(fā)的影響,進(jìn)一步研究最適宜種子生長的方式,以期為園林花卉設(shè)計(jì)中品種選擇提供參考。
雪菊花卉,雛菊種子,翠菊種子,3%高錳酸鉀溶液,蒸餾水,三氯乙酸,硫代巴比妥酸,石英砂,氫氧化鈉。
1.2.1 雪菊浸提液的制備及種子處理
取選擇品種優(yōu)良的雪菊花卉,洗凈,剪碎后烘干稱50 g。將50 g 雪菊浸泡到500 mL、28 ℃蒸餾水中,24 h后,用紗布過濾兩次,濾紙過濾一次,得到濾液,將濾液定容至500 mL,形成母液。取母液配制濃度分別為10 g·L-1、20 g·L-1、50 g·L-1、100 g·L-1的雪菊浸提液,以蒸餾水為對(duì)照。
取大小均勻的雛菊和翠菊種子,將其放入25 ℃的水中篩選出飽滿的種子,用3%的高錳酸鉀溶液進(jìn)行消毒,蒸餾水浸泡并沖洗干凈。分別將雛菊、翠菊種子均勻擺放于平鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿中,將5 mL 不同濃度的雪菊浸提液分別加入培養(yǎng)皿,每皿均勻放入100 粒種子,以蒸餾水作為對(duì)照,每組處理設(shè)三個(gè)重復(fù),共30 個(gè)培養(yǎng)皿。將培養(yǎng)皿置于室溫下培養(yǎng),每天開蓋通風(fēng)10 min,每隔一天加入1 mL 培養(yǎng)液。
1.2.2 指標(biāo)測(cè)定
以胚根突破種皮并伸長1 mm 作為發(fā)芽標(biāo)記,種子萌發(fā)后,在第10 天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率,測(cè)量萌發(fā)后種子的根和芽長、鮮重并記錄。
發(fā)芽勢(shì)=(發(fā)芽種子數(shù)/每個(gè)培養(yǎng)皿中種子總數(shù))×100%
發(fā)芽率=(發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù))×100%
相對(duì)電導(dǎo)率=(初始電導(dǎo)率值/滅殺植物組后電導(dǎo)率值)×100%
MDA=[6.452×(OD532nm-OD600nm)-0.559×OD450nm]×Vt/(VS×W)
用Excel 進(jìn)行表格處理并制圖,以SPSS19.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,采用Duncan 分析數(shù)據(jù)。
不同濃度的浸提液對(duì)雛菊、翠菊種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率有不同的影響。由表1可以看出,隨著雪菊浸提液濃度的增加,雛菊的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率呈下降趨勢(shì),高濃度雪菊浸提液抑制了雛菊種子的萌發(fā)。隨著雪菊浸提液濃度的增加,前期對(duì)翠菊的發(fā)芽勢(shì)影響不明顯,整體呈下降趨勢(shì)。隨著雪菊浸提液濃度增加,翠菊的發(fā)芽率逐漸降低。
由表2可知,隨著雪菊浸提液濃度的升高,雛菊、翠菊種子萌發(fā)后幼苗的根長和芽長呈降低趨勢(shì)。當(dāng)浸提液的濃度為100 g·L-1時(shí),雛菊生根受抑制;當(dāng)浸提液的濃度為20 g·L-1~100 g·L-1時(shí),雛菊芽長受抑制,與對(duì)照組有明顯的差異(p<0.05);當(dāng)浸提液的濃度為50 g·L-1、100 g·L-1時(shí),翠菊幼苗生長受到抑制,且與對(duì)照組差異明顯(p<0.05)。但當(dāng)浸提液濃度為10 g·L-1時(shí),芽長高于對(duì)照組,對(duì)翠菊的生長有促進(jìn)作用。隨著浸提液濃度的升高,雛菊和翠菊的鮮重逐漸降低。在浸提液濃度為20~100 g·L-1時(shí),雛菊和翠菊的鮮重較對(duì)照組下降較明顯,說明在高濃度影響下,會(huì)抑制植物的生長。
表2 不同濃度雪菊浸提液對(duì)雛菊、翠菊幼苗生長影響
電導(dǎo)率的大小可以反映植物細(xì)胞膜的選擇滲透作用。根據(jù)表3可以看出,隨著雪菊浸提液濃度的升高,電導(dǎo)率逐漸增大。當(dāng)浸提液的濃度為10 g·L-1時(shí),對(duì)翠菊幾乎無影響,但對(duì)雛菊的影響較大;當(dāng)浸提液的濃度為20~100 g·L-1時(shí),電導(dǎo)率明顯升高(p<0.05),對(duì)雛菊和翠菊都產(chǎn)生了較明顯的破壞。MDA 含量越多,說明對(duì)膜的破壞程度越大。當(dāng)浸提液的濃度為100 g·L-1時(shí),兩種植物的MDA 含量都最大,對(duì)植物細(xì)胞膜的破壞程度較大,明顯抑制植物的生長。
表3 不同濃度雪菊浸提液對(duì)雛菊、翠菊相對(duì)電導(dǎo)率和MDA 含量影響
種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)等是衡量種子發(fā)芽能力的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)中,在種子萌發(fā)特征上,不同濃度雪菊浸提液對(duì)雛菊、翠菊種子的影響不同。其中,高濃度浸提液對(duì)雛菊、翠菊生長有一定的抑制作用,且在浸提液濃度100 g·L-1時(shí)抑制作用最大,說明不同雪菊浸提液濃度對(duì)不同植物有不同的影響,這與曲同寶、李怡瑩等[14]研究火炬樹水浸提液對(duì)波斯菊種子萌發(fā)影響的結(jié)果有相似之處。
相對(duì)電導(dǎo)率能夠衡量植物細(xì)胞膜的破壞程度。不同濃度的雪菊浸提液對(duì)雛菊和翠菊細(xì)胞膜的破壞程度不同。隨著浸提液濃度的增大,兩種植物的電導(dǎo)率逐漸增大,說明對(duì)細(xì)胞膜的破壞程度逐漸增大。雛菊和翠菊在浸提液濃度100 g·L-1下時(shí),破壞程度較大,對(duì)植物的生長產(chǎn)生抑制的作用,說明隨著浸提液濃度的升高逐漸影響植物正常生長,與計(jì)紅芳、宋瑞清等[15]研究絨白乳菇發(fā)酵液提取物對(duì)楊樹葉枯病菌保護(hù)酶的各種指標(biāo)的結(jié)果有相似之處。
MDA 含量是衡量植物細(xì)胞受損程度的重要指標(biāo)之一。本試驗(yàn)中,隨著浸提液濃度升高,兩種植物的MDA 含量逐漸增加,雛菊在不同浸提液濃度下差異較明顯(p<0.05),不利于植物的生存生長;而翠菊在10 g·L-1濃度時(shí)差異不顯著(p>0.05),其他濃度差異顯著,說明高濃度雪菊浸提液不利于植物生長發(fā)育,與楊田甜[16]研究的火柴頭浸提液對(duì)4種作物化感作用的研究結(jié)果相似。
在植物生長過程中,外界環(huán)境變化對(duì)種子萌發(fā)的影響較大,而幼苗的生長狀況直接影響植物的生長發(fā)育。本試驗(yàn)通過雪菊浸提液對(duì)雛菊、翠菊種子的處理,探尋不同濃度浸提液對(duì)其種子萌發(fā)和幼苗生長的影響。結(jié)果表明,低濃度下,雛菊發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、根長、芽長受到的影響較小,50 g·L-1和100 g·L-1濃度明顯抑制兩種植物的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率。隨著雪菊浸提液濃度的升高,兩種植物細(xì)胞膜的破壞程度逐漸增大,不利于植物生長。
不同濃度的雪菊浸提液在生理生化水平上影響雛菊和翠菊的正常生長,并造成一定的傷害。雪菊浸提液濃度影響雛菊和翠菊的電導(dǎo)率和MDA 含量,導(dǎo)致兩種植物細(xì)胞膜透性增大。