馬玉勤 馬振林
(1,臨夏州職業(yè)技術(shù)學(xué)校 731100;2,甘肅省廣河縣畜牧局 731300)
2019 年秋季,臨夏縣某奶牛養(yǎng)殖戶發(fā)生牛肝片吸蟲病,該病又稱片形吸蟲病,多發(fā)生于夏秋季,牛和羊均可發(fā)生。肝片吸蟲的成蟲在動物膽管內(nèi)排出大量蟲卵,卵隨膽汁進(jìn)入腸道,隨糞便排出體外,在適宜條件下孵出毛蚴,毛蚴遇到中間宿主螺,經(jīng)過幾個階段發(fā)育為囊蚴,當(dāng)牛吃了附著囊蚴的水草后,蟲體進(jìn)入消化道,在十二指腸內(nèi)脫囊進(jìn)入腹腔,經(jīng)肝包膜進(jìn)入肝臟,在膽道內(nèi)發(fā)育為成蟲,成為傳染性的一種寄生蟲病。隨著養(yǎng)牛規(guī)模和養(yǎng)殖戶的增加,該病呈散發(fā)性或地方性流行。其臨床主要特征為體形消瘦,黏膜發(fā)黃,高度貧血,產(chǎn)奶量急劇下降癥狀。病牛反芻異常,食欲減退,一般無熱痛,繼而出現(xiàn)周期性瘤胃膨脹,拉稀,行動遲緩,后期出現(xiàn)下頜、胸下水腫,觸診有捏面團(tuán)的感覺。
2019 年10 月,臨夏縣養(yǎng)殖戶張某發(fā)現(xiàn)自家飼養(yǎng)的17 頭奶牛中有5 頭奶牛出現(xiàn)產(chǎn)奶量減少、所產(chǎn)牛奶稀薄,飲食量減退、反芻異常,其中一頭較為嚴(yán)重。張某懷疑是近期因天氣變化多端,氣溫驟降引起牛受風(fēng)寒感冒,便灌服常用抗感冒藥物治療,用藥10d 后癥狀并未緩解,隨著時間的推移,其中患病較重的奶牛幾乎停止產(chǎn)奶,長時間俯臥地面,口腔流口水,不愿站立,張某為了降低經(jīng)濟(jì)損失,將其宰殺后出售肉品。
患病奶牛逐漸身體消瘦,背毛粗亂并易脫落,食欲減少,反芻異常,病牛表現(xiàn)剛開始為精神沉郁,流涕,食欲不振,反芻慢慢減少,繼而出現(xiàn)周期性瘤胃膨脹,拉稀,行動遲緩,產(chǎn)奶量下降,奶汁稀薄,不愿行走,后期出現(xiàn)眼結(jié)膜發(fā)黃,下頜、胸下水腫,觸診有捏面團(tuán)的感覺。
尸體消瘦,嚴(yán)重貧血,眼結(jié)膜和皮下發(fā)黃,腸壁和肝實(shí)質(zhì)損傷。肝腫大,肝包膜上有纖維素沉著,觸摸時有核桃大小不等的硬結(jié),觸診堅(jiān)硬。肝小葉間由結(jié)締組織增生,切開小葉后發(fā)現(xiàn)有暗紅色蟲道,在蟲道內(nèi)有凝固的血液和童蟲,膽道內(nèi)有大量童蟲和成蟲(圖1)及污濁稠厚的液體,膽管擴(kuò)張、管壁增厚并有小出血點(diǎn),膽汁停滯,其黏膜有出血點(diǎn),脾臟腫大,腹內(nèi)多組織器官呈貧血狀,把肝小葉切開,在清水中放置一會水面浮起一層童蟲和成蟲。
對所飼養(yǎng)的17 頭奶牛進(jìn)行編號,分別編為“1”“2”“3”……“17”,對糞便分別取樣進(jìn)行蟲卵、幼蟲和成蟲的檢查,具體結(jié)果如附表(+:代表檢出,-:代表未檢出)。
在載玻片上級滴上一滴甘油和一滴水,充分混合,按照對17 頭牛的編號順序,用牙簽挑取少量糞便加入其中,混勻,經(jīng)過處理,在玻片上留有一層均勻的糞液膜,蓋上蓋玻片,置顯微鏡下檢查。
按照編號,每個編號稱取糞便5g,加水?dāng)噭?,先通過60目的鐵篩過濾,濾下液收集于三角杯中,靜置30min,頃去上層液,保留沉渣,再加水混勻、沖洗,反復(fù)操作5 次,直到洗出液體清澈透明,吸取沉淀渣檢查。漏斗裝滿水后,將一塊邊長為9cm 的正方形薄紗平放入水中。
準(zhǔn)備一個中等大小的漏斗,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一個小試管。按照編號,每個編號稱取糞便15g 放于漏斗中薄紗上,將薄紗的4 個角折到糞便上,加入40℃溫水到淹沒糞便為止,將漏斗靜置一夜,拔取底部小試管,取其沉渣,置于凹窩式反應(yīng)板的凹窩內(nèi)直接檢查或顯微鏡下檢查,發(fā)現(xiàn)數(shù)量不等、大小不一的肝片吸蟲的幼蟲和成蟲。
蟲體大體呈葉片狀,被腹扁平,活體蟲體呈紅棕色,大小因患病牛的發(fā)育及營養(yǎng)狀況而異,成蟲大小約為20mm×8mm,前端頭錐呈三角形,肩部先寬后逐漸變窄??谖P位于頭錐前端,腹吸盤較大,位于口吸盤稍后處。生殖孔位于口吸盤與腹吸盤兩者之間。
用艾爾利希式(Ehrlich)蘇木精染色法進(jìn)行染色封存。
艾爾利希式(Ehrlich)蘇木精染色液的配制:2g 蘇木精,100ml 無水乙醇,100ml 蒸餾水,10ml 冰醋酸,100ml 甘油和10g 鉀明礬,進(jìn)行充分混合配制,配制液靜置6 周,染色前將1 份貯存液以3 份用45%醋酸進(jìn)行稀釋,制成醋酸稀釋液備用。具體染色操作步驟如下。
(1)把制作好的標(biāo)本用含1%鹽酸的醋酸稀釋液進(jìn)行分化,每隔3min 觀察標(biāo)本著色情況,染色持續(xù)10min。
(2)將著色的標(biāo)本放在冰醋酸中脫水,脫水時間持續(xù)30min。
(3)將脫水后的標(biāo)本分別置于冰醋酸和甲基水楊酸不同比例(3:1、1:1、1:3)的混合液中,使其充分滲透后,蟲體體表透明取出,用加拿大松脂密封固定。(臨夏現(xiàn)代職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系實(shí)驗(yàn)室制,圖2)。
蟲卵檢出率:70.5%,幼蟲檢出率:76.4%,成蟲檢出率:29.4%。
根據(jù)上述發(fā)病情況、臨床癥狀、結(jié)合病理變化和糞便檢查發(fā)現(xiàn)蟲卵、幼蟲、成蟲,確診為牛肝片吸蟲病。
(1)六氨乙烷,每千克體重0.2~0.4mg,一次內(nèi)服。
(2)硝氯酚,每千克體重0.5~1mg,深部肌肉注射。
(3)阿苯達(dá)唑,每千克體重15~25mg,口服,權(quán)效果也良好。
(4)雙乙酰胺苯氧醚,每千克體重120~150mg,一次內(nèi)服。
(1)診療注意事項(xiàng)。部分家畜的急性病例,其體內(nèi)片形吸蟲蟲體由于發(fā)育尚未成熟,通過糞便檢查時不易發(fā)現(xiàn)蟲卵,此時需結(jié)合病畜(尸體)病理進(jìn)行解剖檢查,觀察肝臟與膽管部位中是否存在童蟲。
(2)驅(qū)蟲。肝片吸蟲病的傳播主要是源于病畜和帶蟲者,驅(qū)蟲不僅是治療病畜,也是積極的預(yù)防措施。每年應(yīng)有二次定期驅(qū)蟲,第一次應(yīng)在秋末冬初,第二次應(yīng)在冬末春初。
(3)對病牛糞便每天清除后進(jìn)行堆肥,及時清除并堆積成1~1.5m3 的糞堆,用生物熱處理,可有效殺滅蟲卵,以免幼蟲污染環(huán)境。
(4)消滅中間宿主。由于發(fā)病牛被飼養(yǎng)在半農(nóng)半牧地帶,常年陰濕,容易滋生螺,給肝片吸蟲的傳染創(chuàng)造了條件,滅螺是預(yù)防片形吸蟲病的重要措施,因此,用氯硝柳胺藥物消滅中間宿主螺,每升水中加入40mg,充分混勻后噴灑在飼草上。
(5)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。盡可能的選擇地勢較高干燥的地區(qū)放牧。舍飼飼養(yǎng)的牛群用消滅過中間宿主的草料或晾曬后青草再飼喂,牛的飲水用自來水或井水,并保持水源清潔,以預(yù)防感染。
附表 張某養(yǎng)殖奶牛蟲卵、幼蟲、成蟲檢查統(tǒng)計(jì)表