血清TLR4、CD137L和T淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)在診斷CHB嚴(yán)重程度方面的臨床價(jià)值

王春娥，任 靜

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫市人民醫(yī)院，江蘇 無(wú)錫 214000）

慢性乙型病毒性肝炎（CHB）是目前臨床上常見的傳染病之一。該病具有傳染性強(qiáng)、發(fā)病率高的特點(diǎn)。CHB 患者若未得到及時(shí)有效的治療，可發(fā)生肝纖維化或癌變，進(jìn)而威脅其生命。準(zhǔn)確地評(píng)估CHB 患者的病情有利于臨床醫(yī)生盡早對(duì)其進(jìn)行有針對(duì)性的治療。CHB 患者肝損傷的情況與T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)密切相關(guān)。CD137L 是導(dǎo)致T 淋巴細(xì)胞活化的重要因子之一[1]。Toll 樣受體4（TLR4）是參與非特異性免疫反應(yīng)的重要蛋白質(zhì)分子之一[2]。本文主要是探討對(duì)CHB 患者進(jìn)行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)在診斷其病情嚴(yán)重程度方面的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對(duì)象為2018 年3 月至2020 年7 月期間南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫市人民醫(yī)院收治的242 例CHB 患者和同期在該醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的50 例健康人作為研究對(duì)象。根據(jù)CHB 患者病情的嚴(yán)重程度將其分為輕度組（88 例）、中度組（104 例）和重度組（50 例）[3]。將50 例健康人作為健康組。CHB 患者的納入標(biāo)準(zhǔn)為：1）病情符合臨床上關(guān)于CHB 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。2）同意參與本次研究，并簽署了參與本次研究的知情同意書。CHB 患者的排除標(biāo)準(zhǔn)為：1）患有酒精肝、脂肪肝等其他肝疾病。2）合并有嚴(yán)重的心、腦、肺、腎等重要器官功能不全。健康組研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)為：1）身體健康。2）同意參與本次研究，并簽署了參與本次研究的知情同意書。在CHB 患者中，有男138 例，女106 例；其平均年齡為（42.15±6.08）歲。健康組研究對(duì)象中有男28 例，女22 例；其平均年齡為（43.18±7.12）歲。四組研究對(duì)象的性別、年齡相比，P ＞0.05。

1.2 方法

抽取所有研究對(duì)象5 ml 的空腹外周靜脈血。將血樣離心后，取血清進(jìn)行檢測(cè)。使用流式細(xì)胞儀（相關(guān)試劑盒由CALTAG 公司提供）檢測(cè)所有研究對(duì)象血清T 淋巴細(xì)胞亞群的水平。使用酶聯(lián)免疫吸附法（相關(guān)試劑盒由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供）檢測(cè)所有研究對(duì)象血清CD137L及TLR4 的水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察四組研究對(duì)象血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群的水平。分析CHB 患者血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群的水平與其病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性。評(píng)估進(jìn)行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)在診斷CHB患者病情嚴(yán)重程度方面的效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將本次研究中的數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（± s ）表示，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示。兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)。血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細(xì)胞亞群的水平與CHB 患者病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性采用Spearman 進(jìn)行分析，輕度賦值為0，中度賦值為1，重度賦值為2。采用ROC 曲線分析進(jìn)行血清TLR4，CD137L 及T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)對(duì)評(píng)估CHB 患者病情嚴(yán)重程度的效能。以P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組研究對(duì)象血清TLR4 及CD137L 的水平

輕度組患者與健康組研究對(duì)象血清TLR4 及CD137L 的水平相比，P ＞0.05。中度組患者及重度組患者血清TLR4及CD137L 的水平均高于健康組研究對(duì)象及輕度組患者，P ＜0.05。重度組患者血清TLR4 及CD137L 的水平均高于中度組患者，P ＜0.05。詳見表1。

表1 四組研究對(duì)象血清TLR4 及CD137L 的水平（± s ）

表1 四組研究對(duì)象血清TLR4 及CD137L 的水平（± s ）

注：a 與健康組相比，P ＜0.05；b 與輕度組相比，P ＜0.05，c 與中度組相比，P ＜0.05。

組別 例數(shù) CD137L（ng/L） TLR4（pg/mL）健康組 50 108.47±44.26 1.07±0.22 輕度組 88 129.16±37.94a 4.72±1.51a中度組 104 217.28±64.32ab 18.67±2.88ab重度組 50 608.94±113.87abc 34.77±5.48abc F 值 659.02 1510.84 P 值 0.000 0.000

2.2 四組研究對(duì)象血清T 淋巴細(xì)胞亞群的水平

輕度組患者、中度組患者及重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于健康組研究對(duì)象，其血清CD8＋的水平均高于健康組研究對(duì)象，P ＜0.05。中度組患者及重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于輕度組患者，其血清CD8＋的水平均高于輕度組患者，P ＜0.05。重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于中度組患者，其血清CD8＋的水平均高于中度組患者，P ＜0.05。詳見表2。

表2 四組研究對(duì)象血清T 淋巴細(xì)胞亞群的水平（± s ）

表2 四組研究對(duì)象血清T 淋巴細(xì)胞亞群的水平（± s ）

注：d 與健康組相比，P ＜0.05；e 與輕度組相比，P ＜0.05，f 與中度組相比，P ＜0.05。

組別 例數(shù) CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋/CD8＋健康組 50 66.51±7.04 42.68±6.61 27.44±3.71 1.61±0.54輕度組 88 54.21±6.30d 38.84±5.21d 36.52±4.75d 1.25±0.14d中度組 104 41.64±5.25de 31.09±4.15de 39.66±6.18de 0.97±0.12de重度組 50 28.17±6.58def 25.51±4.44def 43.27±9.54def 0.53±0.04def F 值 392.08 135.91 63.31 180.18 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 CHB 患者血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細(xì)胞亞群的水平與其病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性

CHB 患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋與其病情嚴(yán)重的程度呈負(fù)相關(guān)性，其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平與其病情嚴(yán)重的程度呈正相關(guān)性，P ＜0.05。詳見表3。

表3 CHB 患者血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細(xì)胞亞群的水平與其病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性

2.4 進(jìn)行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷CHB 患者病情嚴(yán)重程度的效能

與單獨(dú)進(jìn)行血清TLR4、CD137L 或T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)相比，為CHB 患者使用血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)的方法診斷其病情嚴(yán)重程度的敏感度、準(zhǔn)確度及特異度更高，P ＜0.05。詳見表4。

表4 進(jìn)行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷CHB 患者病情嚴(yán)重程度的效能

3 討論

肝是人體最大的消化器官，具有分泌、代謝及免疫調(diào)節(jié)功能。部分人在感染少量的乙型肝炎病毒（HBV）后可通過(guò)自身免疫反應(yīng)清除病毒。還有一部分人在感染HBV 后會(huì)罹患急性或慢性肝炎。其中CHB 患者的病情可發(fā)展成為肝硬化、肝癌，進(jìn)而嚴(yán)重威脅其健康。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)罹患CHB 的患者已超過(guò)2 千萬(wàn)人次。準(zhǔn)確地評(píng)估CHB 患者的病情有助于臨床醫(yī)生為其制定科學(xué)有效的治療方案，緩解其病情。

HBV 能誘導(dǎo)T 淋巴細(xì)胞活化，產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，引起肝炎、肝損傷[4]。按照表面分化抗原的不同，T 淋巴細(xì)胞可分為多個(gè)亞群。CHB 患者感染HBV 后，抗原呈遞細(xì)胞會(huì)將處理過(guò)的HBV 抗原呈遞給CD4＋和CD8＋。CHB 患者血清T 淋巴細(xì)胞亞群的水平可以反映出其體內(nèi)細(xì)胞免疫的狀態(tài)。共刺激分子CD137 及其配體CD137L 是能夠激活T 淋巴細(xì)胞的第二信號(hào)分子。CHB 患者血液中CD137L 的水平與其肝損傷的程度有關(guān)[5]。TLR4 是參與天然免疫的一類跨膜非催化性蛋白分子，可通過(guò)識(shí)別微生物的結(jié)構(gòu)分子來(lái)激活免疫應(yīng)答反應(yīng)。TLR4 具有輔助清除HBV 病毒的作用。隨著病情的進(jìn)展，CHB 患者的病毒載量增加，其肝組織對(duì)HBV 感染所做出的免疫反應(yīng)增強(qiáng)，其體內(nèi)活化的T 淋巴細(xì)胞及各種與炎癥、纖維化相關(guān)的介質(zhì)增多，因此其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平增高，血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋降低[6]。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，CHB 患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋與其病情嚴(yán)重的程度呈負(fù)相關(guān)性，其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平與其病情嚴(yán)重的程度呈正相關(guān)性。與單獨(dú)進(jìn)行血清TLR4、CD137L 或T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)相比，為CHB 患者使用血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)的方法診斷其病情嚴(yán)重程度的敏感度、準(zhǔn)確度及特異度更高。對(duì)CHB 患者進(jìn)行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細(xì)胞亞群聯(lián)合檢測(cè)在診斷其病情嚴(yán)重程度方面具有較高的臨床價(jià)值。